液氮冷冻建立犬股骨头缺血坏死模型的实验研究

[目的]为股骨头缺血性坏死的治疗研究建立动物模型.[方法]建立犬双侧股骨头骨缺血模型,并用液氮从缺损内将股骨头冷冻坏死,术后定期拍X线片,并取股骨头行组织切片了解股骨头坏死及修复情况.[结果]术后3d组织切片见股骨头坏死,术后3、6周见股骨头骨坏死和骨修复同时存在,术后12周X线片及大体标本观察见股骨头骨缺损仍然明显.[结论]液氮冷冻建立的犬股骨头缺血坏死可作为模拟临床手术刮除死骨、植骨治疗研究的动物模型.     

细胞松弛素B和解冻方法对玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响

【目的】探讨细胞松弛素B和解冻程序对玻璃微细管法（GMP）玻璃化冷冻小鼠卵母细胞的影响。【方法】以小鼠MII期卵母细胞为模型，研究冷冻前细胞松弛素B预处理、不同解冻程序对小鼠卵母细胞冷冻效果的影响；随后对经GMP玻璃化冷冻的卵母细胞直接进行培养以检测冷冻是否诱发孤雌发育。【结果】与对照组相比．细胞松弛素B预处理的卵母细胞存活率、受精率、卵裂率及囊胚率没有显著差异（89．3％vs91．3％．44．0％vs40．4％，30．0％vs27．7％，4．0％vs6．4％；P〉0．05）；采用连续浓度梯度递减解冻法的受精率明显高于间断浓度梯度递减解冻法（57．4％vs40．4％；P〈0．05），且前者的卵裂率和囊胚发育率也相对较高f40，2％vs27，7％，14．5％vs6．4％；P〉0．05）。冷冻复苏后卵母细胞的孤雌发育率稍高于未经冷冻的卵母细胞（17．1％vs3．2％；P〉0．05）。【结论】细胞松弛素B预处理对MII期小鼠卵母细胞的GMP玻璃化冷冻保存效果没有影响：采用连续浓度梯度递减解冻法能明显提高复苏后卵母细胞的体外发育能力。     

1891例宫颈糜烂冷冻治疗的临床探讨

目的探讨冷冻治疗宫颈糜烂的方法和措施。旨在为临床医学提供理论依据。方法经常规妇科检查、宫颈脱落细胞学检查、阴道镜检查诊断为宫颈糜烂的门诊患者，应用液氮冷冻治疗。结果冷冻方法治疗宫颈糜烂简便易行，安全可靠，有效率高（有效率98．77％）。结论该治疗方法经济实用，副作用小，患者易接受，对基层医院具有极大的推广价值。     

冷冻消融治疗对肺腺癌细胞凋亡的影响

目的 探究冷冻消融治疗对肺腺癌细胞凋亡的影响。方法 根据冷冻消融术后肿瘤组织局部变化,在细胞水平上建立肺癌冷冻消融模型。传代培养人肺癌H1299细胞株,将细胞分为4组：A组,未处理细胞,为对照组;B组,未处理细胞培养液中加入坏死液(将细胞悬液放入液氮罐中冷冻5 min, 37℃复温后离心取上清液,得到坏死液);C组,亚致死细胞(细胞在-80℃环境中冷冻7 min,模拟亚致死状态);D组,亚致死细胞培养液中加入坏死液。24 h后用流式细胞术检查冷冻消融对肺癌细胞凋亡的影响,qRT-PCR和Western blot检测冷冻消融对凋亡相关分子B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)及Bcl-2相关x蛋白(Bax)表达的影响。采用Lewis肺腺癌细胞株建立C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,造模成功的小鼠随机分成2组,假手术组和冷冻消融组,每组4只,氩氦刀冷冻14 d后,取肿瘤组织,通过qRT-PCR和Western blot检测冷冻消融对凋亡相关分子Bax及Bcl-2表达的影响。结果 细胞冷冻模型中与对照组A组相比,B、C、D组均能促进细胞凋亡(P<0.05),且D组细胞凋亡率最高,高于其他组...     

心房颤动左心耳封堵联合冷冻消融术后器械相关血栓发生及预后研究

目的 探讨非瓣膜性心房颤动(房颤)缺血性脑卒中高危患者左心耳封堵(1eft atrial appendage closure, LAAC)联合二代球囊冷冻消融术发生封堵器械相关血栓(device-related thrombus, DRT)的病例特点及药物调整后疗效.方法 2018年1月—2019年6月期间上海健康医学...     

液氮冷冻治疗颜面基底细胞癌115例分析

基底细胞癌又称基底细胞上皮瘤 ,多见于颜面部。目前常用的治疗方法有手术切除、放射照射、激光和冷冻等疗法[1～ 3] 。我科从 1989年开始采用冷冻治疗该病患者 115例 ,效果满意 ,报告如下。1　临床资料1.1　一般资料　本组 115例 ,其中男 6 9例 ,女 46例 ,年龄 40～ 89岁 ,平均 6 1.5岁。病程 6个月至 5年。 115例术前均经病理切片检查证实为结节溃疡型皮肤基底细胞癌 ,肿瘤大小为 0 .5ｃｍ× 1.0ｃｍ～ 2 .0ｃｍ× 2 .0ｃｍ。全部位于颜面部 ,其中颞部 38例、颊部 2 5例、部 2 3例、下眼睑皮肤 2 0例、鼻唇沟 6例及鼻翼 3例。1.2　治疗方…     

速冻玻璃化储存异体皮的临床应用

目的：分析和总结自1987年以来速冻玻璃化储皮临床应用情况。方法：搜集我科1987年至1999年使用速冻玻璃化储存的异体皮救治烧伤患者临床资料以及我科皮库储存异体皮国内使用情况,总结和分析速冻玻璃化储存异体皮的临床应用效果和异体皮的使用情况。结果：使用速冻玻璃化异体皮的烧伤患者平均烧伤面积为55.4%,其中平均Ⅲ度面积为30.9%,应用异体皮面积为3466～10208cm^2。采用速冻玻璃化保存的皮肤复温后其活力可达到新鲜皮肤的70%左右,该法保存的皮肤质地柔软、转红快、成活率高,存活期长,最长可在患者创面上成活2个月左右。术后异体皮成活率为95%。从1987年至1999年底我科皮库供全国各地18个省和3个自治区的48个市,8个县的108家各级医院冷冻异体皮使用,包括我科自用用,共使用皮肤面积达3604260cm^2。结论：采用速冻玻璃化储存的异体皮覆盖创面,仍是目前最有效、最方便、经济实惠的方法,使用异体皮进行烧伤的救治已经成为国内大多数医院普遍使用的一项救治措施。     

氩氦刀对T739小鼠LA795皮下移植瘤坏死及细胞凋亡的影响

目的:研究氩氦刀冷冻消融对T739小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤坏死和细胞凋亡的影响. 评价氩氦刀冷冻治疗非小细胞肺癌的可行性及疗效. 方法:建立T739小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤动物模型. 氩氦刀冷冻后,光学显微镜观察冷冻坏死消融规律;末端标记法(TUNEL)原位检测周边冷冻损伤区带细胞凋亡,免疫组织化学法检查Bc1-2和Bax表达;Western Blot检测冰球周边冷冻损伤区Caspase-3表达及聚腺苷二磷酸核苷聚合酶(PARP)剪切活性. 结果:在冷冻中心区,细胞死亡以坏死为主,坏死呈现"双峰"效应:氩氦刀术后3 h出现第1次坏死高峰,坏死区域面积/肿瘤面积达(47±5.51)%;术后4 d出现第2次坏死峰,坏死区域面积/肿瘤面积达(68±4.69)%. 在周边冷冻损伤区,光镜形态学检查及TUNEL染色可观察到明确的细胞凋亡,术后8～16 h凋亡达高峰,凋亡率为(71±6.41)%. 免疫组化显示,Bcl-2蛋白表达在冷冻前后无明显变化,bax蛋白在冷冻后其表达上调. Western Blot结果显示:冷冻后冰球周边损伤区带Caspase-3和PARP剪切、激活. 结论:氩氦刀通过坏死和凋亡两种途径达到有效的消融. 冷冻消融可能通过Caspase途径诱导周边损伤区带细胞凋亡. 其凋亡机制有Bax蛋白参与,而与Bcl-2无关.     

儿童尿道口附近尖锐湿疣2例

近年来尖锐湿疣的发病率逐年增高,虽然成年人较为多见,但婴幼儿发病率也有明显增高趋势,作者将近一年来在门诊就医的儿童尿道口附近尖锐湿疣2例报道如下。1临床资料病例1,男性儿童,4岁,尿道口附近米粒大淡粉色疣状增生2个月,曾在当地医院诊断过尖锐湿疣,给予二氧化碳激光及棉签冷冻治疗2次,每次治疗20余天后即复发,后来本院。儿童营养及发育状况无异常,尿道口左侧米粒大不规则增生疣状物,颜色为淡粉色,质地柔软,疣体基底部周边有创伤痕迹。儿童生活在离异家庭,平时与母亲一起居住,母亲否认有尖锐湿疣病史。病例2,女性儿童,5岁半,大阴唇外侧、尿道口及阴蒂间小米粒到小甲大多发性淡红色乳头状增生(图1)。1周前母亲给小孩洗澡时发现外阴出血,来本院就诊。此女童父母感情不和分居,平时与外祖母居住时间较多,大人否认患尖锐湿疣病史。治疗:作者采用的治疗主要用液氮枪(选择孔径为C的喷头)向皮损部位喷射液氮即冷冻喷法治疗,以下称喷冻法。经C喷头喷出的液氮束较为集中在疣体上,以免液氮散射在正常黏膜上。在治疗前与儿童语言沟通安抚儿童争取其配合。治疗中家长陪同,嘱病人仰卧位于手术床上,暴露皮损处,不给予麻醉,液氮枪喷口距皮损处1~2 cm左右,喷冻...