2018年烟台市同期五起伤寒病原学研究及溯源分析

目的分析烟台市5起伤寒病原学特征及分子流行病学关联。方法2018年自烟台市5例伤寒确诊病例样本和流行病调查样本分离获得6株伤寒沙门菌菌株,病例发病时间自2018年5月26日至7月24日,分别分布于烟台牟平区水道镇、烟台蓬莱区登州街道、烟台龙口东莱街道、烟台牟平区文化街道、烟台芝罘区福莱山街道。采用常规细菌分离方法和XbaⅠ/BlnⅠ双酶切脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对伤寒杆菌进行溯源分析,同时开展viaB毒力基因检测和27种临床常用抗生素敏感试验对伤寒杆菌进行病原学研究。结果6株伤寒杆菌经PFGE-XbaⅠ和PFGE-BlnⅠ电泳分为4个PFGE模式,其中3株菌同源性100%;1株多耐药菌(外籍患者),1株单耐药菌(外省滞留史患者),1株完全敏感菌,同一PFGE模式的3株菌药敏表型一致,除对氨基糖甙类和喹诺酮类部分抗生素中介外,对其他抗生素均敏感;除外籍患者标本分离株viaB基因阴性外,其他菌viaB基因均阳性。结论烟台寒杆菌对临床常用抗生素敏感性良好,仍需重视伤寒散发病例发生和伤寒输入感染。     

二氧化硅法纯化琼脂糖凝胶中的DNA

利用二氧化硅特异地吸附核素的特性，建立了从琼脂糖凝胶中回收ＤＮＡ的方法。结果表明本方法对１３００￣３５００ｂｐ的ＤＮＡ回收效果较好，回收效率达６０％￣７０％，１００￣１５００ｂｐ，３５００￣５０００ｂｐ的ＤＮＡ亦能被有效地回收。通过对回收ＤＮＡ的酶切，连接等实验，证实了所回收的ＤＮＡ片段能够满足进一步的实验要求。该方法简单，快捷，经济，适用，值得推广。     

溶胶-凝胶法制备纳米羟基磷灰石粉体的研究进展

目的 利用溶胶凝胶法制备纳米羟基磷灰石粉体的方法进行研究。方法综述了溶胶凝胶法的基本原理和分类，介绍了制备纳米羟基磷灰石粉体采用的溶胶-凝胶方法，提出了相关待解决的问题。结果溶胶-凝胶法的研究已取得一定的进展。结论利用该方法有望制备出形状可控、粒度均匀的纳米羟基磷灰石粉体。     

凝胶色谱法半制备级纯化单克隆抗体

作者采用ＳｅＰｌｌａｃｙｌＳ－２００凝胶色谱柱，在快速蛋白液相色谱系统（ＦＰＬＣ）建立了肝癌相关抗原单克隆抗体半制各级纯化方法。该法是将ＭｃＡｂ腹水经４０％饱和硫酸铵盐析粗分离后，再用凝胶色谱纯化，一次上样量相当于５～１０ｍｌ腹水，可得纯化ＭｃＡｂ３０～６０ｍｇ，得率为６～６．５ｍｇ／ｍｌ腹水，回收率为６３％，一次色谱纯化周期２ｈ，整个分离纬化可在３ｈ内完成。经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＤＥＡＥ离子交换色谱法检测ＭｃＡｂ纯度大于８０％，ＡＢＣ染色法测定ＭｃＡｂ活性为，１：４００００（１．５６×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ），是一般实验室纯化ＩｇＧ类ＭｃＡｂ的实用方法。     

可注射GelMA水凝胶搭载CD271与PDGF修复骨缺损的实验研究

目的：探讨负载CD271与血小板衍生生长因子(PDGF)的可注射甲基丙烯酸明胶(GelMA)水凝胶支架在SD大鼠颅骨缺损修复中的效果。方法：利用5%的GelMA水凝胶与PDGF共同构建得到GelMA/PDGF支架,然后将CD271抗体对支架进行修饰。实验共分为GelMA、GelMA/PDGF、GelMA/CD271、GelMA/PDGF/CD271 4组。通过水凝胶支架与雄性SD大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外共同培养,检测细胞的生物相容性及成骨相关蛋白的表达情况;颅骨缺损模型使用的动物为质量约350 g的SD雄性大鼠,并在骨缺损处植入水凝胶支架;大鼠颅骨在术后8周接受Micro-CT检测以评估修复效果。结果：BMSCs与负载CD271与PDGF的GelMA水凝胶支架具有良好的生物相容性,可提高成骨相关蛋白(碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原蛋白、骨钙素和骨桥蛋白)的表达(P<0.05),并可促进修复体内颅骨的缺损。结论：负载CD271与PDGF的混合水凝胶支架具有良好的生物相容性,在骨组织工程中极具应用潜力,能促进BMSCs的成骨分化。     

微柱凝胶试验在临床输血中的应用

目的 探讨微柱凝胶试验在临床输血中的应用。方法 采用微柱凝胶试验检定ABO及RhD血型1206人次,交叉配血6838人次。结果 31份正反定型不一致的标本中9例假阳性,5份RhD(-)中份弱D,78份交叉配血不便的标本中9份假阳性。结论 微柱凝胶试验可作为临床输血的常规方法。     

胶原凝胶固定化α—糜蛋白酶的研究

目的：采用化学交联方法将α－糜蛋白酶固定化于胶原蛋白凝胶。方法：以戊二醛促进提取的1型胶原蛋白与α－糜蛋白酶形成西夫碱,从而生成固定化糜蛋白酶,并计算固定化效率,观察pH,温度对酶活性影响及固定化对胶原蛋白生物学特性的影响。结果：作出pH,温度等外界因素对固定化酶活性的影响曲线,并得到具一定活性的固定化α－糜蛋白酶,结论：已成功地制备以胶原固定化α－糜蛋白酶的创面外用膜片,可作进一步研究。     

血液分离胶的制备研究

目的 :对血液分离胶的制备进行研究。方法 :用天然橡胶和特效触变剂等原料制备具有触变性的凝胶 ,研究该凝胶分离血清的较优组成。结果 :血液分离胶的较优组成是天然橡胶 12 .8%、特效触变剂 2 8.0 %和溶剂汽油 5 8.2 %。结论 :所制备的血液分离胶具有制备容易、分离效果好和成本较低等优点。     

深低温保藏软骨细胞的胶原凝胶立体培养

目的研究经深低温保藏后软骨细胞在胶原凝胶载体中的生长特性。方法取4周新西兰兔关节软骨,经分离成软骨细胞悬液后,置于深低温保藏。2月后,复苏被冻存的软骨细胞,包埋于含小牛血清和DMEM的胶原凝胶中培养,通过组织化学和透射电镜观察进行分析。结果与新鲜软骨相同,经深低温保藏的软骨细胞,复苏后包埋在胶原凝胶中培养7d,见单个的软骨细胞形成增殖的两个或两个以上的同源细胞,细胞周围集聚异染性细胞外基质。结论经深低温保藏的软骨细胞,在胶原凝胶中培养,仍保持了分裂增殖和合成细胞外基质的能力,可作为种子细胞,供组织工程修复软骨组织。     

基质金属蛋白酶活性测定的改良底物胶电泳法

基于ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）的原理和技术方法,介绍一种改良的明胶－聚丙烯酰胺凝胶电泳方法（Ｇｅｌａｔｉｎ－ＰＡＧＥ）,简称底物胶电泳地,用于测定能够水解明胶的基质金属蛋白酶类（ＭＭＰｓ的水解活性。该方法简便实用,将底物胶中明胶浓度从１０ｇ／Ｌ降至２ｇ／Ｌ,并将分子质量标准浓度提高至≤４０μｇ／孔,较好地解决了实验过程中所遇到的有关分子质量鉴定的难题。