酶标记鸡卵黄抗E.coli O157:H7抗体的制备与特性研究

目的：研究制备特异性抗E.coli O157：H7鸡卵黄免疫球蛋白（IgY）及酶标记抗体（IgY-HRP）的工艺条件。方法：分别用灭活菌体、脂多糖及O抗原多糖抗原免疫临产母鸡,水稀释法结合离子交换色谱分离提取IgY,再用过碘酸钠法和戊二醛法进行HRP标记,各种制品的分析用电泳及ELISA法。结果：可获得纯度为79．6％～85．3％的IgY,提取率74％～77％;过碘酸钠氧化法标记效果较好,IgY-HRP（1mg／ml）最高效价640。结论：免疫制备IgY方法可行,过碘酸钠法标记IgY-HRP取得良好效果。     

RASAL3通过上调FXYD6表达促进肝内胆管细胞癌细胞增殖的作用机制研究

目的探讨Ras蛋白激活类似物3(RASAL3)在肝内胆管癌(iCCA)中的表达并深入研究其促进iCCA进展的作用机制。方法收集185例iCCA患者肿瘤与癌旁组织标本, 应用免疫组化、RT-qPCR和Western blot法检测RASAL3的表达, 并同时检测人胆管癌细胞株和人胆管上皮细胞中RASAL3和FXYD6的mRNA和蛋白表达情况, CCK-8法检测细胞增殖及Na+-K+-ATP酶活性。结果 RASAL3在胆管癌组织和细胞株中高表达;生存分析结果显示RASAL3高表达与胆管癌的不良预后相关(P<0.05)。敲降RASAL3抑制胆管癌细胞的增殖;沉默RASAL3降低FXYD6表达水平, 抑制Na+-K+-ATP酶活性。结论 iCCA中RASAL3表达水平显著上调, RASAL3可通过激活FXYD6, 上调Na+-K+-ATP酶活性促进iCCA的发展。     

高迁移率族蛋白B1抑制剂对白蛋白结合型紫杉醇致神经病理性疼痛的抑制作用及其机制

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)抑制剂Glycyrrhizin(Gly)对白蛋白结合型紫杉醇导致的神经病理性疼痛的抑制作用及其机制。方法 雄性SD大鼠共54只,分为对照组、紫杉醇组、紫杉醇+Gly组,每组18只。紫杉醇组大鼠实验第1,3,5,7天腹腔注射白蛋白结合型紫杉醇(2.47 mg/kg)建立神经病理性疼痛模型,紫杉醇+Gly组在注射白蛋白结合型紫杉醇(2.47 mg/kg)后,第1～7天每日腹腔注射Glycyrrhizin(50 mg/kg),两种药物间隔30 min。对照组给予等剂量生理盐水。实验第4,8天检测大鼠的机械刺激缩足反射阈值(MWT)和热刺激缩足反射潜伏期(TWL)。所有大鼠实验第8天处死,取L_4-6脊髓,免疫组化染色检测HMGB1、细胞骨架蛋白[神经微丝蛋白轻链(NF-L)、神经微丝蛋白中链(NF-M)]、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及离子钙接头蛋白抗体(Iba-1)的表达变化,Western blot检测Toll样受体4(TLR4)及核因子κB(NF-κB)的表达变化,ELISA检测TNF-α、IL-1β和IL-6的水平。结果 ...     

基于APACHE Ⅱ评分的老年重症病人能量代谢预测公式

目的：分析老年重症病人能量代谢同APACHE II评分间的联系,并计算与APACHE II评分相关的HB法应激系数,以减少HB法的误差。方法：观察对象为南华大学附属第二医院重症医学科2020年1月至2021年7月期间诊治的102名老年重症病人。比较HB法、IC法在对病人入住重症医学科后第一个24 h静息能量消耗数值方面的不同,以IC法为“金标准”,得出24 h每千克体质量的能量消耗;以APACHE II评分为依据,划分出不同危重程度的组别,并就两组24 h能量代谢与24 h每千克体质量能量消耗展开对比,经由Bland-Altman对HB法和IC法的一致性展开分析,经由t检验实施组间对比,经由Pearson分析关联性,借助线性回归对回归方程展开求解。结果：采取IC法与HB法测量的老年重症病人24 h静息能量代谢结果显示,偏倚均值是(454.6±253.0)kcal/d,可见偏倚明显。老年重症病人APACHEII≥20分组24 h能量代谢、24 h每千克体质量能量代谢较APACHEII <20分组显著增高（P<0.05）。APACHE II评分同应激系数存在正线性相关;经由一元...     

HERG蛋白在胆囊结石患者胆囊组织Cajal间质细胞中的表达及意义

目的探讨胆囊结石患者胆囊组织Cajal间质细胞中人类果蝇相关基因(HERG)蛋白的表达及意义。方法收集解放军总医院肝胆胰外科医学部2018年1月至2020年12月行胆囊切除术的60例胆囊病变患者的胆囊组织, 其中男性36例, 女性24例, 年龄(46.0±14.0)岁。按是否存在胆囊结石分为胆囊结石组和对照组(胆囊息肉、胆囊腺肌症患者), 每组各30例。彩超检测并计算胆囊收缩率。分别切除胆囊颈、体、底部组织做切片, 免疫荧光、免疫组化及Western印迹检测HERG蛋白和CD117(Cajal间质细胞标志物)的表达。结果胆囊结石组胆囊收缩率为(65.8±4.1)%, 低于对照组(73.8±5.3)%, 差异有统计学意义(t=4.14, P<0.001)。免疫组化显示HERG蛋白主要分布在胆囊组织的黏膜层, 呈棕黄色。Western检测胆囊结石组胆囊底部的HERG蛋白相对表达为(0.293±0.102), 低于对照组(0.694±0.059), 差异有统计学意义(t=3.38, P=0.027)。免疫荧光染色显示HERG蛋白主要分布于胆囊上皮Cajal间质细胞中。胆囊结石组胆囊底部...     

重组人P53融合蛋白抗肝癌细胞的实验研究

研究蛋白传导域(PTD)与人野生型P53(WtP53)融合表达的P53融合蛋白PTD-P53对HepG2的增殖抑制和凋亡的影响.用PTD-P53处理HepG2后,采用MTT法分析处理后细胞的生长增殖情况,流式细胞术(FCM)分析处理后细胞周期变化及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡情况.PTD-P53对:HepG2的生长有明显抑制作用.细胞周期也出现阻滞现象,细胞凋亡明显增加.PTD-P53有一定的抗肝癌细胞作用.     

血清YKL-40、DKK1水平预测原发性肝癌患者TACE治疗预后研究

目的：探讨血清甲壳质酶蛋白40(YKL-40)、分泌型蛋白Dickkopf-1(DKK1)水平预测原发性肝癌患者经导管动脉化疗栓塞术(TACE)治疗预后的价值。方法：采用前瞻性随机试验方法,选择2017-05～2020-04于我院接受收治TACE治疗的80例原发性肝癌患者作为研究对象,术后随访6个月,根据患者疾病复发及肿瘤肝内转移情况将其分为预后不良与预后良好组,比较两组血清YKL-40、DKK1水平,分析血清YKL-40、DKK1水平预测原发性肝癌患者TACE治疗预后的价值。结果：术后6个月,80例患者中预后不良23例,占28.75%,预后良好57例,占71.25%;预后不良组血清YKL-40、DKK1水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);绘制ROC曲线结果显示,血清YKL-40、DKK1单独及联合预测原发性肝癌患者TACE治疗预后不良的AUC分别为0.847、0.850、0.863,具有一定预测价值。结论：血清YKL-40、DKK1在原发性肝癌TACE治疗后预后不良患者体内呈高表达,临床可通过检测血清YKL-40、DKK1水平对原发性肝癌患者TACE治疗预后情...     

多囊卵巢综合征患者血清FGF-21、MCP-1、AngⅡ表达与胰岛素抵抗的关系

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清成纤维细胞生长因子21(FGF-21)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平变化及其与胰岛素抵抗的关系。方法回顾性选取2018年3月至2020年3月湖北江汉油田总医院收治的90例PCOS患者为PCOS组, 根据是否发生胰岛素抵抗(IR)分为IR组(53例)和NIR组(37例), 另外选取同期80例健康女性为对照组。检测各组患者血清FGF-21、MCP-1、AngⅡ水平, 分析三项指标表达与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的关系。结果 PCOS组患者血清FGF-21、MCP-1、AngⅡ水平明显高于对照组(均P<0.05)。Logistic回归分析显示, FGF-21、MCP-1、AngⅡ及HOMA-IR为发生PCOS的危险因素(P<0.05)。PCOS患者中IR组血清FGF-21、MCP-1、AngⅡ水平显著高于NIR组, 差异有统计学意义(均P<0.05)。PCOS患者血清FGF-21、MCP-1、AngⅡ水平与HOMA-IR呈正相关(均P<0.01)。结论 PCOS患者血清FGF-21、M...