钙蛋白酶参与心力衰竭患者心肌重构的信号传导

目的 探讨钙敏感的信号物质钙蛋白酶(calpain)对心力衰竭(心衰)患心肌重构信号传导的调控。方法选择因二尖瓣狭窄伴关闭不全心脏病接受二尖瓣置换术的心衰患39例,正常对照38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献)。彩色多普勒超声心动图检测心功能参数,放免法检测心衰患血浆及心肌组织血管紧张素Ⅱ含量,免疫印迹法检测心肌组织calpain、钙调神经磷酸酶(CaN)的抑制蛋白(cain/cabin 1),cain／cabin 1降解产物(cain／cabin 1△)蛋白表达、CaN磷酸化。结果心衰患血浆及心肌组织血管紧张素Ⅱ浓度、心肌组织u-calpain、m-calpain、cain／cabin 1降解产物cain／cabin 1△蛋白表达及CaN磷酸化明显高于对照组,且随心功能恶化逐渐增加,cain／cabin 1蛋白表达随心功能恶化逐渐降低。结论心衰患通过calpain降解cain／cabin 1进而激活CaN信号通路,提示其在肾素一血管紧张素系统等介导的心肌重构中起一定作用。     

不同转移潜能人肝癌细胞系酪氨酸磷酸化蛋白质差异分析

目的研究不同转移潜能人肝癌细胞系中酪氨酸磷酸化蛋白质表达的差异并筛查与肝癌转移相关的酪氨酸磷酸化蛋白质分子。方法应用双电泳(2-D E)、免疫印迹法及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析,对三种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep 3B、MHCC97L和MHCC97H进行酪氨酸磷酸化蛋白质组分析。结果对照2-DE胶和免疫印迹发光胶片,Hep3B检测到10个点,MHCC 9 7L检测到19个点, MHCC97H检测到17个点。经质谱鉴定,得到膜连蛋白Ⅰ等19个差异点。结论细胞内酪氨酸磷酸化蛋白的表达差异与肝癌的侵袭转移有关。     

磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶B在小鼠过敏性气道反应肺组织炎性细胞中的差异表达

目的:探讨丝/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)在过敏性小鼠肺组织不同炎性细胞中的活化状况.方法:应用卵蛋白致敏激发BALB/c小鼠制备过敏性气道炎症反应模型,抽取肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数计数和不同炎性细胞分类计数,应用免疫组织化学检测磷酸化Akt(p-Akt)在过敏性小鼠肺组织中不同炎性细胞的表达.结果:过敏性小鼠BALF中总细胞数明显高于正常鼠;分类细胞计数中,正常组以巨噬细胞为主,而过敏性小鼠的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分比明显升高;免疫组织化学显示p-Akt在过敏性小鼠气道中嗜酸性粒细胞中表达明显高于淋巴细胞和巨噬细胞,而在淋巴细胞中表达明显高于巨噬细胞.结论:Akt在过敏性小鼠的气道炎症中的作用与炎性细胞的种类密切相关,发挥不同的诱导嗜酸性粒细胞和巨噬细胞增多、趋化、释放炎性细胞因子和对抗淋巴细胞凋亡等重要的作用.     

血清STIP-1、CA125a和CA125b诊断子宫腺肌病的临床价值

目的观察血清磷酸化应激诱导蛋白1(STIP-1)、CA125a和CA125b对子宫腺肌病的诊断价值。方法选择2018年1月至2019年12月在该院就诊、病理确诊为子宫腺肌病的患者93例为子宫腺肌病组。选择同期在该院健康体检者49例为健康对照组。观察两组研究对象血清STIP-1、CA125a、CA125b和CA125水平的变化及对子宫腺肌病的诊断效能;观察血清STIP-1、CA125a和CA125b水平与子宫腺肌病严重程度、痛经的关系,以及STIP-1、CA125a和CA125b之间的相关性。结果子宫腺肌病组患者血清STIP-1、CA125a、CA125b和CA125水平明显高于健康对照组(P<0.01)。血清STIP-1、CA125a和CA125b水平对子宫腺肌病的诊断效能明显优于CA125(P<0.05);STIP-1、CA125a、CA125b三者联合检测的灵敏度为94.6%,特异度为91.8%,受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.975,均明显高于STIP-1、CA125a和CA125b单项检测,而STIP-1、CA125a和CA125b3项单项检测的灵敏度、特异度、AUC差异均无统计学意义(P>0.05)。子宫腺肌病患者血清STIP-1、CA125a和CA125b水平随着病理分级升高而升高,有痛经的患者血清STIP-1、CA125a和CA125b水平高于无痛经的患者(P<0.05)。子宫腺肌病患者血清STIP-1水平与CA125a(r=0.761,P<0.01)和CA125b水平(r=0.814,P<0.01)呈正相关,而CA125a水平与CA125b水平呈正相关(r=0.786,P<0.01)。结论血清STIP-1、CA125a和CA125b参与了子宫腺肌病的病理生理过程,在诊断子宫腺肌病时具有较高的诊断效能,值得临床推广。     

慢性脑低灌注大鼠海马CA1区VEGF和磷酸化tau蛋白的表达及意义

目的 观察慢性脑低灌注大鼠海马CA1区血管内皮生长因子(VEGF)和磷酸化tau蛋白的表达及意义.方法 将SD大鼠随机分为正常对照组(对照组)、假手术组和模型组.采用永久性结扎双侧颈总动脉建立慢性脑低灌注模型(2VO);实验开始后1、2、3月,应用免疫组织化学染色法检测海马CA1区VEGF和磷酸化tau蛋白的表达.结果 与对照组和假手术组比较,模型组海马CA1区VEGF表达在1、2月时明显增高(P＜0.05),3月时各组间表达差异无显著性(P＞0.05).磷酸化tau蛋白表达在1月时各组间差异无显著性(P＞0.05);2和3月时,模型组表达较对照组和假手术组明显增高(P＜0.05).结论 慢性脑低灌注时VEGF表达增高可能是一种自身保护机制,磷酸化tau蛋白参与了慢性脑低灌注认知功能损伤过程.     

丹芍化纤胶囊对肝纤维化大鼠PDGFR-β和p-ERK1/2的影响

目的:通过观察丹芍化纤胶囊对肝纤维化大鼠PDGFR-β和p-ERK1/2的影响,探索其抗肝纤维化的可能机制.方法:♂SD大鼠55只,体质量180-220g,随机分为正常组、模型组、预防组.除正常组外,其余均采用四氯化碳、高脂饮食及乙醇复合因素复制肝纤维化模型,造模同时预防组每日一次予以0.8 g/kg丹芍化纤自来水悬液灌胃,模型组、正常组予以等体积自来水灌胃,持续8 wk.造模结束后肝组织HE染色病理检查,免疫组化检测肝组织PDGFR-β、蛋白印迹检测肝组织p-ERK1/2在各组表达,生化法检测各组血清透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP),计算白球比(A/G).结果:造模8 wk后经病理学证实模型大鼠形成典型的肝纤维化,模型成功.与正常组相比,模型组肝组织PDGFR-β、p-ERK1/2及血清HA、LN、PⅢP均有显著升高,ALB、A/G显著降低(PDGFR-β:184.6±8.5 vs 89.6±5.8,P<0.05;p-ERK1/2:360.0±14.5 vx 15.4±2.1,P<0.05;HA:517.5±91.5μg/L vs 254.4±33.1μg/L,P<0.05;LN:58.4±11.3μg/L vs 37.3±9.8μg/L,P<0.05:PⅢP:36.9±5.6μg/L vs 4.7±1.5μg/L,P<0.05;ALB:27.4±4.9 g/L vs 42.1±1.6 g/L,P<0.05;A/G:0.89±0.08 vs 1.38±0.09,P<0.05);与模型组相比,预防组肝组织PDGFR-β、p-ERK1/2及血清HA、LN、PⅢP均有显著降低,ALB、A/G显著升高(PDGFR-β:91.1±6.3 vs 184.6±8.5,P<0.05;p-ERK1/2:253.8±18.2 vs 360.0±14.5,P<0.05;HA:322.9±41.4μg/L vs 517.5±91.5μg/L,P<0.05;LN:46.0±9.4μg/L vs 58.4±11.3μg/L,P<0.05;PⅢP:14.5±2.4μg/L vs 36.9±5.6μg/L,P<0.05;ALB:37.2±2.8g/L vs 27.4±4.9g/L,P<0.05;A/G:1.18±0.13 vs 0.89±0.08,P<0.05).结论:PDGFR-β及p-ERK1/2在肝纤维化形成中起重要作用,丹芍化纤胶囊具有良好的预防肝纤维化形成的作用,其降低PDGFR-β及p-ERK1/2在肝组织的表达可能是其作用机制之一.     

血液病患者信号转导及转录激活子5和叉头状转录因子3的表达

目的观察恶性血液病患者外周血中单个核细胞磷酸化STAT5及Foxp3的表达水平及其相关性。方法采用蛋白磷酸化流式细胞术分别检测45例急性白血病患者(AL)、23例慢性白血病(CL)、29例骨髓增生异常综合征(MDS)、20例重型再生障碍性贫血(SAA)及38例对照组外周血单个核细胞磷酸化STAT5(P-STAT5)及Foxp3阳性细胞的百分率。结果PSTAT5表达AL组(2.29±0.79)%、CL组(2.45±0.88)%、MDS组(2.21±0.75)%都较对照组(0.54±0.15)%增高,差异具有统计学意义(P0.05),SAA组P-STAT5表达(0.43±0.17)%较对照组降低,差异无统计学意义(P0.05);Foxp3表达AL组(3.86±1.13)%、CL组(3.60±1.10)%、MDS组(4.01±1.19)%高于对照组(0.89±0.38)%,差异具有统计学意义(P0.05),SAA组Foxp3表达(0.57±0.21)%较对照组降低,差异具有统计学意义(P0.05)。AL、CL、MDS、SAA各组P-STAT5与Foxp3表达水平都呈正相关(P0.05)。结论 STAT5及Foxp3可能共同参与了AL、CL、MDS、SAA这几类恶性血液病的发生过程,同时测定可以提供有临床意义的实验依据。     

甲状腺乳头状癌中TROP2、 p-Akt及vimentin的表达及临床意义

目的:探讨TROP2、p-Akt及vimentin在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测76例甲状腺乳头状癌、36例甲状腺瘤组织、36例正常甲状腺组织中TROP2、p-Akt及vimentin的表达,并对性别、年龄、肿瘤大小、临床TNM分期及淋巴结转移等因素进行分析。结果 :76例甲状腺乳头状癌中TROP2、p-Akt及vimentin蛋白的阳性表达率分别为65.8%、68.4%、69.7%,与甲状腺瘤组织、正常甲状腺组织相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。TROP2、p-Akt及vimentin蛋白在淋巴结转移组的阳性表达率均高于淋巴结无转移组(P<0.05);TROP2、p-Akt及vimentin蛋白在Ⅲ+Ⅳ期中的阳性表达率均明显高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05)。经Spearman等级相关性分析表明,TROP2与p-Akt、vimentin的表达均呈正相关(r=0.313,P=0.038;r=0.402,P=0.031);p-Akt与vimentin的表达也呈正相关(r=0.464,P=0.026)。结论:TROP2的表达与甲状腺乳头状癌的恶性侵袭及转移有关,可作为靶向治疗甲状腺乳头状癌的潜在基因。     

结直肠癌组织中Thr187磷酸化p27kip1的表达及临床意义

目的 探讨第187位苏氨酸（Thr187）磷酸化的细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白（p27kip1,简称p27）（P-p27Thr187）在结直肠癌发生、发展中的作用及其与结直肠癌临床病理特征的关系。方法 收集行手术切除的80例结直肠癌组织标本,以及6对新鲜结直肠癌和相应癌旁正常组织标本;采用免疫组织化学EnVision二步法和蛋白质印迹法检测结直肠癌组织及相应癌旁正常组织中P-p27Thr187和p27的表达;并分析其与结直肠癌临床病理特征的关系。结果免疫组织化学和蛋白质印迹结果均显示,P-p27Thr187在结直肠癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常组织;结直肠癌组织中P-p27Thr187阳性表达率为100.0%（80/80）,高表达者52例（65.0%,52/80）,低表达者28例（35.0%,28/80）;而癌旁正常组织中P-p27Thr187阳性表达率为13.8%（11/80）,与结直肠癌组织比较差异有统计学意义（P＜0.05）;p27在结直肠癌组织中的阳性表达率为48.8%（39/80）,癌旁正常组织中为90.0%（72/80）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;P-p27Thr187阳性表达与肿瘤细胞分化程度和TNM分期有关（均P＜0.05）;P-p27Thr187表达强度与细胞增殖指标Ki-67表达强度呈正相关（r=0.487,P＜0.05）,与p27表达强度呈负相关（r=-0.394,P＜0.05）。结论结直肠癌组织中P-p27Thr187的异常表达可能参与了结直肠癌的发生、发展过程,其有助于综合评估结直肠癌的生物学行为,对结直肠癌的预后判断及诊治具有一定的参考价值。     

高尔基体蛋白73在肝脏疾病中的研究进展

高尔基体蛋白73（Golgi protein 73,GP73）又称为高尔基体磷酸化蛋白2（Golgi phosphoprotein 2,GOLPH 2）和高尔基体膜蛋白1（Golgi membrance protein,GOLM1）,是近年发现的一种 II 型高尔基体膜蛋白（Type II Golgi membrance protein）。该蛋白在多种疾病及癌变组织中都有高表达,与肝脏疾病关系尤其密切;多项研究显示,GP73在肝癌的血清学诊断中的敏感性和特异性都优于 AFP,有望成为肝癌早期诊断的血清学标志物;也有研究报道其在病毒性肝炎和肝硬化患者中也有高表达。现将 GP73在肝脏疾病中的研究进展作一综述。