组蛋白去乙酰化酶2的表达在烟草烟雾暴露后哮喘大鼠气道Th1/Th2平衡中的作用研究

目的 通过研究烟草烟雾暴露对哮喘大鼠气道组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）2以及血浆、支气管肺泡灌洗液（BALF）中干扰素（interferon,IFN）-γ、白细胞介素（interleukin,IL）-4表达的影响,探讨HDAC2在辅助性T淋巴细胞（T helper cell）Th1/Th2平衡中的作用。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、烟雾暴露+哮喘组、布地奈德+哮喘组、布地奈德+烟雾暴露+哮喘组,建立哮喘大鼠模型、哮喘大鼠烟雾暴露模型以及布地奈德干预模型。免疫组织化学法检测各组大鼠气道HDAC2蛋白的表达,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血浆和BALF中Th1型特征性细胞因子IFN-γ以及Th2型特征性细胞因子IL-4水平。结果 与对照组相比,烟雾暴露+哮喘组、哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P均<0.05）。与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组相比,哮喘组大鼠和烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;肺组织HDAC2蛋白的表达与血浆中IFN-γ表达呈正相关（r=0.533,P<0.01）,与IL-4表达呈负相关（r=-0.642,P<0.01）。结论 烟草烟雾暴露可以下调哮喘大鼠模型肺组织HDAC2蛋白的表达,从而影响气道炎症,IFN-γ、IL-4的表达以及布地奈德的治疗效果,这可能是烟草烟雾恶化哮喘气道Th 1/Th2平衡的一个免疫学机制。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗皮肤T-细胞淋巴瘤的临床研究进展

组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACI)作为一类非细胞毒性新型抗肿瘤的靶向治疗药物备受关注,其抗肿瘤应用日益广泛.尤其对皮肤T-细胞淋巴瘤(cutaneous T cell lymphoma,CTCL)的临床疗效显著,目前已有多种药物进入临床试验阶段.被美国食品药品监督管理局(FDA)批准上市用于治疗CTCL的4种药物中有异羟肟酸类Vorinostat (SAHA)和环四肽类Romidepsin为HDACI.另有两种HDACI(新型异羟肟酸类帕比司他Panobinostat和异羟肟酸类Belinostat)也进入临床研究阶段用于治疗CTCL.本文从CTCL的现有治疗方案出发,综述HDACI在治疗CTCL方面的研究进展.     

苯己异硫氰酸酯通过抑制组蛋白去乙酰化和诱导去甲基化来抑制MDS细胞生长

目的 为了探索治疗骨髓增生异常综合征（mylodysplasia syndrome,MDS）新的一类靶向药物,笔者研究了苯己异硫氰酸酯（phenylhexyl isothiocyanate,PHI）,1种合成的萝卜硫素（sulforphate,SFN）衍生物对MDS细胞作用。方法 MDS细胞株SKM-1经过不同浓度PHI处理3个平行孔后使用台盼蓝拒染法测定细胞活力,流式细胞术分析细胞周期相,荧光染料JC-1检测线粒体膜电位改变;甲基化特异性PCR检测去甲基化改变,Western blot法蛋白印迹分析p15基因表达和组蛋白乙酰化程度,以及ELISA法测定细胞培养上清中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的含量。结果 经过5μmol/L PHI处理后MDS细胞增殖受到抑制和产生凋亡,在诱导浓度低至10μmol/L细胞增殖减少了50%,和细胞周期分析显示MDS细胞停滞在细胞G₁期,PHI诱导p15基因去甲基化呈现浓度依赖性,进一步证明也以浓度依赖方式PHI诱导组蛋白H3高乙酰化。同时也表明,PHI抑制MDS细胞中VEGF产生,以及通过破坏线粒体膜电位诱导细胞凋亡。结论 PHI可以诱导p15基因去甲基化和组蛋白H3高乙酰化,具有对MDS p15基因去甲基化和组蛋白高乙酰化的双重表观遗传效应,从而启动了靶向途径抑制MDS细胞增殖。     

小鼠癫痫持续状态时组蛋白H3K9二甲基化水平的变化及其调控作用

目的研究癫痫持续状态对组蛋白H3K9二甲基化修饰的作用。方法用Western blot比较研究小鼠癫痫持续状态后大脑皮层和海马的组蛋白H3K9二甲基化水平及相关蛋白表达水平的变化。利用特异性抑制剂BIX01294处理原代培养的小鼠大脑皮层神经元,观察组蛋白H3K9二甲基化水平对谷氨酸脱羧酶GAD67表达水平的影响。用染色体免疫沉淀技术验证组蛋白H3K9甲基化酶G9a与GAD67的启动子区的相互作用。结果癫痫持续状态能够下调组蛋白H3K9甲基转移酶G9a的表达和组蛋白H3K9的二甲基化水平,同时上调GAD67的表达水平。在培养神经元中,用BIX01294抑制组蛋白H3K9二甲基化水平可以上调GAD67的表达水平。染色体免疫沉淀实验发现G9a能和GAD67启动子区域相互作用。结论癫痫持续状态下调组蛋白H3K9二甲基化水平及组蛋白H3K9甲基转移酶G9a的表达水平,并能引起GAD67表达水平上调。     

产科抗磷脂综合征的表观遗传学研究进展

产科抗磷脂综合征（APS）是一种系统性自身免疫性疾病,临床以早期复发性流产、早产、死胎、胎盘功能不全、子痫前期等病理妊娠为主要表现,主要病因是抗磷脂抗体持续阳性引发的动静脉血栓形成和免疫炎症反应。目前关于产科APS的研究多集中在实验室检测和临床特点上,缺少对其确切发病机制的深入探讨。众所周知,中性粒细胞、单核细胞、内皮细胞、血小板、滋养细胞的功能障碍是产科APS发生、发展的关键因素,近年来研究显示这些细胞的表观遗传学改变（主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA）涉及产科APS发病中免疫炎症反应、血栓形成和病理妊娠的基因表达和沉默。鉴于表观遗传学标志物作为产科APS诊断性标志物或治疗靶点的潜力,本文就产科APS发生、发展的表观遗传学机制作一综述。     

组蛋白甲基化及其对肿瘤发生的影响

组蛋白甲基化是蛋白常见的翻译后修饰方式之一,在机体内甲基化修饰过程是可逆的,组蛋白甲基化、去甲基化与肿瘤的发生发展有着密切的关系,所以本文针对组蛋白甲基化及去甲基化以及各自对肿瘤细胞的作用予以综述.     

组蛋白修饰在糖尿病发病中的作用

组蛋白修饰是一种重要的表观遗传学现象,对基因表达调控发挥着至关重要的作用。一般认为糖尿病是一种由环境因素、遗传因素及免疫因素等共同作用的代谢性疾病,其发病机制主要与胰岛素抵抗、胰岛素分泌不足及免疫炎症等密切相关。目前,糖尿病的发病机制尚未完全清楚,治疗中也有一定局限性。但有研究表明组蛋白修饰与糖尿病的发病有密切关系。     

抑制胆囊癌细胞内Janus激酶/信号转导与转录激活子1信号通路以下调吲哚胺2,3双加氧酶表达的意义

目的 探讨调控胆囊癌细胞内Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活子1(STAT1)信号通路抑制吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)表达的作用机制,为解除胆囊癌生物治疗中肿瘤产生的免疫耐受提供理论依据.方法 应用γ-干扰素和组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA处理胆囊癌SGC996细胞.Western blot方法检测IDO、STAT1以及干扰素调节转录因子1(IRF-1)的表达.用细胞免疫组化和激光共聚焦显微镜观察STAT1的入核情况,转染和荧光素酶报告基因分析γ激活序列(GAS)和干扰素刺激反应元件(ISRE)的活性.结果 胆囊癌细胞中IFN-γ刺激IDO的表达呈剂量和时间依赖性.SAHA抑制IDO的表达呈剂量依赖性.SAHA抑制STAT1的磷酸化和入核,抑制IFN-γ促进的GAS、ISRE和IRF-1的活性.结论 抑制人胆囊癌细胞中JAK/STAT1信号通路可导致IDO表达下降,表明调控JAK/STAT1信号通路可能会解除胆囊癌生物治疗中肿瘤产生的免疫耐受.     

表观遗传学与皮肤肿瘤

表观遗传学（Epigenetics）主要研究DNA序列不发生变化时,基因表达异常的机制,以及这种改变又是如何在有丝分裂和减数分裂过程中遗传给后代。表观遗传学机制主要涉及DNA甲基化（DNA methylation）、组蛋白修饰（Histone modification）和microRNA调控（MicroRNA interference）[1]。     

DNA甲基化和组蛋白修饰在肿瘤中的作用

在肿瘤的形成过程中包含两大类机制,基因机制(genetic mechanism)和表观基因机制(epigenetic mechanism).基因机制包括基因突变、染色体丢失和重排,产生结构异常的基因产物;表观基因机制主要指DNA5胞嘧啶甲基化,引起基因表达异常而DNA序列及基因产物不变.近几年来许多学者发现,组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等修饰导致染色质重构而抑制抑癌基因表达也是表观基因改变的一个重要机制.1999年,Alan Wolffe[1]将表观基因改变定义为"未发生DNA序列改变的可遗传的基因表达改变."