肺炎克雷伯菌生物膜对消毒剂抵抗性研究

目的：研究肺炎克雷伯菌生物膜对常用消毒剂的抵抗性。方法：用高分子滤膜制备生物膜，观察不同时间条件下75％乙醇、安尔碘、1％“84”消毒液、6．7％新沽尔灭和2％戊二醛对生物膜中细菌杀灭作用。结果：2％戊二醛和安尔碘灭菌效果最好，75％乙醇次之，1％“84”消毒液和6．7％新清尔灭效果较差。结论：肺炎克雷伯菌生物膜对常用消毒剂抵抗性较强。     

医源性表皮葡萄球菌ica操纵子转录水平对生物膜表型的影响

目的探讨表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子转录水平对生物膜表型差异的影响。方法采用微量板半定量法检测细菌生物膜表型,用Southern杂交和聚合酶链反应检测icaA基因及ica操纵子中是否存在插入序列,用RNA狭缝杂交和逆转录实时定量聚合酶链反应检测icaA基因和icaR基因的转录水平;采用χ2检验分析icaA基因与生物膜表型的相关性,采用单因素方差检验分析转录水平的差异。结果101株临床分离株中,32.7%(33/101株)能形成生物膜,其中22株icaA基因阳性;67.3%(68/101株)无生物膜形成,其中15株icaA基因阳性。15株icaA /生物膜表型-分离株中,ica操纵子各基因中均不存在插入序列,icaA基因的转录水平明显低于生物膜阳性的ATCC35984株(P<0.05),其中2株icaR基因的转录水平高于ATCC35984株(P<0.01)。结论表皮葡萄球菌临床株中ica操纵子的存在与生物膜表型相关(χ2=19.045,P<0.01);ica操纵子的低转录是icaA /生物膜表型-临床株不形成生物膜的主要原因。     

复方百肤青抗大肠杆菌引起细菌性阴道病生物膜的研究

细菌性阴道病,又称非特异性阴道炎,是生育期妇女最常见的疾病之一,主要研究在临床已证实治疗细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)有显著疗效,以及实验研究中对细菌性阴道病有良好的抗菌作用 [1]的中药复方百肤青抗BV主要致病菌大肠杆菌生物膜的作用,目的是预防细菌性阴道病的复发,解决细菌性阴道病复发率高的问题.同时,为寻找抗菌生物膜新药开辟新途径.     

香芹酚对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌生物膜的体外抑制作用研究

目的：研究香芹酚对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）生物膜的体外抑制作用,及其与美罗培南和左氧氟沙星的联用效果。方法：采用肉汤稀释法检测亚胺培南和美罗培南对10株临床分离肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度（MIC）,微量肉汤稀释法测定香芹酚的MIC和最低杀菌浓度（MBC）;通过生长曲线法检测香芹酚对CRKP生长能力的影响;采用结晶紫染色法测定香芹酚对CRKP生物膜形成能力影响,微量肉汤稀释法测定最低抑制生物膜浓度（MBIC）和最低清除生物膜浓度（MBEC）;采用微量棋盘法测定联合抗生物被膜分数（FBICs）。结果：香芹酚对2株CRKP的MIC和MBC分别为156和313 μg·mL-1,香芹酚的MBIC和MBEC分别为313和1250 μg·mL-1,明显降低CRKP1的生长能力和生物膜形成能力,与美罗培南和左氧氟沙星的FBIC分别为0.31和0.37。结论：香芹酚可以抑制CRKP生长和生物膜的生成,与美罗培南和左氧氟沙星联合用药有协同抑制CRKP生物膜作用,为治疗CRKP感染提供新的思路。     

环二鸟苷酸在生物膜形成中作用的研究进展

耐药细菌的不断出现和传播严重威胁人类健康 [1].生物膜是导致耐药的一种重要机制,并且多数细菌感染与之相关.生物膜通过一系列不同的机制,使生物膜内的细菌对抗生素和消毒剂的抵抗能力显著高于浮游菌,如生物膜基质对抗生素的抗渗性、生物膜核心部位细菌的生长速率降低、存在耐受抗生素的持留菌和生物膜内细菌外排泵过表达,并引起持续感...     

刻意再植术治疗难治性根尖周炎的预后及相关因素分析

目的：评价刻意再植术治疗难治性根尖周炎的疗效以及影响再植预后的相关因素。方法：回顾分析2001年因难治性根尖周炎,临床建议拔除患者5例7个患牙,经即刻拔除再植术＋根管充填治疗5年后的临床资料。其中,5例患者均为45岁以上,年龄最大56岁,女性3例,5个患牙,3个磨牙,2个前磨牙;男性2例,前磨牙和磨牙各1个。上述患牙均在局麻下拔除术、牙齿离体后30min内完成根尖周变性组织湿法刮除术、根管充填术、牙体缺损即刻解剖性外形修复术,再植复位术。结果：术后5年复查,所有患牙均存留,牙龈附着正常,牙体活动度在Ⅰ度内,咀嚼功能良好,X光检查均达到牙周膜或骨性愈合。结论：根尖生物膜与难治性根尖周炎的发生密切相关,牙齿再植术能有效地清除病灶区的整个生物膜,彻底根治生物膜引起的难治性和慢性感染,为临床降低医源性牙齿缺失提供了一种新途径。     

黄连解毒汤联合氟康唑对耐药白念珠菌麦角甾醇的影响

目的:探讨黄连解毒汤乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Huanglian Jiedu decoction,EAHD)联合氟康唑(fluconazole,FLZ)对耐药白念珠菌生物膜麦角甾醇的影响。方法:采用CLSI M27-A3的微量稀释法测定EAHD与FLZ对白念珠菌FLZ耐药株的MIC与SMIC80;棋盘稀释法测定EAHD与FLZ联用对白念珠菌的协同效应;稀释涂布平板法考察EAHD与FLZ联用不同时间对菌体的杀伤作用;分别用HPLC和qRT-PCR法检测耐药白念珠菌生物膜麦角甾醇含量及相关基因的变化。结果:对于9株白念珠菌FLZ耐药株,EAHD对其MIC介于156~1 250 mg·L-1,FLZ对其MIC介于256~2 048 mg·L-1以上,二者联用后MIC显著降低,FICI(部分抑菌浓度指数)最低达0.066;EAHD单用对其SMIC80均高于1 250 mg·L-1,FLZ单用对其SMIC80均高于512 mg·L-1,最高可达2 048 mg·L-1以上,联用组除个别组具有相加作用外也均有协同效应。时间杀菌(time kill,TK)实验显示当作用12 h,二者联用杀菌效应最强。HPLC结果显示联用组、EAHD组与空白组麦角甾醇量相比,分别降低了近85%,50%。qRT-PCR检测FLZ组ERG1,ERG2,ERG6,ERG7,ERG11均上调,ACS1,ACS2,MET6均下调;EAHD组所有基因均下调;联用组ERG2,ERG6,ERG11均显著上调,ERG1,ERG7,ACS1,ACS2,MET6均显著下调。结论:EAHD协同FLZ抗白念珠菌耐药株,可能与抑制麦角甾醇合成相关基因的表达来降低麦角甾醇的合成有关,造成细胞膜损伤,抑制菌体生长。     

人参皂苷Rg1对大脑皮质神经细胞生物膜的影响

目的:研究人参皂苷Rg1对原代培养正常大鼠大脑皮质神经细胞生物膜的影响。方法:采用细胞培养技术,运用比色法、硫代巴比妥酸法、黄嘌呤氧化酶法(羟胺法)和微量酶标法测定人参皂苷Rg1对细胞内ACP活力、MDA含量、SOD活力及LDH释放量的影响。结果:1mg/ml、2 mg/ml及4 mg/ml人参皂苷Rg1作用30min可不同程度增加正常培养神经细胞的LDH释放量和细胞内SOD活力,降低细胞内ACP活力及MDA含量。结论:1mg/ml、2 mg/ml及4 mg/ml人参皂苷Rg1作用30min对正常培养大脑皮质神经细胞生物膜具有显著影响,其中对溶酶体膜有保护作用,对生物膜的脂质过氧化反应有抑制作用,能减轻自由基对生物膜的攻击及损伤,但对细胞膜可能有一定的损伤作用。     

D-甲硫氨酸通过降低环二鸟苷酸清除牙龈卟啉单胞菌生物膜

目的探讨D-甲硫氨酸(D-methionine,D-Met)通过调控环二鸟苷酸(cyclic diguanosine monophosphate,c-di-GMP)清除牙龈卟啉单胞菌生物膜的作用机制。方法通过细胞活性、最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)实验确定D-Met的有效浓度。分别在牙龈卟啉单胞菌生物膜形成抑制实验和成熟生物膜裂解实验中加入不同浓度的D-Met,检测生物膜生物量、胞外多糖量、生物膜形态、细胞膜完整性以及c-di-GMP的含量变化。结果 D-Met <40 mmol/L为生物安全浓度。在生物膜形成抑制和成熟生物膜裂解实验中,D-Met≥20 mmol/L降低了生物膜生物量和胞外多糖量。扫描电镜结果显示,D-Met≥20 mmol/L时,细胞外基质和细菌密度显著降低。透射电镜结果表明,35 mmol/L D-Met在生物膜形成过程中导致了细胞膜破裂,并增加了成熟生物膜裂解时细胞膜的通透性。Cdi-GMP水平随着D-Me...     

罗红霉素与乙酰螺旋霉素对眼部金黄色葡萄球菌生物膜的影响

目的:比较罗红霉素与乙酰螺旋霉素对眼部金黄色葡萄球菌生物膜的影响及与环丙沙星合用的抗菌协同作用。方法:用0.22μm微孔膜构建金黄色葡萄球菌生物膜模型;测定罗红霉素、乙酰螺旋霉素及环丙沙星的最低抑菌浓度(MIC)值;银染金黄色葡萄球菌生物膜,扫描电镜(SEM)观察生物膜形态结构,连续稀释法进行活菌计数。结果:生物膜(BF)可在7 d内稳定形成,1/16MIC、1/4MIC浓度罗红霉素显著减少单用环丙沙星组中的BF活菌数(P<0.05),乙酰螺旋霉素没有明显作用。结论:罗红霉素能显著提高环丙沙星对BF中金黄色葡萄球菌的抗菌活性。