生物陶瓷微颗粒引发的细胞和组织损害

为论证生物陶瓷烧结不完全形成的微颗粒（〈5μm）引发细胞和组织损害的假设，对该类颗粒在体内和体外的细胞和组织损害进行了研究：（1）对4种双相生物陶瓷（BCP）进行细胞毒性试验。试验发现所有的浸出液出现细胞毒性，但是浸出液经离心后，毒性消失；（2）对羟基磷灰石（HA）、p磷酸三钙（pTCP）和40％pTCP／60％HA混合物微颗粒进行细胞抑制实验。结果显示随着微颗粒的浓度增加，成纤维细胞活力下降；而当微颗粒浓度达到一万个／细胞时，细胞活力和增殖能力完全消失；（3）HA，pTCP和BCP陶瓷颗粒（500-1500um）被植入到兔子股骨远端，种植12周后β-TCP的降解率为40％，BCP为5％，但是HA接近不降解。新骨形成在β-TCP（21％）和HA（18％）比BCP（12％）更为明显。同时BCP颗粒的周围有很多的微颗粒形成，可见吞噬细胞吞噬微颗粒，形成吞噬体。以上结果提示，微颗粒可能是局部炎症和细胞损害的首要原因，而且有可能影响骨形成。因此，我们必须注意生物陶瓷烧结的重要性，它们的烧结不良就可形成微颗粒，引发细胞和组织的损害。特别是BCP陶瓷含有两种需要不同烧结温度的粉体，它的烧结难度较高，很易形成微颗粒。     

具有三层管壁结构组织工程血管支架的生物力学性能

目的针对组织工程血管的体内培养技术路线，对所制备的具有三层管壁结构的组织工程血管支架的生物力学性能进行测试，并研究了壁厚对支架力学性能的影响，以保证后续的动物体内移植实验能顺利进行。方法采用涂敷，喷涂．滤沥的方法制备了具有三层管壁结构（多孔PLGA层．致密PU层．多孔PLGA层）的可降解组织工程血管支架，用自制的设备测试了其爆破强度和径向顺应性，并对血管支架进行了缝合强度的测试。结果所制备的厚度为0．295mm-0．432mm的三层结构血管支架的径向顺应性为3．80％／100mmHg-0．57％／100mmHg，爆破强度为160kPa～183kPa，缝合强度为0．63N／针～1．52N／针。结论支架的管壁厚度，尤其是中间层厚度，对支架的力学性能有重要影响。增大壁厚可导致径向顺应性急剧下降，爆破强度和缝合强度线性提高。在所制备的样品中，管壁厚度为0．295mm的支架其综合力学性能最优，可满足血管组织工程体内植入的力学性能要求。     

组织工程血管基质的制备与改性

目的：完全脱除猪胸主动脉细胞，对脱细胞血管基质进行改性，增强基质的力学强度，制备组织工程血管支架材料。方法：取家猪的新鲜去除外膜胸主动脉20根，随机分成4组，分别采用胰蛋白酶、TritonX-100及十二烷基硫酸钠（SDS）作为脱细胞试剂对猪胸主动脉进行脱细胞处理，并对脱细胞后的血管基质进行改性，采用HE染色、弹力纤维染色、力学性能测试，以评价脱细胞效果以及材料的力学性能。结果：采用1％TritonX-100单独作用84h既能完全脱除细胞，同时又可完整保留血管基质的三维结构，对胶原纤维、弹力纤维的损伤小，是一种较理想的脱细胞方法。对脱细胞后的基质进行冷冻干燥及真空热交联处理，能有效提高材料的机械强度，冷冻干燥24h后真空120℃下热交联处理12h所获得的材料的机械强度最好，断裂强度可达到1．70MPa。结论：以脱细胞血管基质经冷冻干燥和真空热交联处理后，可以作为血管组织工程的支架材料。     

离心作用测定细胞与材料间的粘附力及其初步应用

目的：介绍一种简单易行的检测细胞与材料间黏附力的方法。方法：本方法的建立基于离心力在转速一定时与半径成正比的原理。医用石膏制备培养皿固定装置，于培养皿底制备材料薄膜（包括有PLGA，PLGA COLI，PLGA COL I FN），待大鼠骨骼肌卫星细胞悬液与其作用一定时间后，一定转速开动离心机。测定未脱落细胞斑的半径R,取均值。结果：上述三种材料表面未脱落大鼠骨骼肌卫星细胞圆斑半径（R）分别为7.96、15.11、26.10mm，三组间有显著性差异。结论：（1）R的变化可反映细胞与材料间粘附力的改变。（2）利用离心作用检测细胞与材料间的粘附力是可行的，尤其适用于同一种细胞与不同材料间粘附力的比较。（3）COL I和FN的使用可以增加大鼠骨骼肌卫星细胞与PLGA间的粘附。     

内皮祖细胞在血管组织工程的应用

内皮祖细胞是一群具有游走特性,能进一步增殖分化成为成熟内皮细胞的幼稚内皮细胞.内皮祖细胞参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复.内皮祖细胞的发现为血管组织工程种子细胞增添了一个新来源.本文重点介绍成体内皮祖细胞的来源、鉴定、生物学特性、功能以及在血管组织工程中的应用.     

气管组织工程的研究策略及其展望

气管组织工程是近10年来国内外研究的热点和难点问题,取得了一些进展.但如何更好地遴选基质材料、实现种子细胞共培养、上皮化以及再血管化来构建组织工程化气管仍需要不断寻求新的研究思路和策略.本文从气管重建和理想化气管替代物的角度,回顾了近年来在组织工程气管方面的研究进展,并对未来的研究作出展望.     

胰腺癌中异常表现的microRNA有助于新诊断方法的研发

据美国BIOCOMPARE科技新闻网（2007／1／16）报道，胰腺癌是四大致死性癌症之一，在早期很难被检测出来，也缺乏很好的治疗方法。俄亥俄州立大学癌症中心的研究人员在比较了人类胰腺癌组织、癌组织附近的正常组织，以及对照组中的microRNA（miRNA）的表现程度后，发现大约有100种miRNA在癌组织中的表现异常，这些miRNA也许可以成为检测胰腺癌或治疗胰腺癌的目标。     

微波二次固定提高肿瘤组织冰冻切片及苏木素—伊红染色质量的研究

冰冻切片质量的好坏直接关系到能否准确及时地作出病理诊断,以指导手术治疗方式,近年来,国内外学者对如何提高冻冻切片及染色质量做了大量工作,但仍然存在着组织结构被冰晶破坏,对比染色差,细胞核着色不清晰等缺点,我们应用微波加热固定液对组织块进行预固定,切片后再次固定的“二次固定技术”处理肿瘤组织,获得了比单纯脱脂固定切片更好的效果.1 材料与方法1.1 材料 选用我院1994～1995年外科送检需要急诊冰冻的乳腺、胃、肠、卵巢、甲状腺及脑等处的肿瘤组织,取材2cm×1.5cm×0.5cm数块.YWY781A型医用微波炉为浙江临安爱迪电子仪器厂产品,有8个功率选择开关,最大输出功率为500W.1.2 方法(1)将肿瘤组织分为不处理和处理组,处理组分别用生理盐水,10%甲醛和Bouin液在80℃恒温水浴固定5min,用微波2档(输出功率250W)固定1min.(2)将上述肿瘤组织用恒冷切片机切成5μm厚的冰冻切片数张,贴片稍于后分成不固定组和固定组,固定组分别用酒精-冰醋酸-甲醛固定液(AAF).改良的     

生物组织微阵列芯片自动制备仪的研制

介绍了一种新型生物组织微阵列芯片自动制备仪的研制。分析了组织微阵列制备过程中的操作任务和实现目标,进行了制备仪的结构设计和各功能模块研究开发。制备仪从结构上分为蜡块承载定位模块和三工位操作模块,控制系统的组成有操作空间精密定位子系统,组织蜡块图像识别子系统,蜡块打孔填埋作业子系统等。研制成功的制备仪样机具备了图像自动识别、精密定位、自动打孔填埋等功能,实现了生物组织微阵列芯片的自动化制备。     

利用激光共聚焦显微镜研究MP多肽抑制粒细胞呼吸爆发造成的脂质过氧化作用

目的：研究MP多肽抑制呼吸爆发的作用机制。方法：培养人白细胞系THP1细胞，对照组细胞培养体系中仅给予内毒素(LPS，100ng／ml)刺激，治疗组在同样浓度的LPS刺激同时加入MP多肽(20μM)，采用乙酰乙酸盐2，7二氯氢化荧光素(D399)和碘化丙啶(PI)双标记，用D399及PI对两组细胞进行染色。激光共聚焦显微镜检测两组细胞D399在细胞内的脂质过氧化产物2，7二氯荧光素及PI的荧光强度。