浅谈从石蜡包埋组织中提取DNA的方法及体会

用于聚合酶链式反应(PCR)扩增的从石蜡包埋组织中提取DNA的方法在理论上非常简单,但在实际操作中并非如此.必须先溶解组织切片中的石蜡,然后处理组织释放DNA.在实验过程中每一步骤都必须严格要求,否则提取的DNA就不理想,影响下一步实验.本文就从石蜡包埋组织中提取 DNA 的方法谈一些体会.     

应用不同免疫组化抗原修复技术的体会

免疫组化成败的关键因素之一是抗原决定簇是否充分暴露,经甲醛固定的组织常引起蛋白质空间结构的改变而导致抗原决定簇的封闭,抗原修复技术在石蜡切片免疫组织化学染色中是一种简单有效的增强方法,但无论是高压热修复还是微波热修复均会出现不同程度的脱片现象,给技术人员带来烦恼,并加大了工作量.     

改良石蜡包埋组织DNA抽提的方法

DNA抽提是分子生物学研究的基础工作,但从石蜡包埋组织中提取基因组DNA有一定的难度,传统的二甲苯脱蜡及苯酚氯仿抽提DNA,其弊端是过程长得到的DNA量较少.     

贮血式自身输血液状保存及冰冻保存的实用性及其限界

贮血式自身输血液状保存及冰冻保存的实用性及其限界汤浅晋治目前，一种最安全的输血疗法—自身输血已经开展，日本厚生省第２次通报了输血后ＧＶＨＤ的紧急安全措施，其中也劝告在外科手术病例尽量采用自身输血。一、贮血式自身输血的适应病例贮血式自身输血的对象有以下...     

一种内窥镜小活检组织的快速石蜡包埋方法

一种内窥镜小活检组织的快速石蜡包埋方法哈尔滨市第一医院病理科李秋霞韩丽姝保健科张鑫组胚教研室张萱宋铁军随着医学的发展，送检的标本越来越小，除手术切除的标本外，大量是各种内窥镜、粗针穿刺和细针吸取的活检组织，大活检标本的快速诊断可以依靠冰冻切片机来解决...     

自体瘤苗预防膀胱癌术后复发的近期效果观察

研究石蜡包埋癌组织制备的自体瘤苗预防膀胱癌术后复发的近期效果。ＰＥＴＶ１．０ｍｌ多点皮内注射，每周１次，４次为一疗程，每疗程前后测定ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＋４，ＣＤ＾＋８，ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８，ＬＴＴ，ＮＫ和ＩｇＡ，ＩｇＧ，ＩｇＭ。１６例患者治疗后ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＋４，ＣＤ＾＋４／ＣＤ＾＋８，ＬＴＴ，ＮＫ和ＩｇＧ比治疗前明显增高。     

正丁醇在组织制备中的应用

正丁醇在组织制备中的应用（３１１８００）浙江省诸暨市人民医院丁伟星我科自１９８５年始采用正丁醇代替强脱水剂和透明剂，效果很好。现介绍如下：１材料和方法１．１材料：１０％甲醛（Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）之固定标本６万余例；乙醇（Ｅｔｈｙ...     

石蜡包埋软组织肉瘤中融合基因表达的检测及其诊断学价值

目的 探讨检测软组织肉瘤组织中特异性染色体易位融合基因表达的诊断学意义。方法运用一步法RT-PCR技术检测105例石蜡包埋软组织肉瘤,包括30例滑膜肉瘤、15例横纹肌肉瘤(RMS)、25例尤因肉瘤／外周原始神经外胚层瘤(Es／pPNET)、12例隆突性皮肤纤维肉瘤(DFSP)、14例腺泡状软组织肉瘤(ASPS)、3例平滑肌肉瘤(LMS)、2例恶性纤维组织细胞瘤(MFH)、2例纤维肉瘤和20例对照组肿瘤组织中特异性染色体易位融合基因SSX1／SSX2-SYT、PAX3／PAX7-FKHR、EWS-Ful、COL1A1-PDGFB、ASPL-TFE3的表达。结果30例滑膜肉瘤中,28例(93．3％)检出SYT-SSX融合基因的表达,其中14例表达SYT-SSX1,9例表达SYT-SSX2;6例腺泡型RMS4例表达PAX3／PAX7-FKHR,其余9例胚胎型和多形性RMS均无PAX-FKHR表达;80%,(20／25)的ES／pPNET中表达EWS-FLII或EWS-ERG;12例DFSP中8例(67％)检出COLIA1-PDGFB融合基因的表达,14例ASPS中10例(71％)检出融合基因ASPL-TFE3的表达。3例LMS、2例MFH、2例纤维肉瘤和对照组20例肿瘤组织中均未检出上述易位融合基因的表达。结论软组织肉瘤特异性染色体易位融合基因的表达是其分子诊断的可靠指标,一步法RT-PCR技术检测染色体易位融合基因为临床软组织肉瘤疑难病例的诊断和研究提供了有效技术手段。     

光波-微波快速石蜡切片技术在肺穿刺活检中的应用

目的探讨光波-微波辐射技术在肺穿刺活检组织制片和染色中的作用。方法选择肺穿刺组织55例,组织固定、脱水、透明、浸蜡和苏木素染色在光波-微波炉中,用光波-微波组合Ⅱ进行处理,同时以全自动组织脱水机中处理作为对照。结果光波-微波组合Ⅱ组织处理组所用时间24.5min,全自动组织脱水机中处理组所用时间750min;光波-微波快速石蜡切片方法所制出的切片组织完整,细胞结构清晰、细胞核与细胞浆对比染色好,切片质量较同期全自动组织脱水机常规处理的好。结论光波-微波辐射石蜡切片所用的时间明显缩短,对肺穿刺标本良恶性疾病的临床病理诊断是准确、可靠的,是一种快速、方便的实用技术,有推广价值。