体外神经干细胞培养过程中蛋白激酶磷脂酰肌醇-3激酶／AKT信号途径的作用

目的：探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase，P13K)／AKT信号途径在体外培养神经干细胞存活、分化中的作用。方法：实验于2001-11／2004-04在重庆医科大学神经病学研究所完成。分为对照组、P13K特异性抑制剂wortmannin组和LY294002组；采用间接免疫荧光法检测nestin，NF-200和GFAP的表达；TUNEL评价细胞凋亡率；Western Blot法检测磷酸化的AKT，caspase-9和bad的表达。结果：随着wortmannin和LY294002浓度增大，神经干细胞的形态变化逐渐明显，而且细胞凋亡率也逐渐增加。低浓度时(wortmannin浓度为5nmol／L，LY294002浓度为2μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组无显著性意义(P&;gt;0．05)；高浓度时(wonmannin浓度为50，100nmol／L，LY294002浓度为50，100μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组、低浓度组有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。Western Blot结果提示，随着PI3K特异性抑制剂浓度增大，磷酸化AKT的表达逐渐减弱。当高浓度woftmannin(20nmol／L)和LY294002(10μmol／L)抑制了AKT磷酸化后，磷酸化的caspase-9，Bad表达减弱。此外，将wortmannin组和LY294002组存活的细胞接种后，分化后细胞的NF-200，GFAP表达无显著性意义。结论：神经干细胞存活依赖于PI3K／AKT途径的活化，其机制可能是PI3K／AKT活化后，促进了Bad和caspase-9等蛋白的磷酸化，抑制了细胞凋亡事件的发生。但是PI3K／AKT途径可能在神经干细胞的分化中的作用甚微。     

静脉注射氢氧化铁蔗糖复合物治疗肾性贫血的临床研究和安全性分析

目的　探讨静脉注射氢氧化铁蔗糖复合物 (维乐福 ,venofer)治疗血液透析 (HD)患者肾性贫血的有效性和安全性。方法　选择 30例HD患者 ,分为氢氧化铁蔗糖复合物组和口服铁组 ,每组 15例。氢氧化铁蔗糖复合物组 :每次血液透析时静脉注射 2 0 0mg氢氧化铁蔗糖复合物 10 0ml生理盐水 ,直至完成总补铁量 ;口服铁组 :琥珀酸亚铁 2 0 0mg ,每日 3次 ,共 8周。均同时使用基因重组人红细胞生成素 (EPO) 5 0 μ·Kg-1·次 -1皮下注射。比较 2组患者贫血治疗的效果和安全性。结果　治疗后 2组患者贫血均改善 ,氢氧化铁蔗糖复合物组血红蛋白 (Hb)上升每周 (4.5± 2 .0 ) g/L ,8周内Hb达到靶目标 (110 g)占 6 0 .0 % ,平均每人EPO总用量 4 5Kμ ,比口服铁组少 37.5 % ,而口服铁组Hb上升每周 (1.5± 0 .8) g/L ,8周内无 1例达到靶目标 ,平均每例EPO总用量 72Kμ ,2组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。 结论　静脉注射氢氧化铁蔗糖复合物可作为伴有缺铁的血液透析患者长期补铁的方式 ,配合EPO治疗贫血 ,疗效优于口服铁 ,且不良反应发生率低。     

抗心磷脂抗体在中青年脑梗死中的意义

目的　研究抗心磷脂抗体与中青年缺血性脑血管疾病关系。方法　以酶联免疫吸附法 (ELISA)对 76例脑梗死病人 (<5 0岁 39例 ,≥ 5 0岁 37例 ) ,2 5例非缺血性脑血管疾病病人及 15例正常人的血清抗心磷脂抗体 (ACL抗体 )进行测定。结果　 <5 0岁的脑梗死病人ACL抗体阳性率为 35 9% ,≥ 5 0岁的脑梗死病人ACL抗体阳性率 16 2 % ,对照组ACL抗体阳性率 7 5 %。 <5 0岁脑梗死病人的ACL抗体阳性率高于≥ 5 0岁的脑梗死病人及对照组 (P <0 0 5 )。≥ 5 0岁脑梗死病人ACL抗体阳性率与对照组无显著差异。说明临床上无任何自身免疫疾病中青年脑梗死病人与ACL抗体更密切相关。结论　ACL抗体是中青年脑血管疾病的重要危险因素 ,对中青年脑梗死病人应积极检测ACL抗体 ,提示除常规脑梗死治疗外 ,加入免疫抑制剂、血浆置换治疗有一定的积极意义。ACL抗体的检测为中青年脑血管病的一级预防提供可靠依据     

高浓度葡萄糖诱导红细胞磷脂酰丝氨酸暴露的机制研究

本研究探讨高浓度葡萄糖诱导红细胞磷脂酰丝氨酸（PS）暴露的机制。将红细胞于葡萄糖缓冲液中孵育后用流式细胞术分析PS标记率和前向角值；检测caspase-3和easpase-8的活化情况；用流式细胞术和荧光显微镜观察亮抑酶肽对葡萄糖引起的红细胞PS暴露的抑制效果。结果表明：葡萄糖可以诱导红细胞PS暴露，而且其效率和葡萄糖浓度密切相关。随着葡萄糖浓度的增加，红细胞的PS标记率呈逐步增加的趋势，当葡萄糖浓度为0．8mol／L时，红细胞的PS标记率在80％以上。然而，在葡萄糖引起的红细胞PS暴露过程中，caspase-3和caspase-8没有活化，而亮抑酶肽却可以很好地抑制红细胞PS暴露和使其体积缩小。随着亮抑酶肽浓度的增加，红细胞PS标记率呈逐步下降的趋势，而细胞体积却呈逐步增加的趋势。结论：高浓度葡萄糖可以导致严重的红细胞PS暴露，而且这种PS暴露和caspase无关，推测葡萄糖诱导的红细胞PS暴露是受一条对亮抑酶肽高度敏感的、未知的通路调控的．     

鸦胆子油乳膀胱灌注对膀胱癌患者红细胞免疫功能的影响

目的 分析鸦胆子油乳膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的临床效果，探讨其对膀胱癌患红细胞免疫功能的影响。方法 检测行保留膀胱手术的30例膀胱移行细胞癌患手术前后不同时期的红细胞I型补体受体花环率（C3bRR)、免疫复合物花环率（ICR）、红细胞免疫促进因子（RFER）、红细胞免疫抑制因子（RFIR）、促肿瘤红细胞花环试验（ETER）、协同肿瘤红细胞花环试验（ATER）及自然肿瘤红细胞花环试验（NTER），同时测定20例健康献血员的红细胞免疫指标作为对照。结果 膀胱移行细胞癌组术前C3bRR、RFER、3项肿瘤红细胞花环率均降低，ICR、RFIR增高；鸦胆子油乳灌注后C3bRR、RFER、ETER、ATER、NTER升高，ICR、RFIR降低，在术后2个月达到峰值，6个月后恢复到正常人水平。结论 膀胱移行细胞癌患红细胞免疫功能低下；鸦胆子油乳膀胱灌注化疗可提高膀胱癌患红细胞免疫功能。     

巨泌乳素血症及其实验室筛查方法

高泌乳素血症见于垂体前叶产泌乳素(PRL)的细胞异常分泌造成的各种病理生理情况.文献报道[1]少数高泌乳素血症系由巨泌乳素血症引起.     

OPN、PI3K及MMP-9在子宫内膜异位症组织中的表达及意义

目的研究骨桥蛋白(OPN)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在子宫内膜异位症组织中的表达,及其与子宫内膜异位症临床病理特征之间的相关性。方法前瞻性选取潍坊医学院附属医院收治的子宫内膜异位症患者异位内膜35例(异位内膜组)、在位内膜26例(在位内膜组),正常内膜27例作为对照组。采用免疫组化法及半定量分析法分别检测OPN、PI3K、MMP-9在三组中的表达。分析异位内膜组织中OPN、PI3K与MMP-9的表达与病理特征的关系。采用Pearson相关分析分析OPN、PI3K和MMP-9在三组中的表达的相关性。结果OPN、PI3K、MMP-9在异位内膜组中的表达高于在位内膜组,在位内膜组的表达高于正常内膜组,差异均有统计学意义(P 0. 05)。异位内膜组中OPN和MMP-9在Ⅲ～Ⅳ期中的表达高于Ⅰ～Ⅱ期,差异有统计学意义(P 0. 05)。PI3K在Ⅲ～Ⅳ期与Ⅰ～Ⅱ期的表达中差异无统计学意义(P 0. 05)。EMs患者异位内膜组中OPN、PI3K和MMP-9的表达与年龄和囊肿直径大小差异无统计学意义(P 0. 05)。OPN、PI3K与MMP-9在异位内膜中的表达两两之间具有正相关性(P 0. 05)。结论 OPN、PI3K和MMP-9在EMs异位内膜和在位内膜中高表达,且两两呈正相关性,三者在EMs发病中起重要作用。     

脑血栓患者血清抗心磷脂抗体和血浆D-二聚体水平变化及临床意义

目的　探讨抗心磷脂抗体 (ACLA)、D 二聚体 (D D)的水平与脑血栓的关系。方法　以ELISA方法检测 4 5例脑血栓患者血清ACLA及血浆D D水平 ,同时检测 4 4例健康体检者为对照组。结果　脑血栓患者血浆D D水平为(2 .4 0± 0 .6 10 )mg/L ,明显高于正常对照组的D D水平 (0 .4 2± 0 .0 3)mg/L ,t =12 .976 ,P <0 .0 1,血清ACLA的平均结合指数 (BI)显著高于正常对照组 (tIgG　 =5 .95 3,tIgM　 =6 .5 32 ,tIgA　 =9.0 90 ,P 均小于 0 .0 1) ,且与血浆D D的水平呈明显正相关性 (rIgG　 =0 .6 0 0 ,rIgM　 =0 .5 5 2 ,rIgA　 =0 .4 72 ,P均小于 0 .0 1)。脑血栓患者IgG ACLA的阳性率达 75 .6 % ,IgM ACLA的阳性率达 6 8.9% ,具有一型以上阳性者的比率为 6 4 .4 % ,而正常对照者却仅一例阳性 ,二者比较有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　ACLA水平的升高与脑血栓形成关系密切 ,ACLA水平的升高可能是引发脑血栓的重要原因 ,而D D水平的升高说明脑血栓患者的继发纤溶功能亢进 ,在凝血系统激活的同时 ,纤溶系统也被激活。     

抗心磷脂抗体在狼疮肾炎患者中的临床意义

背景:以往的研究表明,在系统性红斑狼疮及抗磷脂抗体综合征患者中,升高的抗心磷脂抗体滴度与血管血栓形成、血小板减少及反复流产的发生明显相关.但有关抗心磷脂在狼疮性肾炎患者中的临床意义的研究报道却不完全统一.目的:探讨抗心磷脂抗体在中国狼疮性肾炎患者中的阳性率及临床意义.设计:前瞻性单一样本的随访观察.单位:深圳市第四人民医院香蜜湖风湿病分院,广东医学院深圳风湿病研究所.对象:选择2001-03/2003-10于深圳市第四医院香蜜湖风湿病分院风湿科门诊就诊或住院的狼疮性肾炎患者97例.均符合美国风湿病学学会(ACR).1997年修订的狼疮性肾炎的诊断和分类标准.纳入对象均对检测项目知情同意.方法:记录患者入院后的临床资料和辅助检查结果.应用酶联免疫吸收法检测患者血清中的抗心磷脂抗体,阳性判断标准为测定值超过100 U/mL.大剂量口服强的松联合环磷酰胺静脉冲击治疗以诱导缓解,然后逐渐将强的松减量,将环磷酰胺换成硫唑嘌呤以维持疗效.同时使用其它药物控制可能合并的高血压、高血脂与关节痛等症状.每半年对纳入对象进行定期随访,记录狼疮性肾炎患者的临床资料及实验室检查结果,共3年.主要观察指标:患者的性别、年龄、系统性红斑狼疮病情活动指数,血栓形成、病理妊娠等临床表现及肾功能等实验室检查结果.结果:实验共纳入狼疮性肾炎患者97例,83例进入结果分析,14例脱落.在入选的97例患者中,其发病后被确诊时抗心磷脂抗体阳性者有38例(39%),高血压,血小板减少及雷诺现象在伴有抗心磷脂抗体阳性的狼疮性肾炎患者中更为常见.IgG型抗心磷脂抗体阳性狼疮件肾炎患者更易发生血管血栓形成:抗心磷脂抗体阳性狼疮性.肾炎患者更易发生流产、早产和死胎以及慢性肾功能不全恶化.结论:抗心磷脂抗体在狼疮性肾炎患者中的阳性率为39%,抗心磷脂抗体阳性的患者更易出现高血压,血小板减少及雷诺现象,抗心磷脂抗体阳件对预测狼疮性肾炎出现血管血栓形成、病理妊娠及慢性肾功能不全恶化可能有一定作用.