异生胞核核糖核蛋白A2／B1（hnRNP A2／B1）基因克隆及其在滑膜组织中的表达

目的：获得hnRNPA2／B1 cDNA序列,研究其在滑膜组织中的表达水平,探讨它在类风湿滑膜炎中可能的致病作用。方法：从人中血单个核细胞中提取总RNA进行逆转录反应,经PCR扩增目的片段,将其克隆于PUC－T1质粒上,并经酶切电泳、DNA测序鉴定分析。采用免疫组化和原位杂交方法,分别利用单克隆抗体和特异的cDNA探针,检测滑膜组织中hnRNPA2／B1的含量及表达水平。结果：从人外周血单个核细胞总RNA中扩增得到目的片段,并经测序证实该片段为hnRNPA2／B1的编码序列。免疫组化和原位杂交显示hnRNPA2/B1在类风湿关节炎（RA）滑膜中的表达水平整体上较骨关节炎（OA）和正常对照滑膜组高（P＜0．05）。结论：成功克隆hnRNPA2/B1 cDNA;初步证明hnRNPA2/B1水平在RA关节局部增高,推测它可能参与了类风湿滑膜炎的发病。     

滑膜骨软骨瘤病临床及影像学诊断

目的:探讨滑膜骨软骨瘤病的临床与X线特点,提高对本病的诊断水平。方法:对经病理及临床确诊的20例滑膜骨软骨瘤病的临床资料及X线表现进行回顾性分析。结果:本组20例,病变发生在膝关节13例,其中2例两侧对称性发病,髋关节4例,踝关节、肘关节及肩关节各1例,18例为单侧单关节发病。X线表现为关节不同程度退行性变12例,全部病例均在关节周围有大小不一、数目不等的圆形、卵圆形或桑椹状不规则的密度增高的钙化或骨化影。结论:滑膜骨软骨瘤病的X线表现具有一定的特征性,结合临床表现有较高的诊断价值。     

胶原性关节炎大鼠滑膜组织β-arrestin 1和β-arrestin 2的表达

目的探讨胶原性关节炎(C IA)大鼠滑膜组织β-ar-restin 1和β-arrestin 2的表达及其意义。方法采用W estern blot法检测大鼠在第0、14、21、28、35天不同时间点滑膜组织β-arrestin 1和β-arrestin 2的表达。结果第0、14、21、28、35天β-arrestin 1表达差异无显著性;与0 d未致炎组相比,β-arrestin 2表达从14 d开始上调,在28 d达最大值,差异有显著性(P<0.01)。结论C IA大鼠滑膜组织β-arres-tin 2表达上调。     

S100A4,A10在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中的表达及意义

目的:探讨正常人与类风湿关节炎(RA)患者滑膜成纤维细胞蛋白质组表达差异,分析差异蛋白在RA发病中的作用.方法:应用固相pH梯度(IPC)双向凝胶电泳(2-DE)分离正常人及RA患者滑膜成纤维细胞总蛋白质;应用双向电泳凝胶分析软件(PDQuest 7.3.1)对2-DE凝胶进行量化比较分析;应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定部分差异蛋白质,并用Westem Blot、免疫细胞化学技术验证表达差异蛋白质.结果:正常人及RA患者滑膜成纤维细胞蛋白2-DE凝胶图谱上分别平均显示896和992个点.有64个蛋白质点表达存在2倍以上的差异.选取9个在RA滑膜成纤维细胞中表达上调的蛋白质点进行质谱鉴定,成功鉴定出钙结合蛋白S100A4和S100A10两个蛋白质.经Western Blot、免疫细胞化学技术验证这两个蛋白在RA滑膜成纤维细胞中表达上调,与上述结果一致,并且发现S100A4在RA滑膜成纤维细胞中的表达分布发生了变化.结论:结合蛋白S100A4和S100A10可能参与RA的发病.S100A4在细胞中的表达易位可能与RA滑膜成纤维细胞表型改变有关.     

高频超声评估膝关节镜滑膜病变切除术后的价值

目的 评估高频超声对膝关节镜滑膜病变及滑膜切除术后的价值。方法 选取我院2017年1月～2018年2月收治的类风湿关节炎（RA）患者（以单侧膝关节病变为主）作为研究对象,均行高频超声及MRI检查,分析MRI及超声检查结果,探讨滑膜厚度与病情及预后的关系。结果 术前高频超声与MRI对RA患者软骨病变分期结果比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗前及治疗后6、14个月,超声与MRI对于滑膜厚度的测量比较无统计学意义（P＞0.05）;而在治疗后1、3个月,超声检测结果低于MRI测值（P＜0.05）。治疗后患者ESR、CRP、CCP水平,VAS评分及RF阳性率均低于治疗前（均P＜0.05）;治疗后Lysholm 膝关节功能评分明显优于治疗前（P＜0.05）。高频超声测量滑膜厚度变化与ESR、RF阳性率及CCP呈正相关（P＜0.05）;高频超声测量滑膜厚度变化与Lysholm 膝关节功能评分呈负相关（P＜0.05）;高频超声测量滑膜厚度变化与CRP、VAS评分无明显相关性（P＞0.05）。治疗后6个月,滑膜厚度低的患者ESR、CCP、VAS评分较低,Lysholm 膝关节功能评分较高（P＜0.05）。结论 高频彩色多普勒超声对类风湿关节炎膝关节病变具有姣好的诊断价值,同时对评估预后具有重要意义,可应用于临床。     

三氧化二砷对高迁移率族蛋白诱导的大鼠滑膜细胞增殖的抑制作用

目的： 探讨三氧化二砷（AS₂O₃）对高迁移率族蛋白1（HMGB1）诱导的大鼠滑膜细胞(RSC-364细胞)增殖的抑制作用及其机制。 方法： 将常规培养的RSC-364细胞分为正常对照组、HMGB1组及HMGB1加0、5、10、20、40和80 μmol•L^-1 AS₂O₃实验组; MTT法检测不同浓度AS₂O₃对RSC-364细胞生长的影响,RT-PCR检测STAT1 mRNA的表达变化,免疫细胞化学和流式细胞术检测STAT1、cyclin D1和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达的变化。结果：① MTT结果显示,AS₂O₃可抑制HMGB1诱导的RSC-364细胞的增殖,80　μmol•L^-1 AS₂O₃作用24　h抑制率可达88.18%,其抑制作用呈时间和浓度依赖性（P<0.05或P<0.01）;② 与对照组比较,HMGB1组STAT1 mRNA及STAT1、PCNA 、cyclin D1蛋白表达量增强,AS₂O₃组STAT1 mRNA及STAT1、PCNA、cyclin D1蛋白降低,并呈剂量依赖性(P<0.01）;③ STAT1与cyclin D1蛋白表达呈正相关关系（r=0.842,P=0.001）。结论：AS₂O₃能够抑制HMGB1诱导的滑膜细胞的增殖,其机制可能与抑制STAT1的活性从而下调细胞周期调节蛋白cyclin D1的表达有关。     

犬急性膝关节炎炎症期滑膜组织μ-阿片受体的表达

目的:观察犬急性膝关节炎炎症期滑膜组织μ-阿片受体(mu-opioid receptors,MOR)表达的变化,探讨急性炎症外周局部应用阿片类药物镇痛的可行性.方法:17只Beagle犬随机分为正常对照组(n=8)和急性感染性炎症组(n=9),取各组犬膝关节滑膜组织,采用免疫组织化学及real-time PCR方法检测滑膜组织M0R蛋白及mRNA的表达.结果:急性感染性炎症组犬膝关节滑膜组织MOR mRNA相对表达量明显高于正常对照组[(34.40±5.48)% vs(16.54±8.03)%],差异具有统计学意义(P＜0.05).免疫组化染色见炎症滑膜组织M0R染色阳性产物较正常对照颗粒增粗、着色加深、染色带增宽、数量增多;与正常滑膜组织相比,急性感染性炎症组滑膜组织MOR阳性细胞免疫组化指数显著增高[(323 175.00±92 614.94)vs(175 444.10±75 149.06)],差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:犬膝关节滑膜组织中存在MOR,且在急性感染性炎症早期其表达显著增强.     

用差示PCR法筛选类风湿性关节炎滑膜细胞中的高表达基因

目的 筛选类风湿性关节炎（RA）滑膜细胞中的高表达基因,以探讨RA滑膜细胞发生肿瘤样增殖和侵蚀软骨的分子机理。方法 以骨性关节炎（osteoarthritis,OA)滑膜细胞作对照,采用差示PCR（differentially display PCR)方法,克隆RA滑膜细胞中高表达的cDNAs片段,经反向点杂交排除假阳性克隆后,将阳性克隆进行基因序列分析,结果共回收76仆差异条带,得到42个有插段的克隆,经反向点杂交后得到22个阳性克隆,对其中19个克隆进行基因序列分析表明,最长片段为501bp长,最短片段为145bp长,大部分在300bp,有13个克隆为已知基因,其中包括组织蛋白酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外都为基因的非编码区,结论 差示PCR方法在筛选差异表达基因方面存在着很大的局限性,组织蛋白酶B可能与RA滑膜细胞的软骨侵蚀性有关。     

滑膜细胞中蛋白酪氨酸激酶的克隆和鉴定

0　引言　在类风湿性关节炎 (Rheumatoid Arthritis,RA)中 ,关节内滑膜细胞 (Fibroblast- like synovial cells,FL S)的过度增生是造成关节软骨破坏和关节畸形的根本原因 ,所以研究滑膜细胞发生过度增殖的机理及找到控制其增殖的关键环节对于阻止 RA病人发生关节功能障碍具有重要意义 .目前关于滑膜细胞发生恶性增殖的机理尚不清楚 .蛋白酪氨酸激酶 (Protein tyrosine kinases,PTKs)是一大类介导细胞增殖分化和凋亡的细胞内信号分子 ,它们的活化将直接或间接导致细胞发生增殖或凋亡行为 .William s等研究发现 ,在 RA滑膜组织中蛋白酪…     

等离子关节镜手术系统治疗膝关节内滑膜血管瘤

目的 探讨等离子关节镜手术系统治疗膝关节内滑膜血管瘤的优越性.方法 回顾1990年至今的11例经病理确诊的膝关节内滑膜血管瘤病例,观察并对比采用等离子关节镜手术系统和传统关节镜手术系统治疗膝关节内滑膜血管瘤的疗效.结果 随访11例,平均39个月,其中传统关节镜手术5例,等离子关节镜手术8例(包括2例复发后再次手术者),术后症状、体征均明显改善或完全消失.结论 等离子关节镜手术系统克服了传统关节镜手术的难点,是治疗膝关节内滑膜血管瘤的理想手术方法 .