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51.
目的:克隆sFGFRl(soluble fibroblast growth factors receptor-1)基因,并在RTS(rapid translation system)系统中高效表达相应蛋白.方法:培养Swiss rat 3T3 fibroblast细胞株,提取总RNA,用RT—PCR方法获取鼠sFGFR1 cDNA片段,酶切后克隆到pIVEX2.3d载体并进行序列分析;采用Roche RTS ProteinMaster500系统,高效表达sFGFR1蛋白并用Western Blot鉴定表达的蛋白.结果:克隆了sFGFR1基因,测序证实序列正确;Western Blot证实sFGFR1蛋白在RTS系统中高效表达.结论:克隆了sFGFR1基因并在RTS系统获得高效表达. 相似文献
52.
细胞周期蛋白E在瘢痕疙瘩不同区域中的表达及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨细胞周期蛋白E在瘢痕疙瘩形成过程中的作用及意义。方法应用免疫组织化学链霉亲和素-过氧化物酶(SP)法检测瘢痕疙瘩不同区域和正常皮肤组织成纤维细胞(fibro-blast,FB)中细胞周期蛋白E的表达。结果在瘢痕疙瘩周边部FB中存在细胞周期蛋白E的高表达;而在瘢痕疙瘩中央部阳性表达的FB数量少,8例标本FB中细胞周期蛋白E表达阴性。正常皮肤FB中细胞周期蛋白E表达阴性。经统计学处理,周边部与正常皮肤组及中央部比较,差异有统计学意义(P〈0.01及P〈0.05);中央部与正常皮肤(NS)组比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论细胞周期蛋白E在瘢痕疙瘩周边部FB中的高表达,不仅可能促进了瘢痕疙瘩的形成,并可能是瘢痕疙瘩侵犯周围正常组织,呈浸润性生长的原因之一。 相似文献
53.
目的:探讨慢性阻塞性肺部疾病(COPD)大鼠和正常大鼠支气管成纤维细胞体外培养下结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白活性、转录水平以及胶原合成水平。方法:以正常大鼠(对照组)和COPD模型大鼠(实验组)为细胞来源,组织块法进行成支气管成纤维细胞原代培养,应用第5代细胞为研究对象。比色法进行培养液羟脯氨酸含量检测,免疫组织化学染色技术、RT-PCR、免疫印迹方法进行CTGF定位检测、蛋白活性及转录水平观察。结果:实验组羟脯氨酸含量显著高于对照组。对照组大鼠支气管成纤维细胞有一定水平的CTGF表达,实验组成纤维细胞CTGF阳性表达增强,免疫印记及RT-PCR结果显示CTGF蛋白活性增强、转录水平升高。结论:CTGF在成纤维细胞中的高表达是大鼠COPD发生发展的重要环节。 相似文献
54.
注射自体成纤维细胞除皱的临床应用 总被引:3,自引:1,他引:2
目的观察体外培养的自体成纤维细胞注射的面部除皱临床效果,探讨其在面部年轻化治疗中的意义。方法取10例睑袋及上睑松弛手术切除的皮肤行体外培养,细胞数量扩增至108后注射入面部不同治疗部位皮肤的真皮深层,共注射3次,每次间隔2周。结果10例随访6~12月,各例皱纹均得到明显改善,未出现免疫排斥、肉芽肿等并发症。结论应用培养的自体成纤维细胞注射去除面部浅表皱纹,治疗过程简便、创伤微小、安全、效果确实,是一种较好地填充除皱方法。由于尚缺乏更长期的随访结果,远期疗效还有待进一步观察。 相似文献
55.
目的 观察免疫抑制剂环孢素A(CsA)对大鼠肾脏成纤维细胞增殖及细胞因子表达的影响以及氟伐他汀的干预作用,探讨氟伐他汀对CsA肾毒性的保护作用。 方法 体外培养大鼠肾脏成纤维细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定CsA及氟伐他汀对细胞增殖的影响。RT-PCR方法检测转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)及c-fos mRNA水平。Western印迹检测纤连蛋白(FN)的表达。 结果 CsA可明显抑制成纤维细胞增殖,且呈剂量和时间依赖效应(P < 0.05)。氟伐他汀与CsA合用后,对细胞增殖有明显的抑制作用(P < 0.01)。CsA刺激成纤维细胞TGF-β1、CTGF、c-fos及FN的产生(P < 0.05),氟伐他汀可下调这些改变(P < 0.05)。 结论 氟伐他汀可减轻CsA所致的大鼠肾脏成纤维细胞毒性 相似文献
56.
本文综述成纤维细胞生长因子23的结构、功能特点,阐述它与慢性肾脏疾病、特别是规律维持性血液透析的终末期肾病患者预后的相关性. 相似文献
57.
人碱性成纤维细胞生长因子基因在大肠杆菌中的克隆与表达 总被引:1,自引:0,他引:1
应用DNA重组技术将编码人碱性成纤维细胞生长因子(bbFGF)的基因克隆至原核高效表达质粒pBV_(221)的启动子下游。SDS-SAGE、ELISA和NTT活性监测结果表明:该重组质粒pBV-hbFGF在大肠杆菌DH5α中,经42℃诱导后,可表达出有较高生物活性的hbFGF。 相似文献
58.
肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是多种慢性肾脏病发展到终末期肾衰竭的共同途径,它以过量细胞外基质在肾间质积聚及肾间质成纤维细胞增生为特征[1].RIF进程中多种细胞、细胞因子和生长因子共同参与,相互作用,导致细胞外基质合成增多、降解减少和沉积过度,最终导致肾间质纤维化. 相似文献
59.
目的 探索辐射诱发细胞恶性转化相关基因。方法本实验利用3’端引物HT11M(G,C,A)与5‘端引物HAP17 ̄24所配的24对引物同时对SHTF细胞和经^238Pu α粒子照射后能在软琼脂上形成克隆的此细胞的mRNA进行反转录PCR扩增,6%测序胶电泳,放身自显影。结果发现有23条基因片段在αSHIF细胞中表达,SHTF细胞中不表达。回收差异的基因片段,随机取其中12条重新扩增后得到6条扩增片段 相似文献
60.
慢性低氧性肺动脉高压大鼠血清碱性成纤维细胞生长因子含量的变化 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在慢性低氧性肺动脉高压肺血管重建中的作用及机理,采用慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型,用酶联免疫吸附法测定其血清bFGF含量,并用原位杂交法观察肺、心、脑、肾等器官bFGFmRNA表达的变化。结果显示:低氧组血清bFGF含量(35.9±23.5pg.ml-1)明显高于对照组(6.30±0.97pg.ml-1,P<0.005);低氧组肺小动脉bFGFmRNA表达明显增强,而心、脑、肾bFGFmRNA表达无变化。提示bFGF参与了慢性低氧性肺动脉高压肺小动脉重建的调控。 相似文献