Melanophore Indexing：A New Bio—assay Technique for the Analysis of Acute Heavy Metal（HgCl2）Toxicity

Toxicity of 0.4 pm (96h LC50value)and 0.03 ppm of mercuric chloride on the melanophores of the skin at different time intervals has been studied.Mercury treatment causes immediate increase in the number and size of the pigment cells.Subsequently these pigment cells form a dense matting of melanophore network with their cell processes interlacing with those of their neighbours.These cells later show degeneration and lysis releasing large quantity of pigment granules into the intercellulr spaces in the dermis.Later the pigment cells regenerate several times each followed by degeneration in a cyclic manner.Prolonged treatment with subletha concentration of mercuric chloride does not show significant alteration in the melanophore density and size.Statistical analysis and wide spread destruction of melanophores observed during 4-6 days of exposure might help in testing water samples contaminated with lethal concentration of heavy metal salts.     

氯化汞致vero细胞DNA损伤及锌和硒拮抗作用的研究

目的研究低剂量氯化汞在短时间内染毒致肾脏vero细胞DNA损伤的作用。方法常规培养vero细胞，通过MTT法制定出氯化汞染毒剂量，与氯化汞同时加入不同浓度的硫酸锌、亚硒酸钠以及硫酸锌＋亚硒酸钠溶液，共同培养2h后采用单细胞凝胶电泳法检测细胞的彗星尾长和彗星率。结果硫酸锌和亚硒酸钠，以及两者合用都具有拮抗氯化汞致vero细胞DNA损伤的作用，两者最佳组合是1．5mg／L硫酸锌＋1．0μmol／L亚硒酸钠。结论低剂量氯化汞短期内染毒可致肾脏vero细胞DNA损伤，硫酸锌和亚硒酸钠在体外可以有效拮抗该作用，两者共同作用效果更明显。这对进一步探索氯化汞肾脏毒性机制和防护具有一定的意义。     

氯化汞诱导大白兔双相自身免疫性肾小球肾炎

本实验采用日本纯种大耳白免、给予小剂量氯化汞反复肌肉注射,成功地制成双相自身免疫性肾小球肾炎模型,即免疫荧光可见IgG沿肾小球基膜(GBM)呈线样和颗粒状沉积两时相。病理改变为类狼疮性肾炎及膜性肾病二种组织学改变。该模型为进一步研究人类慢性汞中毒所致的自身免疫性肾损伤有重要的现实意义。     

氯化汞中毒对大鼠肾小管上皮细胞 氯化汞中毒对大鼠肾小管上皮细胞碳酸酐酶活性的影响

目的研究氯化汞对肾小管上皮细胞碳酸酐酶活性的影响,探讨组织细胞化学方法在研究汞中毒的价值.方法用改良的Hansson法通过电镜观察碳酸酐酶反应颗粒的改变。结果汞中毒引起肾小管上皮细胞超微结构变化及定位于近曲小管刷状缘质膜、内吞泡膜、线粒体被膜和远曲小管上皮细胞线粒体被膜上碳酸酐酶活性下降.结论汞中毒明显抑制肾小管上皮细胞碳酸酐酶活性,细胞组织化学方法为研究汞中毒提供了可行的研究方法.     

含砷、汞类矿物中药对小鼠肝/肠Cyp3a和肠道P-gp的影响

目的研究雄黄、水飞雄黄、朱砂、氯化汞(Hg Cl2)对小鼠肝/肠细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)及肠道P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响。方法将120只NIH小鼠随机分为纯水组,羧甲基纤维素钠(CMC)对照组,利福平组(40 mg·kg-1),酮康唑组(1.8 mg·kg-1),雄黄高、低剂量组(60,15 mg·kg-1),水飞雄黄高、低剂量组(60,15 mg·kg-1),朱砂高、低剂量组(120,30 mg·kg-1)和Hg Cl2高、低剂量组(0.2,0.05mg·kg-1)。小鼠每天灌胃2次,连续5 d。第6天灌胃1 h后摘取肝脏和全段小肠。用超微量ATP酶测试盒测定肠匀浆液中P-gp依赖性ATP酶的活性;用紫外分光光度法测定梯度离心分离的小鼠肝/肠微粒体中Cyp3a的活性;用实时定量PCR(real-time PCR,RT-PCR)法测定肝中Cyp3a11和肠道P-gp基因(Abcb1b)m RNA的表达。结果小鼠肠道P-gp偶联的ATP酶活性测定结果显示,雄黄、水飞雄黄、朱砂和Hg Cl2的高、低剂量组与CMC对照组比较差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);用红霉素和氨基比林为探针药检测肝脏和小肠微粒体Cyp3a酶活性的结果显示,各供试物组的Cyp3a酶活性均显著高于CMC对照组(P0.05,P0.01),而RT-PCR结果显示各供试物均能显著诱导Cyp3a11和抑制Abcb1b的m RNA表达。结论雄黄、水飞雄黄、朱砂、Hg Cl2对小鼠肝脏和肠道中的Cyp3a均具有显著的诱导作用,而对肠道P-gp的转运活性则有显著抑制作用。     

亚硒酸钠拮抗氯化汞对大鼠毒性作用的研究

本文报道了亚硒酸钠(Na_2SeO_3)拮抗氧化泵(HgCL_2)对大鼠毒性作用的研究。结果表明3组大鼠体重增加和肝脏器系数间的差异无显著性,而HgCL_2组大鼠的肾脏和睾丸脏器系数均较加Na_2SeO_3组高;试验还发现HgCL_2组大鼠的微核率和精子畸形率均明显高于蒸馏水组和加Na_2SeO_3组。该结果提示给大鼠补充一定剂量的Na_2SeO_3后可对HgCL_2的毒性产生一定的拮抗作用。     

基于 TMT 蛋白组学技术探讨氯化汞致小鼠肝脏损伤的机制

摘要:目的 利用蛋白组学技术筛选并鉴定氯化汞染毒后小鼠肝脏差异表达蛋白,为氯化汞的肝毒性作用机制研究 提供线索。方法 45只6周龄雄性 C57BL/6小鼠随机分为5组:正常对照组,不同剂量氯化汞处理组,即低剂量组(1 mg/kg)、中低剂量组(4mg/kg)、中高剂量组(8mg/kg)、高剂量组(16mg/kg)。氯化汞处理组每天灌胃给予不同剂量氯 化汞,对照组给予等体积水,监测小鼠体重变化。第28天灌胃后处死小鼠,收集血清和肝脏组织,测定其血清丙氨酸氨 基转移酶(alanineaminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase,AST)、肝脏谷胱甘肽过 氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)活性;苏木精-伊红(hematoxylin-eosinstaining, HE)染色观察肝脏病理学变化;采用串联质谱标签(tandem masstags,TMT)定量蛋白组学技术鉴定对照组与氯化汞高 剂量组肝脏的差异表达蛋白(differentiallyexpressedproteins,DEPs),并对其进行 GO 富集、KEGG通路富集分析。结果 与对照组相比,中高剂量组与高剂量组小鼠体重降低(均 P<0.05)、血清 ALT 活性显著增高、肝脏 GSH-Px、CAT 水平 下降。HE染色结果显示氯化汞染毒可引起多种类型的肝细胞损伤。蛋白组学结果显示,与对照组相比,氯化汞高剂量 组小鼠肝脏差异表达蛋白共有195个,其中上调99个、下调96个;GO 富集分析显示氯化汞参与小鼠肝脏的糖代谢负调 控、天冬氨酸家族氨基酸代谢等生物学过程;KEGG通路富集分析显示,氯化汞染毒可通过影响 CYP450介导的外源化 合物代谢、类固醇激素代谢、花生四烯酸代谢、胆汁分泌等信号通路产生肝脏毒性。结论 氯化汞染毒严重影响小鼠肝 脏多种蛋白的表达,导致相关代谢通路紊乱。     

氯化汞对小鼠呼吸道的急性毒性作用

[目的]探讨氯化汞对呼吸道的急性毒性作用.[方法]取8周龄BALB/c雌性小鼠,按照体质量随机分为对照组和氯化汞处理组,氯化汞处理组以气管滴下的方式接触氯化汞,对照组以同样方式接触生理盐水.接触后第24 h时观察两组小鼠一般状态,测量体质量和肝脏、肾脏、脾脏及肺脏的湿质量,测定肺泡灌洗液(BALF)中蛋白质水平,采用流式细胞仪测定BALF中的CD45~+细胞数目.[结果]与处理前比较,氯化汞处理组小鼠24 h后的体质量显著降低(P<0.001),肺脏湿质量显著升高(P<0.001);与对照组比较,BALF中的蛋白质水平和免疫细胞数目亦显著升高(P<0.001).[结论]氯化汞对小鼠呼吸道具有急性毒性作用,可引起免疫细胞聚集.