子宫内膜样腺癌组织中p53和p63基因的表达及其意义

目的:研究p53和p63基因在子宫内膜样腺癌(endometrial adenocarcinoma,EC)发生发展中的作用,及其与子宫内膜样腺癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化SP法检测38例EC和23例子宫内膜增生过长(endometrial hy-perplasia,EH)及10例正常增生期子宫内膜(be-nign proliferative endometrium,BPE)组织中p53、p63基因的表达情况。结果:p53蛋白在EC中的阳性率为31·6%,明显高于EH组和BPE组,P值分别为0·0457和0·0389;p53的表达与EC的手术病理分期和肌层浸润深度有关,P值分别为2·19×10-4和1·436×10-6,而与组织学分级无关。p63蛋白在EC中的阳性率为81·6%,与EH组、BPE组比较,差异均有统计学意义,P值分别为9·58×10-7和5·59×10-5。p63的表达与EC的组织学分级、手术病理分期和肌层浸润深度均无关;p53和p63基因在EC中的表达呈正相关。结论:p53和p63均参与了EC的发生,二者可能起协同作用;p53更多地表达于高分期及深肌层浸润的EC组织中,p63在EC中呈高水平表达,说明p53与EC的浸润发展有关,p63在EC的发生中可能起癌基因的作用。     

凋亡和相关蛋白bcl-2在肺癌组织中的表达及对预后的影响

目的:研究细胞凋亡及凋亡相关蛋白bcl-2在肺癌组织中的表达水平,及其对预后的影响。方法:应用DNA缺口末端标记技术和免疫组化方法检测116例肺癌患者组织中细胞凋亡和bcl-2蛋白表达水平。结果:116例肺癌患者中,细胞凋亡数量达到或超过0·1%的病例占48·3%(56/116),bcl-2蛋白阳性表达的病例占51·7%(60/116);单因素分析显示,肺癌患者预后的影响因素有凋亡(χ2=8·31,P=0·0039)、bcl-2(χ2=4·41,P=0·0357)、淋巴结转移(χ2=19·34,P=0·0001)和TNM分期(χ2=18·54,P=0·0001);COX模型多因素分析显示,淋巴结转移(χ2=19·28,P=0·0010)和bcl-2蛋白阳性表达(χ2=5·80,P=0·0160)是肺癌患者的预后不良因素。结论:凋亡及凋亡相关蛋白bcl-2影响肺癌患者的生物学行为及预后。     

舒林酸抑制肝癌HepG2细胞增殖的实验研究

目的:观察舒林酸对肝癌HepG2细胞增殖的影响,探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法观察舒林酸抑制肝癌HepG2细胞增殖;采用流式细胞仪检测舒林酸对HepG2细胞周期分布的影响,同时结合透射电子显微镜及DNA凝胶电泳观察舒林酸诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用。结果:舒林酸可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,其作用具有时间和浓度依赖性(n=24),r24h=0·914,P=0·037;r48h=0·921,P=0·041;r72h=0·907,P=0·028;诱导其凋亡,作用24h,对照组凋亡率为(1·5±0·3)%,3×10-4组凋亡率为(8·6±1·3)%,9×10-4组凋亡率为(27·0±1·7)%,P值分别为0·018和0·000;作用48h,对照组凋亡率为(2·8±0·7)%,3×10-4组凋亡率为(13·2±2·3)%,9×10-4组凋亡率为(37·1±2·9)%,P值分别为0·012和0·000。舒林酸改变细胞周期分布,使G0/G1期细胞比例增高,S期比例降低。作用24h与对照比较,3×10-4处理组P=0·048,9×10-4处理组P=0·037,两组间比较P=0·041;作用48h与对照比,3×10-4处理组P=0·040,9×10-4处理组P=0·032,两组间比较P=0·044。结论:舒林酸可诱导肝癌HepG2细胞凋亡,改变细胞周期分布,从而抑制细胞增殖。     

SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞凋亡的影响

目的:观察特异性JNK抑制剂[specificc-junNH2terminalproteinkinase(JNK)inhibitor]SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖{[2-(3-carboxy-1-oxopropyl)a-mino-2-deoxy-D-Glucose],COPADG}诱导Eca-109细胞凋亡的影响并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,用COPADG及SP600125对细胞进行处理。细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;MTT检测不同时间点的细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,同时,COPADG诱导的Eca-109细胞凋亡率明显减低,细胞增殖抑制率下降明显,与COPADG单独作用组之间比较差异有统计学意义。结论:SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物CO-PADG诱导Eca-109细胞凋亡具有抑制作用,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。     

四种血管特异生长因子 mRNA与肝癌发生和门静脉瘤栓形成的关系

目的:探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、促血管生成素2(angiopoietin,Ang2)、ephrinB2和内分泌腺源血管内皮生长因子(endocrinegland-derivedvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGF)在肝癌发生和门静脉瘤栓(PVTT)形I中的作用。方法:收集手术切除的无门静脉主干瘤栓的肝癌标本(A组)54例、伴门静脉主干瘤栓的肝癌标本(B组)9例和肝英化组织(C组)、正常肝组织(D组)各10例。用RT-PCR法检测标本中VEGF、Ang2、ephrinB2和EG-VEGF的表达。用免疫组织化学方法检测内皮细胞的标志分子CD34,并计数微血管密度(microvesseldensity,MVD),比较四组标本中各因子的表达和MVD水平。结果:A、B、C和D组的MVD分别为146·69±77·79、214·07±54·41、32·85±8·49和34·83±8·29,差异有统计学意义,F=19·77,P=0·000,且A组的MVD低于B组,P=0·006,高于C组,P=0·000。VEGF165、VEGF189、Ang2和EG-VEGFmRNA在四组标本中表达的差异有统计学意义,且VEGF165、Ang2和EG-VEGFmRNA在A、C两组和A、B两组内表达的差异有统计学意义(P值都<0·05或0·01)。肝癌中VEGF165、VEGF189、Ang2和EG-VEGFmRNA的表达与MVD正相关,rs分别为0·764、0·510、0·640和0·366,P值分别为0·000、0·000、0·000和0·003。结论:VEGF、Ang2和EG-VEGFmRNA与肝癌发生和MVD相关,并通过调控血管生成,促进肝癌门静脉瘤栓的形成。     

塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及血管形成的影响

目的:探讨塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及血管形成的影响。方法:使用对数生长期的人结肠癌细胞(HT-29)于裸鼠皮下接种成瘤后原位种植。术后随机分为对照组(C组)及塞来昔布高、中、低剂量组(H、M、L组)共四组进行研究。结果:24只裸鼠实验期间无1只死亡,成瘤率为100%,比较各组原位移植瘤体积和瘤质量差异有统计学意义,P值均<0·05。L、M和H组的抑瘤率分别为25·30%、38·80%和76·92%,与对照组比较差异有统计学意义,P=0·000,且存在明显的剂量依赖。干预组瘤组织中MVD、VEGFmRNA、MMP-2mRNA和匀浆上清中PGE2含量与对照组相比差异有统计学意义,P值分别为0·050、0·050、0·050和0·010,随着剂量增加,MVD、VEGFmRNA、MMP-2mRNA和匀浆上清中PGE2含量逐渐降低。瘤组织中PGE2含量与瘤质量,以及MVD与VEGFmRNA、MMP-2mRNA均存在显著的正相关性,r=0·8814,P=0·000;r=0·8573,P=0·000;r=0·6427,P=0·001。结论:塞来昔布通过抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤环氧化酶-2活性,抑制PGE2合成、VEGFmRNA和MMP-2mRNA表达,抑制肿瘤的血管形成,从而对结肠癌的生长有抑制作用。     

进展期胃癌组织中COX-2表达与树突状细胞浸润的相关性研究

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygen-ase-2,COX-2)在进展期胃癌中的表达及其与树突状细胞(dendritic cells,DCs)浸润关系的临床意义。方法:收集我院接受胃癌根治标本31例,采用免疫组织化学SP法检测COX-2表达及其与DCs浸润程度的关系。结果:COX-2在胃癌中的表达率为67.74%(21/31),对照组为19.35(6/31),两者比较差异有统计学意义,P=0.000;淋巴结转移组COX-2表达率为91.67%,无淋巴结转移组COX-2表达率为52.63%,两者比较差异有统计学意义,P=0.046。淋巴结转移组DCs的浸润数量为9.50±2.28,无淋巴结转移组DCs的浸润数量为7.53±2.14,两者比较差异有统计学意义,P=0.021。而与胃癌患者的年龄、肿瘤的大小、浸润深度和肿瘤的分化无关,P>0.05;DCs低浸润组的COX-2阳性表达率为88.24%,DCs高浸润组的COX-2阳性表达率为42.86%,两者差异有统计学意义,P=0.018。结论:胃癌中COX-2表达与DCs浸润与胃癌的预后有关,并且两者之间有一定的相关性。     

肿瘤细胞低氧反应的分子机制

由于肿瘤的高度浸润性和快速生长导致血液供应不足而产生肿瘤内低氧。低氧在肿瘤细胞生理过程中起着许多重要作用,这些作用包括特定的信号转导通路的激活、基因调控、基因突变介导的肿瘤细胞的恶性筛选、肿瘤细胞凋亡和肿瘤血管形成。多种机制参与了肿瘤的进展,其中肿瘤组织内的低氧对于肿瘤进展和转移是一个中心环节。综述了最近有关肿瘤细胞低氧诱导的分子机制方面的知识,重点描述了细胞内信号转导、基因调控、血管生成和凋亡的机制。对于这些通路的干预将是肿瘤治疗的一个新方向。     

血管内皮生长因子及其受体mRNA在前列腺癌组织中的表达

目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialcellgrowthfactor,VEGF)及其受体Flt1、KDRmRNA在前列腺癌组织中的表达。方法采用逆转录聚合酶链反应技术对手术的33例前列腺癌和11例正常前列腺组织标本中VEGF及其受体KDR、Flt1mRNA的表达进行检测。结果在78.79%(28/33)前列腺癌组织和63.64%(7/11)正常前列腺组织中检测到VEGF121、VEGF165mRNA的表达,表达水平分别为1.03±0.54和1.39±0.66,显著高于正常前列腺组织的0.38±0.31和0.54±0.26,t值分别为3.73和3.89,P值分别为0.0006和0.0002。KDR、Flt1mRNA在部分前列腺癌组织中表达,分别为48.48%(16/33)和33.33%(11/33),而在正常前列腺组织组织中未见表达;VEGFmRNA表达与KDRmRNA、Flt1mRNA表达密切相关,P值分别为0.002和0.000。结论前列腺癌组织中VEGF121、VEGF165及其受体KDR、Flt1mRNA表达水平升高,且VEGF表达与其受体KDR及Flt1表达密切相关。提示VEGF及其受体KDR、Flt1在前列腺癌发生发展过程中起重要作用。     

血管内皮生长因子与抑癌基因PTEN在肝细胞癌组织中表达及临床意义

目的:观察第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(phosphatase and tensinhomlog deleted on chromosome ten protein,PTEN)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)在肝细胞癌(hepatocellular carcino-ma,HCC)中表达及其关系,并探讨两者与HCC发生、发展及肿瘤侵袭性的关系。方法:采用免疫组织化学链霉素亲合素-生物素-过氧化物酶复合物(SP)法、半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测60例HCC及癌旁组织中PTEN与VEGF蛋白及mRNA表达和微血管密度(microvessel density,MVD),并进一步分析它们之间的相关性及其与肝癌组织临床病理分期、侵袭性的关系。结果:HCC中PTEN蛋白及mRNA表达阳性强度明显低于癌旁组织,而VEGF阳性表达强度明显高于癌旁组织,且两者间呈负相关(r=-0·613、-0·572,P=0·000、0·002);肝癌组织分化程度、侵袭性与PTEN表达呈负相关(P=0·02、0·000),而与VEGF和MVD表达呈正相关(P=0·000);MVD与PTEN表达呈负相关(r=-0·439,P=0·001),而与VEGF表达呈正相关(r=0·645,P=0·000)。结论:PTEN和VEGF表达水平一定程度上能反映HCC组织分化和侵袭性强弱;HCC中PTEN表达缺失可能引起VEGF表达增加,从而在肿瘤侵袭、转移中发挥一定作用。