局灶性脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡及七叶皂甙钠干预的研究

目的:观察七叶皂甙钠在大鼠脑缺血再灌注后神经元细胞凋亡过程中的作用。方法:运用大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,比较正常对照组、假手术组、缺血3h组、缺血3h再灌注3h/6h/12h/24h/48h/72h组、缺血3h再灌注β-七叶皂甙钠药物干预后3h/6h/12h/24h/48h/72h组等大鼠脑组织中的神经元凋亡情况。结果:七叶皂甙钠干预治疗后,缺血组缺血侧凋亡阳性细胞减少。结论:七叶皂甙钠有明显抑制大鼠脑缺血再灌注后神经元细胞凋亡的作用。     

IGF-1对大鼠局灶性脑损伤HSP_(70)表达的影响

目的:研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对大鼠局灶性脑缺血再灌注后热休克蛋白70(HSP70)表达的影响及与缺血的关系,探讨IGF-1对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:制作SD大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。将55只SD雄性大鼠随机分为假手术组(n=5)、对照组(n=25)、IGF-1治疗组(n=25),其中后两组按缺血再灌时间(6h、12h、1d、3d、7d)不同可分为5个亚组,每组5只,治疗组于缺血2h再灌注1h后经腹腔注入40μg/kg稀释为1ml的IGF-1,假手术组及对照组同时腹腔注入生理盐水1ml。以上动物均在再灌注后规定时间点用4%多聚甲醛经心脏灌注固定,取大鼠脑组织,应用免疫组化S-P法和HE染色检测HSP70蛋白表达及脑组织结构病理变化。结果:与对照组相比,治疗组大鼠脑组织HSP70表达明显增加(P<0.05),其神经细胞坏死程度明显减轻(P<0.05)。结论:IGF-1在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中起保护作用,其作用机制包括增加HSP70蛋白的表达,发挥其神经保护作用。     

慢性间歇性缺氧合并脑缺血再灌注动物模型的研究

目的：通过慢性间歇性缺氧（CIH）合并脑缺血再灌注（CIR）大鼠模型的建立,研究睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）对脑梗塞的影响。方法：2月龄Sprague-Dewley（SD）大鼠34只,随机选取10只在缺氧箱中行血氧检测,余随机分成4组：空白对照组（UC,n=6）,假手术组（n=6）,CIR组（n=6）,CIH＋CIR组（n=6）。CIH＋CIR组大鼠每天间歇性缺氧8小时。UC组、假手术组及CIR组暂不作处理。8周后CIR组和CIH＋CIR组均用线栓法制备大脑中动脉缺血（MCA0）模型。通过神经功能缺损评分观察大鼠大体情况;2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色观察脑梗死体积。结果：CIH＋CIR组与CIR组梗死体积和神经功能评分均有明显的差异。结论：本实验建立的慢性间歇性缺氧合并脑缺血再灌注大鼠模型可满足OSAS＋脑梗死基础研究的需要,CIH可加重脑缺血再灌注损伤。     

PKA参与ATP对大鼠背根神经节神经元电压门控性钙通道的抑制

目的 探讨ATP对大鼠背根神经节(DRG)神经元的电压门控性钙通道(VGCC)的抑制效应及其信号转导途径.方法 在急性分离的大鼠DRG神经元上应用全细胞膜片钳技术记录ATP诱导的电流以及VGCC电流;应用钙离子成像技术检测胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的变化.结果 ATP能够可逆性地抑制DRG神经元的VGCC电流和VGCC介导的[Ca2+]i升高.用PKA抑制剂H-89预处理DRG神经元,ATP对VGCC电流及其介导的[Ca2+]i升高的抑制被反转;而用PKC抑制剂bisindolylmaleimide(Bis)预处理DRG神经元,ATP对VGCC介导的[Ca2+]i升高的抑制效应则无影响.结论 在大鼠DRG神经元中,PKA参与了ATP对该神经元VGCC的抑制.     

新生大鼠海马神经元的原代培养与鉴定

目的:探讨建立简便高效的大鼠海马神经元原代培养的纯化方法。方法:(1)离体培养新生24 h内SD乳鼠海马神经元,每天在倒置相差显微镜下进行神经元的形态学观察;(2)MTT法检测培养不同时间段神经元的活力变化,并绘制生长曲线;(3)纯化培养9 d神经元利用免疫荧光染色法检测β-微管蛋白Ⅲ(β-tublinⅢ)的表达率。结果:(1)倒置相差显微镜下观察原代培养的海马神经元,刚分离种植时可见神经细胞为圆形,24 h大多数细胞贴壁,3 d细胞突起增大、增粗,培养5~7 d神经元胞体丰满,突起交织成的网络更密集,培养14~16 d后,神经元开始退化;(2)生长曲线结果发现海马神经元体外培养经历了4个时期,即生长潜伏期、对数生长期、平台期、生长停滞期;(3)经β-tublinⅢ鉴定海马神经元纯度为(93.0%±2.5%)。结论:本实验方法步骤简便,可获得纯度较高的海马神经元,为研究与海马神经元相关的疾病提供了实验基础。     

缺氧诱导因子-1α和Ets-1在脑膜瘤中的表达及相关性研究

目的研究缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α）和Ets-1（E26transformation-specific 1）在脑膜瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学法分别检测56例脑膜瘤和9例正常脑膜HIF-1α和Ets-1的表达,采用逆转录聚合酶链反应（RT-polymerase chain reaction,RT-PCR）方法检测25例新鲜脑膜瘤和9例正常脑膜组,运用统计学方法分析HIF-1α和Ets-1在脑膜瘤表达的相关性。结果 HIF-1α和Ets-1在正常脑膜不表达或低表达,脑膜瘤中HIF-1α阳性表达率53.6%（30/56）,Ets-1呈阳性表达率48.2%（27/56）;脑膜瘤恶性倾向组HIF-1α的阳性表达率高于脑膜瘤良性组（P〈0.05）;HIF-1α和Ets-1在脑膜瘤的表达呈正相关（γs=0.317、P〈0.05）。脑膜瘤中HIF-1α和Ets-1的mRNA含量高于正常脑膜组（P〈0.05）,脑膜瘤恶性倾向组HIF-1α和Ets-1的表达高于脑膜瘤良性组（P〈0.05）,HIF-1α和Ets-1在脑膜瘤的mRNA水平呈正相关（γ=0.532、P〈0.01）。结论 HIF-1α和Ets-1的表达与脑膜瘤恶性度有关,二者在脑膜瘤发生发展过程中有协同作用,可作为脑膜瘤预后的潜在指标。     

NMDA受体依赖的神经元存活及保护作用的机制

NMDA受体属于谷氨酸受体,它在突触传递和突触可塑性中都发挥着非常重要的作用,其介导的兴奋性毒性是脑缺血、缺氧和脑外伤等导致脑损伤的重要分子机制.但是,近年来的研究发现,在生理和某些病理情况下,NMDA受体的激活具有促进神经元存活及保护神经元免受损伤的作用.     

快速急性缺氧耐力与性别关系的研究

为了解快速急性缺氧耐力与性别的关系,笔者对初选身体健康的58名中青年进行快速急性缺氧耐力检测,现将结果报道如下。     

盐酸甲氯芬酯联合高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病60例

目的 评价高压氧联合注射用甲氯芬酯对新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）的疗效。方法将120例患儿随机分为观察组（常规治疗＋甲氯芬酯＋高压氧）、对照组（常规治疗＋高压氧）,每组各60例。对照组在常规治疗同时进行高压氧治疗,每日一次,10d为一个疗程,观察组在对照组治疗基础上加用注射用甲氯芬酯,10d为一个疗程。治疗前后的HIE患儿采用新生儿神经行为评定（NBNA）检测。结果观察组有效率明显高于对照组,疗效比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论注射用盐酸甲氯芬酯联合高压氧治疗新生儿缺氧缺血性脑病疗效稳定,无毒副作用,值得推广。     

石菖蒲冰片对神经细胞缺氧性损伤的保护作用

目的 探讨石菖蒲，冰片对缺氧损伤神经细胞的保护作用。方法 在缺氧培养条件下造成大鼠神经细胞损伤，测定空白对照组，模型对照组，石菖蒲挥发油组，冰片组，冰片＋石菖蒲挥发油（低，中，高配比）组神经元细胞数，神经细胞支配面积。结果 石菖蒲挥发油，冰片，冰片＋挥发油（低，中，高配比）给药组神经细胞支配面积和神经元细胞数高于空白对照组和模型对照组。结论 石菖蒲，冰片对缺氧诱导的大鼠神经细胞损伤具有保护作用。