生物酶解技术在中药提取中的应用

生物酶解技术是基于酶解作用能选择性地破坏植物细胞壁,从而使植物细胞内的成分更容易溶解、扩散的原理而应用于中药有效成分提取的新技术,具有成分浸出率高、减少热敏成分降解、成本低廉、无需特殊设备就能完成等优势,且有大规模工业化生产的潜力.该技术已经广泛用于多糖,生物碱、黄酮、皂苷、蛋白质,有机酸等中药有效成分的提取中,与传统提取技术相比具有明显的优势.综述了近年来生物酶解技术在多糖,生物碱.黄酮类,皂苷类,有机酸类、蛋白质及肽类等中药成分提取中的应用.     

半纤维素酶高产菌种的选育及产酶条件

以黑曲霉WA301为出发株,经过紫外诱变获得一株遗传性状稳定的半纤维素酶的高产突变株WA9024.通过对培养基中碳源、氮源、水分和起始pH值的优化,突变株WA9204以麸皮为基质的固态发酵产半纤维素酶的能力进一步得到提高.在较适的条件下,WA9024的甘露聚糖酶酶活达到8984U/g,木聚糖酶酶活达到503U/g,分别比出发菌株提高了1160%和210%.     

桑黄菌发酵过程中酶活性的变化

目的 研究桑黄菌发酵过程中酶活性的变化及其和胞外多糖量的关系。方法 在发酵过程中测定原始菌株和变异菌株的羧甲基纤维素酶、滤纸酶、木质素过氧化物酶（LiP）、锰过氧化物酶（MnP）、漆酶（Lac）活性变化及培养基中胞外多糖量变化。结果 2菌株的羧甲基纤维素酶和滤纸酶的活性变化呈单峰曲线,分别在第4天和第6天达到峰值;原始菌株和变异菌株的LiP、锰过氧化物酶和漆酶活性的变化呈双峰曲线,且原始菌株和变异菌株LiP的酶促反应米氏常数（K_m）分别为25.96、27.07 μg/mL;MnP的K_m分别为13.28、13.49 mmol/mL;Lac的K_m分别为0.12、0.21 mmol/mL;培养基中多糖量前期快速下降,10 d后趋于稳定。结论 桑黄菌发酵时能产生较全面的分解木质素和纤维素的酶系统,原始菌株和变异菌株产生的LiP和MnP为同种酶,Lac为同功酶。桑黄菌胞外酶活性变化和培养基中胞外多糖量变化有一定关系。     

响应面法优化纤维素酶提取丹参多糖工艺

摘 要 目的： 采用响应面分析法优选丹参多糖的纤维素酶提取工艺。方法: 在单因素试验基础上,利用Design Expert 8.0.5软件釆用三因素三水平响应面分析法,以加酶量、酶解温度、酶解时间为考察因素,多糖提取率为响应值,进行回归分析,优选丹参多糖提取工艺条件。 结果: 最佳提取工艺为：加酶量0.5%,酶解温度65℃,提取时间120 min,模型相关系数R^{2＝0.979 5,拟合度较好。在该条件下,丹参多糖的提取率2.59 mg·g-1,与理论提取率(2.51 mg·g-1) 接近。 结论:该提取工艺客观可行、稳定合理,可为工业化生产提供理论依据。}     

还原糖测定方法的规范

探讨了３,５－二硝基水扬酸（ＤＮＳ）添加量、显色时间、氧的溶解量、离子强度以及ＤＮＳ显色后存放时间对纤维素酶酶活力测定的影响．氧的溶解量对测定结果影响显著;测定波长的变化对检测样品光吸收值的灵敏度和线性范围影响很大,一般选定５４０ ｎｍ 为进行纤维素酶酶活力测定的波长．另外,当以葡萄糖为标准来测定还原糖时,不同的测定方法会使得纤维二糖的测定值不同．因此,在测定纤维素酶酶解产物时,用ＤＮＳ方法来测定还原糖,使测定结果更加准确．     

pNPG法测定纤维素酶系中β—葡萄糖苷酶

以对硝基酚-β-葡萄糖苷(pNPG)为底物测定纤维素酶活力,目前,没有一个统一的标准,很难比较文献中的酶活力大小.本文通过试验,以期探讨一个共同的标准.     

银杏黄酮的酶法提取工艺研究

本文研究了银杏黄酮的酶法提取工艺，银杏叶原料经纤维素酶预处理后浸提，总黄酮得率显著提高，得率可达到2．01％，其酶解过程的最优参数为：料液中酶浓度为0．125g/L，酶与底物配比为1：1200，酶解温度45℃，自然pH值，酶解时间2h。     

内生青霉菌纤维素酶在银杏总黄酮提取中的应用研究

目的:利用筛选的高产纤维素酶内生青霉菌的发酵液辅助提取银杏黄酮。方法:采用单因素分析和正交试验,以银杏总黄酮提取率为指标,对酶辅助提取中影响总黄酮提取效果的主要因素(如酶解时间,温度,pH,酶料比等)进行研究。结果:通过单因素试验和正交试验,得出纤维素酶发酵液酶解银杏叶的最佳条件为:发酵液以酶料比15∶1加入银杏干粉中,在pH5.0、温度50℃下,酶解处理3 h,该条件下的银杏黄酮提取率达到了1.33%,比常规醇提法提高了18.75%,与纯酶辅助提取率相近。结论:内生青霉菌发酵液辅助法是提取银杏总黄酮的有效方法。     

纤维素酶转化淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的研究

目的研究宝藿苷I的制备工艺。方法采用纤维素酶水解淫羊藿苷制备宝藿苷I,以转化率为指标,通过单因素考察pH值、温度、底物的浓度、酶用量、反应时间及金属离子对转化率的影响L9(34),正交试验优化制备工艺;采用MS,1H-NMR、13C-NMR鉴定水解产物。结果酶解反应的最适条件为温度50℃、反应介质pH 5.2醋酸-醋酸钠缓冲液,底物浓度为10 mg/mL,酶与底物质量比1∶1,反应时间48 h,钠离子、钙离子、镁离子、锌离子、对酶解反应无显著影响(P0.05),铁离子对酶解反应有抑制作用(P0.01);反应产物相对分子质量为514,核磁图谱证实产物为宝藿苷I。结论纤维素酶水解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,工艺简单可靠,反应条件温和,适合工业化生产。     

酶法提取平菇多糖工艺研究

目的 研究酶法提取平菇多糖的最佳工艺.方法 在单因素试验的基础上,采用正交试验分别研究木瓜蛋白酶和纤维素酶提取平菇多糖的最佳工艺条件.结果 木瓜蛋白酶提取平菇多糖的最佳工艺条件是:酶质量分数0.5％,酶解温度50℃,pH6,酶解反应1h;纤维素酶提取平菇多糖的最佳工艺条件是:酶质量分数0.5％,酶解温度55℃,pH7,酶解反应1h.结论 在此条件下,木瓜蛋白酶和纤维素酶提取平菇多糖的得率分别为18.67％和18.52％.