槲皮素对高糖诱导的RPE细胞凋亡的保护作用及机制

目的研究槲皮素对高糖诱导的RPE细胞凋亡的保护作用及其作用机制。方法将A-RPE19细胞系的细胞分别培养于普通培养基和高糖培养基中,其中高糖培养基内分别加入0、50、100、150 mmol/L的槲皮素,培养24 h以后用TUNEL检测各组细胞的凋亡,并根据该结果选取槲皮素的最佳作用浓度,进行caspase3的免疫荧光染色,线粒体酶复合物的活性测定。结果高糖培养的RPE细胞的凋亡指数(TUNEL阳性细胞/总细胞数)明显高于对照组,槲皮素可以明显抑制高糖诱导的RPE细胞的凋亡,其中以100 mmol/L的浓度作用效果最强,与高糖培养组相比,其差异有明显的统计学意义(P<0.05)。高糖组的caspase3的免疫荧光染色明显强于对照组和高糖+100 mmol/L槲皮素组。线粒体复合酶Ⅱ的活性各组之间并无统计学差异。高糖组的线粒体复合酶Ⅰ和Ⅳ的活性均明显低于对照组和高糖+100 mmol/L槲皮素组(P<0.05)。结论槲皮素可以抑制由高糖诱导的RPE细胞的凋亡,其作用是通过抑制caspase3的激活和线粒体保护实现的。     

高效液相色谱法测定复方矮地茶止咳合剂中的槲皮素和山奈酚含量

目的建立高效液相色谱法测定复方矮地茶止咳合剂中槲皮素和山奈酚的含量。方法采用SUPELCO Discovery C18（4．6mm×250nm,5μm）色谱柱,流动相：甲醇-0．4％磷酸溶液（50：50）,流速：1．0mL·min^-1,检测波长：370nm,柱温：40℃,进样量：10μL。结果槲皮素和山奈酚分别在6．484-155．6μg·mL^-1、5．708～137．0μg·mL^-1与峰面积线性关系良好,低、中、高3个剂量组的平均回收率分别为93．6％、97．2％、98．2％与95．2％、94．9％、100．2％。结论所建立的方法准确可靠、灵敏度高、专属性强,可有效控制复方矮地茶止咳合剂的质量。     

HPLC同时测定芜菁子药材中槲皮素和山奈酚含量及其指纹图谱的研究

目的 建立芜菁子药材中槲皮素和山奈酚定量测定方法及芜菁子中黄酮类化合物的指纹图谱,为芜菁子质量控制提供依据。方法 采用HPLC测定芜菁子药材中槲皮素和山奈酚的含量及建立芜菁子指纹图谱,色谱条件为ODS C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.7 mL·min^-1,检测波长254 nm,柱温30 ℃。结果 样品中槲皮素和山奈酚的含量分别为0.013 1~0.035 6 mg·g^-1及0.022 0~0.048 0 mg·g^-1,平均回收率分别为102.8%和99.5%。芜菁子指纹图谱中有11个共有峰,对10批次芜菁子样品的指纹图谱进行相似度比较,相似度较高。结论 该方法重现性好,可行性强,可用于芜菁子的质量评价。     

HPLC法同时测定铁包金不同药用部位中芦丁和槲皮素的含量

目的:建立同时测定铁包金不同药用部位芦丁、槲皮素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为迪马ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-0.2%磷酸(梯度洗脱),流速为0.9 ml/min,柱温为30℃,检测波长为360 nm。结果:芦丁和槲皮素的进样量分别在0.01¹.88、0.011.88、0.01⁰.23μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系;精密度、稳定性、重复性的RSD<2%;芦丁、槲皮素的平均加样回收率分别为99.48%、102.34%,RSD分别为2.06%、2.37%(n=6)。结论:铁包金叶与藤茎部位中芦丁、槲皮素的含量均较高。该方法简单、稳定,结果准确、可靠,可用于铁包金的质量控制。     

黄酮类成分黄芩素、槲皮素、丹参素钠对吸烟致细胞毒性和DNA损伤的保护作用

目的评价吸烟致细胞毒性和DNA损伤以及黄酮类成分黄芩素、槲皮素、丹参素钠的保护作用。方法以自动吸烟机按照FTC协议吸烟产生的主流烟雾在线染毒B-16细胞和人颊黏膜细胞两种真核细胞,通过MTT比色法和单细胞凝胶电泳法检测吸烟所致的细胞毒性和DNA损伤,并考察黄芩素、槲皮素、丹参素钠的保护作用。结果吸烟可致体外培养的B-16细胞活力明显下降,两种细胞的DNA明显损伤。随着烟气作用时间的延长,表征细胞内DNA损伤程度的彗星尾矩、Olive尾矩都有增加;1 mmol/L槲皮素、黄芩素和丹参素均可明显缓解吸烟引起的细胞毒性和DNA损伤,对B-16细胞的活力提升50%左右,对人颊黏膜细胞的DNA保护效果超过60%。结论吸烟可致细胞毒性和细胞DNA损伤,但是黄酮类成分黄芩素、槲皮素、丹参素钠均对细胞和DNA具有保护作用。     

f_2相似因子法评价银杏酮酯缓释微丸大类成分总黄酮和各类成分的体外释放相关性研究

目的引入f_2相似因子法对银杏酮酯(GBE)缓释微丸的大类成分总黄酮和各类成分(包括黄酮类和萜内酯类)的释放曲线进行分析,以能较全面地评价其体外释放。方法运用紫外分光光度法、高效液相-质谱联用(HPLC-MS)测定GBE缓释微丸中大类成分(总黄酮)和各类成分(槲皮苷、异鼠李素、芦丁、槲皮素、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯)的体外释放率,并进行f_2相似因子计算;采用扫描电镜法观察微丸释药前后的微观结构,结合方程拟合分别对微丸中总黄酮和各类成分的释药机制解析,以验证f_2相似因子法的可靠性。结果优化工艺的GBE微丸黄酮类和内酯类的各成分与大类成分总黄酮的f_2均大于50,说明大类成分总黄酮与各类成分体外释放曲线具有较好的相关性。释药机制解析进一步验证了该结果的可靠性。结论 f_2相似因子法可运用于多组分中药缓释制剂大类成分和各类成分的体外释放评价。     

槲皮素干预二氧化硅粉尘致肺纤维化大鼠的实验研究

目的观察槲皮素对二氧化硅粉尘所致肺纤维化的影响。方法选取48只雄性健康成年SPF级SD大鼠为研究对象,随机分为6组(对照组,槲皮素干预组,染尘7天、14天、21天和28天组)。对照组大鼠经气管注入无菌生理盐水1 ml,染尘组和槲皮素干预组大鼠注入50 mg/ml二氧化硅混悬液1 ml,预防组以50 mg/kg的槲皮素每天灌胃干预治疗,取肺组织进行HE染色,确定肺泡炎和肺纤维化程度,并检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量以及过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果对照组大鼠肺组织结构基本正常;染尘组大鼠第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润;14天时肺泡间隔内成纤维细胞显著增多,肺泡结构破坏;21天时大量巨噬细胞聚集形成细胞性结节且结节内有少量的胶原纤维;28天时肺纤维化程度进一步加重,形成广泛纤维化。随染毒时间的增加,肺组织中HYP的表达量逐渐升高,CAT及GSH-Px的活性逐渐降低;加入槲皮素后肺组织中HYP的表达量降低,CAT及GSH-Px的活性升高,差异具有显著性(P0.05)。结论槲皮素对矽尘所致的肺纤维化有一定的预防作用。     

正交试验法优选芒果叶中槲皮素的提取工艺

目的:优选芒果叶中提取槲皮素的最佳提取工艺条件。方法:采用正交试验法,以高效液相色谱法(HPLC)测定槲皮素的含量,对提取工艺进行考察。结果:影响提取的主要因素是硫酸的浓度,其次是水解时间,再次是硫酸的用量。从芒果叶中提取槲皮素的最佳工艺为取沉淀加40倍量5%硫酸微沸水解1h。结论:该工艺可提高芒果叶中槲皮素的提取率和纯度。     

鱼腥草破壁饮片质量评价研究

目的:通过对比鱼腥草饮片、鱼腥草喷干粉、鱼腥草破壁饮片中甲基正壬酮、槲皮素含量,结合红外图谱的研究,对鱼腥草破壁饮片进行质量评价.方法:应用红外光谱仪对鱼腥草标准药材、鱼腥草喷干粉、鱼腥草破壁饮片进行红外光谱扫描及特征峰相似度分析.利用GC-MS和HPLC法对鱼腥草主成分中甲基正壬酮和槲皮素含量进行定量检测.结果:不同...