表观遗传学在白血病研究中的新进展

近年来研究表明表观遗传学异常是白血病发病机制中的重要组成部分.许多白血病都伴随表观遗传学的异常变化.白血病的DNA去甲基化治疗和组蛋白去乙酰化抑制剂治疗是建立在表观修饰的基础上不同于传统化疗的新方法 ,目前已开始应用于几种白血病的治疗.现就DNA甲基化和组蛋白修饰在白血病的发生、发展、治疗和预后等方面的最新进展作简要介绍.     

曲古菌素A抑制乳腺肿瘤干细胞的自我更新

目的研究组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古菌素A对乳腺肿瘤干细胞自我更新的影响;初步研究其抑制乳腺肿瘤干细胞自我更新的机制。方法悬浮培养乳腺癌细胞系MDA-MB-468、MDA-MB-231、MCF-7和SKBR3,用不同浓度曲古菌素A处理悬浮培养乳腺癌细胞7 d,用0.1%DMSO作对照;用次级细胞球形成率和乳腺癌细胞初级细胞球细胞中肿瘤干细胞即CD44+/CD24-细胞群的百分比评价曲古菌素A对乳腺癌干细胞自我更新的影响;乳腺癌细胞初级细胞球细胞中CD44+/CD24-细胞群的百分比用流式细胞仪检测,凋亡细胞百分比用Annexin-V法在流式细胞仪检测,Nanog、Sox2和Oct4 mRNA的表达用定量PCR法检测。结果100 nmol/L和500 nmol/L曲古菌素A均能部分抑制4个乳腺癌细胞系中肿瘤干细胞的自我更新,但10 nmol/L不行;500 nmol/L曲古菌素A诱导乳腺癌细胞初级细胞球细胞凋亡;曲古菌素A能下调乳腺癌细胞初级细胞球细胞Nanog和Sox2 mRNA的表达。结论曲古菌素A能部分抑制乳腺癌干细胞的自我更新,其机制与其能下调乳腺癌初级细胞球细胞Nanog和Sox2表达相关联,提示临床可用低浓度组蛋白乙酰化酶抑制剂和其他抗癌药物联用以便获得较好的乳腺肿瘤干细胞自我更新抑制效果,胚胎干细胞核心转录因子Nanog和Sox2可能作为肿瘤治疗的新靶标。     

组蛋白去乙酰化酶2的表达在烟草烟雾暴露后哮喘大鼠气道Th1/Th2平衡中的作用研究

目的 通过研究烟草烟雾暴露对哮喘大鼠气道组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase,HDAC）2以及血浆、支气管肺泡灌洗液（BALF）中干扰素（interferon,IFN）-γ、白细胞介素（interleukin,IL）-4表达的影响,探讨HDAC2在辅助性T淋巴细胞（T helper cell）Th1/Th2平衡中的作用。方法 50只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、哮喘组、烟雾暴露+哮喘组、布地奈德+哮喘组、布地奈德+烟雾暴露+哮喘组,建立哮喘大鼠模型、哮喘大鼠烟雾暴露模型以及布地奈德干预模型。免疫组织化学法检测各组大鼠气道HDAC2蛋白的表达,酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测血浆和BALF中Th1型特征性细胞因子IFN-γ以及Th2型特征性细胞因子IL-4水平。结果 与对照组相比,烟雾暴露+哮喘组、哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异均有统计学意义（P均<0.05）。与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠气道HDAC2蛋白表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组相比,哮喘组大鼠和烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与哮喘组相比,烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;与布地奈德+哮喘组相比,布地奈德+烟雾暴露+哮喘组大鼠血浆、BALF中IFN-γ表达减少,IL-4表达增加,差异均有统计学意义（P均<0.01）;肺组织HDAC2蛋白的表达与血浆中IFN-γ表达呈正相关（r=0.533,P<0.01）,与IL-4表达呈负相关（r=-0.642,P<0.01）。结论 烟草烟雾暴露可以下调哮喘大鼠模型肺组织HDAC2蛋白的表达,从而影响气道炎症,IFN-γ、IL-4的表达以及布地奈德的治疗效果,这可能是烟草烟雾恶化哮喘气道Th 1/Th2平衡的一个免疫学机制。     

胆囊癌组织中蛋白赖氨酸乙酰化的变化及临床意义

目的:探讨蛋白赖氨酸乙酰化在胆囊癌组织中的变化情况。方法:采用Western 免疫印迹法,分别检测30例胆囊癌组织和20例慢性胆囊炎组织中蛋白赖氨酸乙酰化的变化。结果:与慢性胆囊炎组织相比,胆囊癌组织中的蛋白赖氨酸乙酰化显著增加（P < 0.01）,乙酰化的显著增加主要发生在相对分子质量为10 000~36 000的蛋白。结论:利用赖氨酸乙酰化单克隆抗体特异性能够检测到胆囊组织蛋白的赖氨酸乙酰化,且相对分子质量为10 000~36 000蛋白的赖氨酸乙酰化增加显著。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合芬维A胺诱导人肝癌细胞凋亡的研究

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scdptaid、TSA分别联合芬维A胺诱导人肝癌细胞凋亡作用。方法组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid（10／zM）合芬维A胺（10／zM）、TSA（1／zM）联合芬维A胺（10／zM）分别处理人肝癌细胞株（SNU475。SNU449,SNU398,sK—HEP-1,PLC／PRF／5）。通过Caspase-3／7检测试剂盒和CellTiter—Glo发光细胞活力检测试剂盒监测组蛋白乙酰化酶抑制剂联合芬维A胺对肝癌细胞的影响。结果组蛋白去乙酰化酶抑制剂Scriptaid（10／zM）、Ts（1／zM）联合芬维A胺（10肚M）处理细胞24h能显著诱导人肝癌细胞株SNU475、SNU449、SNU389、SK—HEP-1、PLC／PRF／5凋亡（P〈0．01）。结论组蛋白乙酰化酶抑制剂Scriptaid、TSA联合芬维A胺能诱导肝癌细胞凋亡。     

组蛋白去乙酰化酶2基因在苯并（a）芘致神经细胞凋亡中的量效和时效表达

为研究体外培养细胞途径研究组蛋白去乙酰化酶2基因在苯并（a）芘[B（a）P]所致神经细胞凋亡中的量效和时效表达,研究人员将大鼠原代培养的神经元细胞分为两批：第一批分4个组,以B（a）P同时加入S9对细胞染毒,分别为二甲基亚砜（DMSO）组、低、中、高剂量组,     

Tenovin-6对AML1/ETO(+)急性髓系白血病细胞的增殖抑制和促凋亡作用

目的观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)Tenovin-6对人AML1/ETO(+)急性髓系白血病(AML)细胞的增殖、细胞凋亡及周期的影响。方法用CCK-8法及克隆形成试验检测Tenovin-6对AML1/ETO(+)AML细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测不同浓度Tenovin-6作用于细胞后细胞凋亡、细胞周期的变化;并与AML1/ETO(-)AML细胞系进行比较。结果 Tenovin-6对AML1/ETO(+)AML细胞有增殖抑制作用,其抑制作用呈现为时间和浓度依赖性,并使细胞克隆形成能力下降;Tenovin-6可以促进AML1/ETO(+)AML细胞凋亡,并诱导细胞周期阻滞于G1期,表现为G1期细胞比例升高,而G2/M及S期细胞比例下降,且与AML1/ETO(-)AML细胞系相比较具有更高的敏感性。结论 Tenovin-6能抑制AML1/ETO(+)AML细胞增殖,诱导细胞凋亡,使周期阻滞于G1期,并较AML1/ETO(-)AML细胞系具有更高的敏感性。     

乳腺癌中蛋白高乙酰化/琥珀酰化水平及其同组蛋白2AX高表达的相关性

目的 明确乳腺癌中蛋白乙酰化/琥珀酰化修饰和组蛋白2AX(H2AX)表达水平,并确认两者之间是否具有相关性.方法 Western blotting及RT-PCR方法检测11例乳腺癌组织和细胞中蛋白修饰和H2AX表达水平,并利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂初步明确乙酰化和琥珀酰化可能存在的共同调控方式;载体构建及过表达方法明确...     

脑卒中后并发血管性认知功能障碍与血清PTEN、HDAC3水平的关系及危险因素

目的 分析第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)、组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)表达水平与脑卒中后并发血管性认知功能障碍(VCI)的关系。方法 选取2019年6月—2021年4月石家庄市人民医院神经内一科诊治脑卒中患者126例为研究对象,根据患者发病3个月后是否发生VCI分为VCI组52例和非VCI组74例。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清PTEN mRNA,酶联免疫吸附法检测血清HDAC3表达水平;采用Pearson等级相关分析血清PTEN mRNA、HDAC3表达水平与美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分的相关性;多因素Logistic回归分析脑卒中后发生VCI的影响因素。结果 VCI组血清PTEN mRNA、HDAC3水平高于非VCI组(t/P=17.156/<0.001、17.904/<0.001);血清PTEN mRNA、HDAC3表达水平比较,VCI组重度认知功能障碍>中度认知功能障碍>轻度认知功能障碍(F/P=8.928/<0.001、64.433/<...     

冬凌草甲素调控miR-200c/EZH2轴抑制黑色素瘤细胞上皮-间质转化的机制研究

目的 探究冬凌草甲素调控微小RNA200c(miR-200c)/组蛋白甲基化转移酶果蝇zeste基因增强子同源物2(EZH2)轴抑制黑色素瘤细胞(A375细胞)上皮-间质转化(EMT)的影响机制。方法 MTT法检测冬凌草甲素对A375细胞活力的影响;将A375细胞分为对照组、冬凌草甲素组、mimic control组、miR-200c mimics组、冬凌草甲素+inhibitor control组、冬凌草甲素+miR-200c inhibitor组,qRT-PCR检测miR-200c、EZH2 mRNA表达情况;免疫印迹法检测EZH2及EMT相关蛋白表达情况;黏附实验检测A375细胞黏附能力;Transwell实验检测A375细胞侵袭及迁移能力;荧光素酶报告基因实验检测miR-200c与EZH2的靶向关系;构建移植瘤裸鼠模型,检测肿瘤质量;免疫组化法分析EMT相关蛋白表达情况。结果 A375细胞存活率随冬凌草甲素浓度的增加以剂量依赖性显著降低(P<0.05),由于40μmol/L冬凌草甲素接近半数抑制浓度,因此选取40μmol/L冬凌草甲素进行后续实验;与对照组相比,冬凌草甲素...