TGF-β1诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变

目的 检测转化生长因子（TGF-β1）能否在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞-间质细胞转变（epithelial-mesenchymal transition,EMT）及其相应的信号转导机制.方法 在体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型细胞（RLE-6TN）中加入TGF-β1后,于不同时间段收取细胞,分别采用Real-time PCR及Western blot检测上皮及间质细胞标志物表达的改变;Western blot检测TGF-β1对RLE-6TN细胞p-Smad 2/3表达的影响;TGF-β1诱导的RLE-6TN细胞形态学的改变采用倒置相差显微镜观察,超微结构的改变采用透射电子显微镜观察.结果 加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其间质细胞标志物表达上调,上皮细胞标志物的表达下调;加入TGF-β1到RLE-6TN细胞后,其p-Smad 2/3的表达明显上调;形态学上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞向成肌纤维细胞样细胞转变;超微结构上,TGF-β1诱导RLE-6TN细胞特有的嗜锇性板层小体发生变性、肿胀并随TGF-β1作用时间延长最终完全消失.结论 TGF-β1能在体外诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞向间质细胞转变,其机制部分与Smad信号转导途径相关.     

非小细胞肺癌患者胰岛素样生长因子1受体、可溶性B7-H4的表达及临床意义

目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、可溶性B7-H4(sB7-H4)的表达及临床意义。方法 将2018年9月至2021年6月徐州医科大学附属徐州市立医院收治的109例NSCLC患者作为研究组,同时选取患者癌旁3 cm的正常组织作为对照组。另收集同期进行体检的正常人群81例为健康组。比较NSCLC患者IGF-1R、sB7-H4的表达,分析影响其预后的因素。结果 研究组IGF-1R阳性表达高于对照组、sB7-H4水平高于健康组(P<0.05);Ⅲ～Ⅳ期患者IGF-1R阳性表达、sB7-H4水平均高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05);预后不良患者、预后良好两组年龄、TNM临床分期、IGF-1R、sB7-H4比较,差异有统计学意义(P<0.05);年龄、TNM临床分期、IGF-1R、sB7-H4为影响NSCLC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论 IGF-1R、sB7-H4在NSCLC患者的不同表达可作为临床病情及预后的参考指标。     

转化生长因子-β1在哮喘血管重构中的作用

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在哮喘血管重构中的作用。方法40只小鼠随机均分为对照组、早期布地奈德治疗组(早期组)、延迟布地奈德治疗组(晚期组)和哮喘组4组。常规检测各项反映气道炎症、气道重构和血管重构的参数,采用Western印迹法测定肺组织中TGF-β1的表达水平。结果哮喘组气道血管的管壁厚度和胶原纤维面积均较对照组明显提高(P值均<0．01),且分别与气道平滑肌厚度和气道周围胶原纤维面积呈正相关(r=0．83、0．92,P值均<0．01)。早期治疗能明显降低上述指标;而晚期治疗仅能降低气道炎症反应,对气道和血管重构无明显改善。3组致敏小鼠肺组织中TGF-β1的表达均较对照组明显增多(P值均<0．01),TGF-β1的表达水平与血管厚度和血管周围胶原纤维面积呈正相关(r=0．75、0．82,P值均<0．01)。结论在哮喘的重建过程中有明显的血管重建——管壁增厚和血管旁胶原纤维增生,这一过程与TGF-β1的表达增加有关。早期糖皮质激素治疗能通过抑制TGF-β1表达水平改善哮喘的血管重构。     

VEGFR-2/KDR三区的载体构建、表达及胃癌患者抗-KDR抗体的检测

目的扩增人血管内皮细胞生长因子受体-2／激酶插入受体（VEGFR-2／KDR）三区基因,构建表达载体,在大肠埃希菌中表达,获得纯化蛋白。检测胃癌术前患者外周血中抗-KDR抗体水平,为进一步研究KDR与抗-KDR抗体在胃癌中的作用奠定基础。方法从人血管内皮细胞株ECV304提取总RNA,逆转录后,聚合酶链反应（PCR）扩增KDR胞外段三区基因,连接到pMD18-T载体测序;酶切后将目的基因插入原核表达载体pET28α（＋）构建重组质粒,将重组质粒转化到大肠埃希菌DH5et内并提取质粒,经双酶切鉴定后,再转化入表达菌株BL21（DE3）,异丙基-B-D硫化半乳糖苷（IPTG）诱导表达,用Ni^2＋-NTA树脂纯化、复性;用获得的蛋白包被酶联免疫吸附试验（ELISA）板,用ELISA检测32例胃癌患者和35名健康对照者外周血抗．KDR抗体水平。结果构建了表达载体pET28α（＋）-KDR3,并获得高效表达,表达的蛋白质相对分子质量为16000,重组蛋白以包涵体形式存在。胃癌患者外周血中抗-KDR抗体水平显著高于健康对照组（P〈0．01）。结论VEGFR-2／KDR三区基因成功克隆到表达质粒内并表达。为进一步研究KDR与抗-KDR抗体在胃癌中的作用奠定了基础,及可能为胃癌的血清学诊断提供新的方法。     

bFGF与EGF诱导BMSCs向神经干细胞分化的观察

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、表皮生长因子（EGF）在体外条件下对骨髓基质干细胞（BMSCs）向神经千细胞（NSCs）和神经样细胞分化的诱导作用。方法 采用出生4周左右大鼠的全骨髓细胞进行培养,传至第3代时,分为两组：实验组细胞加入bFGF和EGF,进行诱导分化;对照组不加因子继续培养。在倒置显微镜下每日观察,记录BMSCs的诱导分化情况,并应用免疫组化技术对细胞进行兔抗巢蛋白（Nestin）单抗、兔抗神经元特异性烯醇化酶（NSE）单抗、兔抗胶质纤维酸性蛋白（GFAP）单抗鉴定。结果 实验组诱导7d后有部分细胞具备神经元样细胞形态,胞体锥形或圆形,有较长单极或多极的突起,均有Nestin、NSE、GFAP阳性细胞表达,且3种细胞数量差别有显著性（t=3．266～6．099,P〈0．05）。而对照组细胞仍为典型的成纤维细胞形态,无Nestin、NSE、GFAP阳性细胞。结论 bFGF、EGF可以诱导BMSCs向NSCs分化,并可调控神经元分化,促进神经元细胞成熟。     

急性心肌梗死患者血清IGFBP-6、TGF-β1水平变化及与冠状动脉病变程度和预后的关系

目的 探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清胰岛素样生长因子结合蛋白-6(IGFBP-6)、转化生长因子β1(TGF-β₁)的水平变化及其与冠状动脉病变程度和预后的关系。方法 选取2018年2月至2019年2月于湖北省宜昌市第二人民医院心内科就诊的180例AMI患者为AMI组,根据Gensini评分将AMI组患者分为低Gensini评分(LGS)组(<27分)59例,中Gensini评分(MGS)组(27～38分)52例和高Gensini评分(HGS)组(>38分)69例。选取同期体检健康者50例为对照组。比较对照组与AMI组,以及不同冠状动脉病变程度组血清IGFBP-6、TGF-β₁水平。分析AMI患者血清IGFBP-6、TGF-β₁水平间的相关性。比较AMI患者IGFBP-6高表达组和低表达组、TGF-β₁高表达组和低表达组30 d内不良预后情况。结果 与对照组比较,AMI组患者血清IGFBP-6水平明显升高,TGF-β₁水平明显降低,差异有统计学意义(P<0...     

间充质干细胞治疗肺纤维化的研究进展

肺纤维化(PF)尚无有效的治疗药物和干预方法.间充质干细胞(MSCs)治疗特发性肺纤维化(IPF)、放射性肺纤维化(RPF)等类型PF的机制有多种,包括通过旁分泌作用,释放白细胞介素-1受体拮抗剂、抑制白细胞介素-1和肿瘤坏死因子-α的表达、抵抗组织炎性反应、增加肝细胞生长因子(HGF)信号传导、抑制PI3K/AKT/...     

吉非替尼、培美曲塞和贝伐珠单抗一线治疗EGFR突变晚期肺腺癌的有效性和安全性

目的探讨吉非替尼、培美曲塞和贝伐珠单抗一线治疗表皮生长因子受体(EGFR)突变晚期肺腺癌的疗效和安全性。方法选择2020年4月21日至2021年4月22日山东省肿瘤医院收治的35例初治EGFR突变晚期肺腺癌患者, 一线给予吉非替尼250 mg、培美曲塞500 mg/m2和贝伐珠单抗7.5～10.0 mg/kg, 21 d为1个周期。4个周期后给予吉非替尼联合培美曲塞维持治疗。分析患者的客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR), 12个月、18个月无进展生存(PFS)率以及不良反应发生率。结果 35例EGFR突变晚期肺腺癌患者ORR为85.7%(30/35), DCR为100%(35/35);EGFR 19del、L858R、L861Q患者的客观缓解例数分别为16、12、2例, 疾病控制例数分别为19、14、2例;ⅢB～ⅢC期、Ⅳ期患者的客观缓解例数分别为10、20例, 疾病控制例数分别为10、25例;美国东部肿瘤协作组评分0～1分、2分患者的客观缓解例数分别为18、12例, 疾病控制例数分别为20、15例。35例EGFR突变晚期肺腺癌患者12个月PFS率为80.0%(95%CI为63...     

潜在转化生长因子结合蛋白2在老年宫颈癌病人血清中的表达及临床意义

目的 探讨潜在转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)在老年宫颈癌病人血清中的表达水平及临床意义. 方法 本研究纳入2017年7月至2019年7月达州市中西医结合医院收治的78例老年宫颈癌病人(宫颈癌组),另纳入同期在我院确诊为慢性宫颈炎的31例病人(宫颈炎组)及在我院体检的37例健康志愿者(对照组),收集宫颈癌病人的临床...     

基于HK-2细胞转分化研究益肾化瘀方抗肾间质纤维化机制

目的:观察益肾化瘀方含药血清对人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)细胞转分化过程中γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)表达的影响,探究该方抗肾间质纤维化机制。方法:将体外培养的HK-2细胞随机分为:正常对照组,缬沙坦含药血清组,AngⅡ刺激组,5%、10%、20%益肾化瘀方含药血清组,分别干预12、24、48 h。检测各组细胞IFN-γ、TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ的表达情况。结果:与正常对照组同期比较,AngⅡ刺激组IFN-γ表达量显著降低(P<0.05),TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ表达量显著升高(P<0.05);与AngⅡ刺激组同期比较,10%、20%益肾化瘀方含药血清组及缬沙坦组IFN-γ表达量显著升高(P<0.05),各治疗组IFN-γ表达量显著降低(P<0.05);其中20%益肾化瘀方含药血清组与缬沙坦含药血清组各指标表达量无显著性差异。结论:益肾化瘀方含药血清可通过上调IFN-γ及下调TGF-β1、Col-Ⅰ、Col-Ⅳ的表达保护肾脏。