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81.
目的:通过建立开放式三明治酶联免疫分析方法(OE-ELISA),对雌二醇进行检测。方法:通过基因拼接构建质粒后在原核表达系统中制备小分子泛素相关修饰物蛋白-大肠杆菌麦芽糖结合蛋白-抗体轻链可变区(sumo-MBP-VL)和碱性磷酸酶-抗体重链可变区(ALP-VH)融合蛋白,并从产量和可溶性角度对两种蛋白的表达条件进行优化。将得到的两种蛋白纯化后分别作为包被抗体和酶标抗体,建立检测雌二醇的OE-ELISA方法。应用竞争ELISA和OE-ELISA测定不同浓度的雌二醇标准品,绘制标准曲线并计算两种方法的敏感性。结果:在质粒中加入sumo标签后,实现了sumo-MBP-VL融合蛋白的可溶性表达。在Rosetta 宿主菌中37℃诱导后得到大量的ALP-VH和sumo-MBP-VL融合蛋白。OE-ELISA测定雌二醇标准品的标准曲线为y=0.029 6x+1.302 9,r2=0.9961,敏感性为532 pg/mL,优于竞争ELISA 803 pg/mL的敏感性。结论:成功建立了检测雌二醇的OE-ELISA方法。 相似文献
82.
晏阳邓勇志 《南昌大学学报(医学版)》2022,62(2):42
目的 基于GEO数据库筛选心脏肥大的差异表达mRNA,构建其相关的长链非编码RNA(lncRNA)的竞争内源性RNA(ceRNA)调控网络。方法 检索GEO数据库中心脏肥大的相关芯片数据集GSE60291,通过R语言分析差异表达mRNA;采用GO功能和KEGG富集分析差异表达mRNA的功能与机制;在lncRNA相关疾病中检索与心脏肥大相关的lncRNA,通过Starbase数据库预测lncRNA的靶向miRNA,构建lncRNA-miRNA ceRNA网络,在miRNet预测相关miRNA的靶向mRNA并构建miRNA-mRNA ceRNA调控网络,在此基础上构建lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA调控网络。结果 获得心脏肥大的差异mRNA 104个、lncRNA 6个及其关联miRNA 37个和靶向mRNA 16 724个;差异mRNA与靶向mRNA中获得86个相同的差异表达mRNA;GO分析及KEGG富集分析显示差异基因主要通过ATP酶活性、肌肉组织发育、前突触、黏着斑、MAPK信号通路、细胞周期、细胞凋亡等生物过程参与心脏肥大的发病。结论 筛选获得心脏肥大的差异表达mRNA并成功构建其调控网络,将为心脏肥大的防治提供潜在的新靶点。 相似文献
83.
ELISA(双抗体夹心法)共系统检测抗-HBe与HBeAg结果分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨用双抗体夹心法检测HBeAgEIA商品试剂盒共系统检测抗-HBe与HBeAg的可行性及结果判定方法。方法用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒结合配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒中的中和试剂(HBeAg)等试剂组分共系统检测1000份随机血清(浆)标本抗-HBe与HBeAg,并分别以常规ELISA检测抗-HBe与HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测抗-HBe与HBeAg易于目测;它们的比色判定临界值同常规ELISA易于设定(或使用临界值血清,检测HBeAg时也使用抗-HBe阴性对照),与常规ELISA检测比色判定无显著性差异(配对计数资料比较的χ2检验:相关检验均为P<0.005,υ=1,a=0.05;抗-HBe优劣检验(ELISA共系统检测抗-HBe前两项COV与抗-HBe临界值血清)均为P>0.900,υ=1,a=0.05;HBeAg优劣检验依次为HBeAg临界值血清:(1)P>0.900,υ=1,a=0.05,抗-HBe阴性对照;(2)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,ELISA共系统检测HBeAgCOV;(3)0.100>P>0.050,υ=1,a=0.05,但χ21<χ22<χ23)。结论用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒与配套中和(竞争)抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒试剂组分重组共系统检测抗-HBe与HBeAg是可行的,两种试剂盒能够相互替代,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA试剂盒其中之一,实用价廉,值得推广。 相似文献
84.
随着社会主义市场经济的发展,医疗市场竞争日益激烈,医院财务管理是医院生存和发展的重要环节,是医院经济管理的重要组成部分。财务部门既是医院领导规划决策的参与者,也是理财职能的执行者。正因为医院财务管理的地位举足轻重,所以加强医院财务管理、规范医院财务行为便成了重中之重。在医疗竞争日益激烈的大环境中,医院的生存和发展单靠国家的投入难以持久,最终难逃被淘汰的命运。 相似文献
85.
86.
检测艾滋病患者外周血HIV-1 DNA水平的竞争性PCR方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
定量检测艾滋病患者体内荷毒水平对于评价治疗效果和研究发病机理至关重要 ,我们建立了一种检测 HIV- 1DNA水平的竞争性 PCR方法 ( QC- PCR)。选择 HIV- 1的高度保守区域 gag基因作为靶序列 ,以重组 PCR方法和基因克隆技术构建两种重组质粒 ,分别插入有 gag和 Δ gag片段 ,其中后者比前者内部缺失 50 bp,用作定量检测中的竞争模板。将梯度稀释的竞争模板加入到反应体系中与待测的野生型模板共同扩增 ,PCR产物经 8%聚丙烯凝胶电泳后进行密度扫描测定 ,结果表明该方法稳定可靠 ;8份艾滋病患者的 PBMC DNA标本经该方法的检测也得到较好的结果。我们认为 QC- PCR是一种较为理想的 HIV- 1DNA水平的定量方法 ,非常适合于临床标本的检测和治疗研究的应用。 相似文献
87.
癌症是一种严重危害人类健康的疾病。吸烟、过量饮酒、不良的饮食习惯、社会竞争激烈导致的心理负担加重及缺乏防癌的医学常识,是诱发癌症高发的主要原因。近年来,人类生存环境的污染,臭氧层的破坏,水源、食品的污染更促使癌症发病率逐年上升。人到中年,正当年富力强、发挥中流砥柱作用之际,英年早逝的悲剧却屡见不鲜。癌症病人的家庭心理护理十分重要。病人出院只表示病情得到缓解和控 相似文献
88.
89.
为培养能够适应现如今激烈竞争状况的高素质现代化的医学专业性人才,对于中国加入到 WTO 之后所需直面的教育发展要求,努力提升医学生专业英语水平的能力已经成为了对高等教育进行改革的一个重要目标[1]。教育部在2001年时曾明确提出需在高等院校推动英语教学,由此而受到各高等院校重视[2]。伴随教育体制改革的不断深入,如今医学院校之间的竞争十分激烈,若想要使医学院校继续发展壮大,则应突出办学特色,而加强双语教学则较好地顺应了发展要求。鉴于此,本文通过对本校《内科学》进行双语教学,在实践和探索中总结经验,得到了一些结论,现报道如下。 相似文献
90.
八年前,经历了可怕的高考,带着期望与憧憬,我选择了检验医学这个专业;三年前,经历了激烈的求职竞争,带着无奈和迷茫,我进了医院检验科,做起了一名普通的检验科医生。八年前,正直少年,我踌躇满志,意气风发;八年后, 相似文献