抗SARS-CoV抗原的人源Fab段噬菌体抗体库的构建

目的 :利用抗SARS冠状病毒IgG抗体阳性的SARS康复患者外周血淋巴细胞 ,构建人源Fab段抗体文库。方法 :制备外周血淋巴细胞总RNA ,逆转录成cDNA。以其为模板 ,利用针对家族特异性Ig基因的引物扩增重链Fd段和轻链基因 ,并重组到噬菌粒载体pComb3中 ,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL 1Blue,酶切鉴定抗体库的重组率 ,并测定噬菌体抗体库的库容量。结果 :构建了源于SARS康复患者血清中抗Fab段的抗体文库 ,轻链、重链Fd段基因的重组率分别为91%和 75 % ,库容量为 7.2 3× 10 7。结论 :成功地构建了抗SARS CoV抗原的人源Fab段噬菌体抗体库     

从“虚损生积”论治真性红细胞增多症

真性红细胞增多症是以红细胞系统异常增殖为主的一种慢性骨髓增殖性疾病,临床多表现为面色潮红如醉酒貌、皮肤黏膜红紫、眼结膜充血、皮肤瘙痒,还具有血栓反复形成、出血倾向,严重者可导致心肌梗死、中风、骨髓纤维化、白血病等。中医认为该病属于积聚”“血积”范畴。尚晓玲教授归纳了临床治疗真性红细胞增多症的经验,从“虚损生积”角度提出了自己的见解,总结出了三个重要中医病机,即为:精亏气虚,虚损生积;因积生痹,血瘀痰阻;痹阻毒蕴,瘀毒互结,尤其重视虚损生积这一环节,确立了补虚消积,解毒化瘀的治法,遣方用药方面多在归肾丸、二至丸基础上加减化裁,随症加减,达到良好临床效果,为中医药治疗真性红细胞症临床诊疗提供了思路。     

积件思想在化学多媒体教学中的应用

计算机辅助教学的发展正在从课件思想向积件思想转变,笔者尝试运用积件思想,以PowerPoint97（中文版）为积件组合平台,进行化学课中《旋光异构》课程的讲解,取得了一定的效果。     

亲环素A抗原表位氨基酸序列及三维结构研究

目的：研究人抗亲环素A（CyPA)McAb D4识别的抗原表位的氨基酸组成及其在蛋白分子上的三维定位。方法：以抗人亲环素A McAb D4作捕获抗体,对噬菌体展示肽库进行淘筛,并对筛选出的噬菌体中插入片段进行DNA序列测定和氨基到序列分析,再用RasMol蛋白质三维结构分析软件在亲环素A分子的三维结构中查找相应的抗原表位。结果：经过三轮淘筛和扩增,选择7个克隆进行序列,提示该抗原表位是构象性的。用RasMol蛋白质三维结构分析软件在亲环素A分子的三维结构中,找到由W121、S99、L98、Q111、S110、F112、L122构成的疏水代状结构,可能就是McAb D4的抗原表位。结论：人亲环素A分子上W121、S99、L98、Q111、S110、F112、L122构成一个构象型抗原表位。     

椎旁肌功能横截面积预测骨质疏松性椎体压缩骨折

背景:骨质疏松性椎体压缩骨折是继发于骨质疏松症的常见骨折,目前尚缺乏有效的骨质疏松性椎体压缩骨折预测指标及方法。目的:探讨椎旁肌退变、功能横截面积及脂肪浸润百分比对骨质疏松性椎体压缩骨折的预测作用。方法:纳入2018年1月至2022年6月确诊的骨质疏松患者224例,随访时间2年以上,根据是否发生椎体骨折分为骨折组和非骨折组,收集患者人口学资料、体质量指数、椎体骨密度等详细信息,测量并计算L2椎体下终板层面双侧腰大肌及背伸肌(竖脊肌和多裂肌)功能横截面积和脂肪浸润百分比。结果与结论:①224例患者中有126例发生骨折为骨折组,98例未发生骨折为非骨折组,两组年龄、性别、身高、体质量、体质量指数、骨折节段比较差异均无显著性意义(P>0.05);②骨折组骨密度显著低于非骨折组(P<0.05),骨折组腰大肌、背伸肌功能横截面积显著低于非骨折组(P<0.05),骨折组背伸肌脂肪浸润百分比显著高于非骨折组(P<0.05),两组腰大肌脂肪浸润百分比差异无显著性意义(P>0.05);③受试者操作特征曲线分析显示椎体骨密度、背伸肌脂肪浸润百分比、背伸肌功能横截面积和腰大肌脂肪浸润百分比的截断值分别为0.903 g/cm2,35.426%,418.875 mm2,6.375%;曲线下面积分别为0.634,0.755,0.876,0.585;④结果表明:椎旁肌退变与骨质疏松性椎体压缩骨折的发生密切相关,背伸肌功能横截面积可以有效预测骨质疏松性椎体压缩骨折的发生,有助于早期防治骨质疏松性椎体压缩骨折。     

抗肝癌单链抗体基因库的制备

目的构建抗肝癌噬菌体单链抗体(Single-chainvariblefragments,ScFv)库并加以鉴定。方法从经肝癌细胞免疫小鼠脾淋巴细胞中提取mRNA,RT-PCR扩增轻、重链可变区基因片段,连接成ScFv基因并扩增,克隆到pCANTAB5E,导入大肠杆菌TG1培养并计数。PCR检测ScFv基因插入情况并对ScFv进行基因序列分析和ELASA检测。结果抗体库库容为2.14×106;90%的噬菌体基因中有ScFv基因的插入;核酸序列分析显示抗体库基因结构正确;ELASA检测证实ScFv的表达。结论所建抗肝癌噬菌体ScFv库库容大,质量良好,对肝癌的基础研究和临床有潜在的应用价值。     

八珍益母胶囊辅助治疗子宫腺肌病临床研究

目的：观察八珍益母胶囊辅助治疗子宫腺肌病的临床疗效。方法：选择80例气滞血瘀型子宫腺肌病患者,按随机数字表法分为对照组与观察组各40例。对照组采用孕三烯酮、双氯芬酸钠治疗,观察组在对照组的基础上联合八珍益母胶囊辅助治疗。比较2组治疗前后子宫体积、痛经评分、中医证候积分、疼痛指标[血清前列腺素E₂(PGE₂)、5-羟色胺(5-HT)]水平及临床疗效。结果：观察组总有效率为90.00%,显著高于对照组72.50%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组小腹胀痛、块下痛减、经行不畅、烦躁易怒、胸闷不舒、乳房胀痛、经血色紫有块、经血量少等证候评分及总分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组上述各项证候评分及总分均较治疗前显著降低(P<0.05),且观察组各项评分及总分均低于对照组(P<0.05)。治疗前,2组子宫体积、痛经评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组子宫体积、痛经评分均较治疗前显著降低(P<0.05),且观察组上述2项指标均低于对照组(P<0.05...     

荧光内窥式共聚焦显微镜下青藤碱固体脂质纳米粒注射治疗类风湿性关节炎的研究北大核心CSCD

应用荧光内窥式共聚焦显微镜(fluorescence endoscopic laser confocal microscope,FELCM)引导关节注射青藤碱固体脂质纳米粒(sinomenine solid lipid nanoparticles,Sin-SLN),并考察体外药效评估Sin-SLN治疗类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的效果。采用乳化蒸发-低温固化法制备Sin-SLN,最佳处方工艺下制备的Sin-SLN包封率为64.79%±3.12%,载药量为3.84%±0.28%,测定平均粒径为(215.27±4.21)nm,Zeta电位为(-32.67±0.84)mV,初步稳定性考察中,Sin-SLN放置30 d后稳定性良好。皮下注射完全弗氏佐剂和卵白蛋白建立兔RA模型,药效实验设对照组、模型组、Sin组(1.5 mg·kg^(-1))、Sin-SLN组(1.5 mg·kg^(-1))和地塞米松组(阳性药,1.0 mg·kg^(-1),ig),对照组和模型组仅穿刺不注射药物,各实验组给予相应药物干预治疗。给药后,每日测量家兔膝关节直径及局部皮肤温度变化,与模型组相比,给药组膝关节直径和局部皮肤温度均下降;使用FELCM观测软骨形态学变化,Sin-SLN组膝关节软骨表面光滑,骨组织结构紧密;采用ELISA测定血清中白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平,发现Sin-SLN组血清中IL-1和TNF-α表达水平降低;与模型组相比具有显著性差异,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察滑膜组织形态学变化,Sin-SLN组滑膜组织病变状况得到明显改善。因此,制备的Sin-SLN粒径均匀,性质稳定,通过关节注射给药形成药物贮库,Sin-SLN可有效减轻兔关节肿胀、减轻关节软骨损害,抑制炎症因子表达,抑制关节滑膜上皮增生和炎性细胞浸润,证明Sin-SLN可以有效抑制RA。     

利用CT表现鉴别肾上腺隐匿型嗜铬细胞瘤和皮质腺瘤

目的探讨如何利用CT表现对肾上腺隐匿型嗜铬细胞瘤和肾上腺皮质腺瘤进行鉴别诊断。方法收集2010年1月至2020年1月期间中国医科大学附属第一医院收治的177例肾上腺肿瘤患者进行回顾性分析,对比各组患者之间的一般临床资料和CT表现。结果隐匿型嗜铬细胞瘤56例、皮质醇腺瘤32例、醛固酮腺瘤44例、无功能腺瘤45例,隐匿型嗜铬细胞瘤组在肿瘤侧别上与无功能腺瘤组差异有统计学意义,在肿瘤最大直径、平扫CT值、动脉期和延迟期增强CT值上均显著大于三组肾上腺腺瘤组。以肿瘤直径≥2.95 cm诊断隐匿型嗜铬细胞瘤,曲线下面积(AUC)为0.872,敏感度为87.5%,特异性为76.0%;当平扫CT值≥24.5 Hu时,AUC为0.929,敏感度为94.0%,特异性为82.5%;当动脉期增强CT值≥89.5 Hu时,AUC为0.886,敏感度为72.7%,特异性为90.6%;当延迟期增强CT值≥82.5 Hu时,AUC为0.937,敏感度为84.6%,特异性为95.3%;联合以上四个指标时,AUC为0.981,阈值为≥0.118,敏感度为100%,特异性为90.6%。结论以肿瘤直径2.95 cm、平扫CT值24.5 Hu、动脉期增强CT值89.5 Hu和延迟期增强CT值82.5 Hu为阈值对肾上腺隐匿型嗜铬细胞瘤有较好的鉴别诊断价值。     

健康素养在脑卒中患者积极度与自我管理行为间的中介效应

目的 探讨脑卒中患者健康素养、患者积极度和自我管理行为的现状,明确三个变量间关系,并探讨健康素养在患者积极度与自我管理行为间的中介效应。方法 采用一般资料问卷、慢性病健康素养调查量表、患者积极度量表、脑卒中自我管理行为调查问卷对河南省4所三级甲等医院就诊的223名脑卒中患者进行调查。结果 脑卒中患者健康素养得分为（82.30±15.28）分,自我管理行为得分为（40.89±9.74）分,患者积极度得分为（45.21±11.30）分。脑卒中患者健康素养、自我管理行为与患者积极度三个变量间呈正相关（r值分别为0.622、0.479、0.457,且均P<0.01）;且健康素养在患者积极度与自我管理行为间起显著部分中介效应,中介效应占总效应的53.79%。结论 脑卒中患者健康素养、患者积极度可预测其自我管理行为,且患者积极度既可直接影响自我管理行为,也可通过健康素养间接影响自我管理行为。