Cyclin D1在胶质瘤细胞系中表达分布模式的初步研究

目的：探讨cyclin D1在胶质瘤细胞系中的细胞周期表达模式，将为从生物学功能上阐明cyclin D1在胶质瘤细胞周期演进中的作用．方法：利用流式细胞仪双参数法和细胞同步化，确定cyclin D1在胶质瘤细胞系SHG-44和BT-325中的细胞周期表达分布模式．结果：在胶质瘤细胞系SHG-44和BT-325中，Cyclin Dl的表达呈细胞周期依赖性：在SHG-44中，cyclin D1在G1期表达最高，4h左右达到峰值，S期及G2／M期下降，但仍可检测到；在BT-325中，cyclin D1在G1期表达最高，6h左右达到峰值，S期及G2／M期下降，但仍可检测到．结论：cyclin D1蛋白质的表达呈细胞周期依赖性，且与细胞周期行进有关；cyclin D1在SHG-44和BT-325胶质瘤细胞进入G1期的早期发挥着重要的生物学作用。     

莱菔硫烷对人膀胱癌细胞周期的影响及机制研究

背景与目的:探讨莱菔硫烷对人膀胱癌细胞(T24)细胞周期的影响及作用机制。材料与方法:采用噻唑蓝(MTT)法研究不同浓度的莱菔硫烷对T24细胞生长的抑制作用并测定其半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞仪检测莱菔硫烷对T24细胞周期的影响;采用westernblot研究莱菔硫烷对T24细胞中细胞周期蛋白依赖激酶抑制剂P16和P27的表达情况。结果:在较低剂量范围内(≤40μmol/L),随着作用剂量的增加,莱菔硫烷对T24细胞的生长的抑制作用也明显增强。10、20、40μmol/L莱菔硫烷的抑制率分别为(12.5±3.95)%,(25.0±2.50)%、(50.0±5.33)%;在较高剂量(60μmol/L~160μmol/L)时,这种抑制作用不再呈剂量依赖性;莱菔硫烷作用72h后的IC50值为(51.12±7.10)μmol/L;莱菔硫烷能使T24细胞周期阻滞于G0/G1期,20μmol/L莱菔硫烷作用48h后,在G0/G1峰之前出现凋亡峰;20μmol/L莱菔硫烷作用于T24细胞8、12、24h后能明显诱导P27蛋白的表达,作用早期(8h)时能诱导P16蛋白的表达。结论:莱菔硫烷能抑制T24细胞生长并使该细胞周期阻断在G0/G1期,其作用机制主要是通过诱导P27蛋白及早期诱导P16蛋白来实现的。     

锌对小鼠骨髓造血细胞辐射损伤影响的研究

目的 探讨锌对γ射线诱导的体外培养小鼠骨髓细胞辐射损伤的影响及可能的机制。方法 分离小鼠骨髓细胞并悬浮于RPMI1640培养基中，分别将锌按20，200，400，800μmol／L终浓度加入细胞培养液中，5Gy^60Coγ射线照射骨髓细胞后置于37℃、5％CO2细胞培养箱中培养，16h后终止培养，分别测定有核细胞数、细胞DNA含量，并用流式细胞术和免疫组织化学技术测定细胞周期、细胞凋亡和基因表达的改变。结果5Gy60C07射线照射体外培养的小鼠骨髓细胞后，骨髓有核细胞数、DNA含量均明显下降；细胞凋亡率增加，细胞发生S期阻滞：bel-2蛋白表达下降，而p21蛋白的表达升高。照前在培养液中加入一定浓度的锌后，凋亡率下降，DNA含量升高，有核细胞数增加，细胞bcl-2蛋白表达升高而p21表达下降，细胞周期阻滞得到缓解。结论 锌可能通过影响细胞凋亡、细胞周期和基因表达而发挥辐射损伤防护作用。     

重组人白细胞介素－6对急性髓细胞白血病和非白血病祖细胞增殖影响的观察

观察了重组人白细胞介素－６（ｒｈＩＬ－６）对２２例非白血病骨髓和１２例急性髓细胞白血病骨髓祖细胞的增殖影响。结果表明ｒｈＩＬ－６有促进人正常骨髓造血祖细胞增殖作用，其主要作用靶细胞为粒系祖细胞。但对骨髓正常细胞群增殖周期各时相变化影响不明显。而在白血病骨髓，ｒｈＩＬ－６促克隆形成作用较低，但可促进Ｇ０／１期细胞进入Ｓ期。     

乳腺癌组织中Cyclin D1及p16蛋白表达的联合检测及其意义

目的:探讨乳腺癌中Cyclin D1及p16蛋白表达的相关性及其临床意义。方法:LSAB法检测多种乳腺组织中Cyclin D1及p16蛋白的表达情况,结合有关临床资料,分析Cyclin D1和p16蛋白表达异常与乳腺癌中重要的临床病理因素的关系。结果:62例乳腺癌组织中,Cyclin D1蛋白过度表达占48·4%,其表达与乳腺癌组织学分级呈明显正相关,且Cyclin D1蛋白过度表达更常见于ER、PR阳性的乳腺癌中。乳腺癌旁组织中Cyclin D1蛋白过度表达为20·0%,其他几种乳腺组织很少有CyclinD1蛋白的过度表达。p16蛋白仅在58·1%的乳腺癌组织中有表达,且p16的表达与组织学分级程度有负相关关系。正常乳腺组织中未见p16蛋白的异常。结论:乳腺癌组织中存在着Cyclin D1蛋白的过度表达及p16蛋白的异常,二者对乳腺癌组织的增殖分化有一定的影响。     

丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1对血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制

目的 研究丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP1)对血管平滑肌细胞增殖的影响及机制。方法 转染MKP1质粒72h后，收集培养的血管平滑肌细胞(VSMC)，利用P^42／P^44磷酸化抗MAPK抗体通过免疫印迹法测定MAPK活性，用流试细胞仪测定细胞周期、细胞周期素和P27蛋白的表达。结果 转染MKP1质粒后，MAPK活性明显下降，VSMC阻滞于G0-G1期，同时抑制了细胞周期素D、E的表达，P27蛋白表达却明显增加。结论 MKP1抑制VSMC增殖可能是通过降低MAPK活性，抑制细胞周期素表达和增加P27蛋白表达途径实现的。     

大豆异黄酮与细胞凋亡的研究进展

1　大豆异黄酮促进细胞凋亡机理1 1　抑制酪氨酸激酶和拓扑异构酶Ⅱ的活性已有研究表明 ,大豆异黄酮是酪氨酸激酶 (PTK)的抑制剂 ,而PTK是信号转导机制和控制细胞生长的关键分子。因此抑制PTK ,可以抑制细胞生长 ,使之发生凋亡。现今研究的最新模式是PTK -STAT调控死亡基因的表达 ,酪氨酸磷酸化除了在变构、激活蛋白质的活力之外 ,更重要的功能是给该蛋白提供一个结构基因以促进其和其他蛋白质的相互作用而形成多蛋白复合体 ,蛋白复合体的形成再进一步促进蛋白质的磷酸化 ,周而复始 ,由最初蛋白质磷酸化产生的信号就一步一步传下去 …     

细胞周期信号转导研究与信号转导治疗

细胞增殖和分裂是一个复杂的生物学过程。细胞内存在的精密调节机制可以确保分裂后的子代细胞获得与亲代完全一致的遗传信息。细胞增殖过程由细胞周期执行，细胞周期进程由多种不同的细胞周期素(Cyclins)和周期素依赖性激酶(Cyclin Dependent Kinases，CDKs)所形成的复合物驱动。Cdks／cyclins复合物的激酶活性在多个层次上受到调节，这种多层次的调节机制，