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目的 探讨硫酸吲哚酚(IS)对RAW264.7巨噬细胞吞噬氧气型低密度脂蛋白(ox-LDL)的诱导作用及其作用机制。方法 0、10、50、100、200和400μmol/L IS处理RAW264.7细胞24 h,采用CCK-8法测定RAW264.7细胞存活率,流式细胞术测定RAW264.7细胞的Dil标记氧化型低密度脂蛋白(Dil-ox-LDL)吞噬量。200μmol/L IS处理RAW264.7细胞0、12、24、36和48 h,测定RAW264.7细胞存活率和Dil-ox-LDL吞噬量。IS组RAW264.7细胞用200μmol/L IS处理24 h,UO126+IS组RAW264.7细胞以5μmol/L UO126预处理2 h后再200μmol/L IS处理24 h,测定非处理组、IS组和UO126+IS组RAW264.7细胞存活率和Dil-ox-LDL吞噬量,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测在IS刺激15 min时的ERK1/1蛋白表达情况。结果 IS对RAW264.7细胞存活率的浓度效应和时间效应检测中,不同组间比较差异无统计学意义(P >0.05)。Dil-ox-LDL吞噬量与IS浸润浓度及处理时间均呈正相关(P <0.01)。IS组的Dil-ox-LDL吞噬量和磷酸化ERK1/2蛋白表达量均明显高于非处理组(P <0.01)。UO126+IS组的Dil-ox-LDL吞噬量略低于非处理组,但差异无统计学意义(P >0.05);磷酸化ERK1/2蛋白表达量大幅低于非处理组,差异有统计学意义(P <0.01)。UO126+IS组同IS组比较,Dil-ox-LDL吞噬量和磷酸化ERK1/2蛋白表达量均呈现大幅降低(P <0.01)。 结论 IS可在体外直接诱导RAW264.7巨噬细胞吞噬ox-LDL,该效应经由活跃MAPK信号转导通路实现,且随IS浓度升高和浸润时间延长而增强。
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