探索小RNA的功能

基因表达的调控———决定于细胞内产生多少何种的蛋白质———是由无数不同的分子控制的.一种自然产生的调控分子是小的干扰RNA(siR NA) ,它选择性地中断按计划已认可的蛋白质的产生,这个过程称为RNA干扰.这些短的核苷酸延伸结合与其它细胞的蛋白质形成了一种RNA诱导的静止复合物,称为RISC ,它能定位并且破坏一种靶信使RNA—这种分子是把某种蛋白质的信息,从细胞核携带到它生成的细胞质位置.生物学家们在动植物中发现了几百种其它自然产生的短小调控RNA ,称为miRNAs .像siR NA ,他们也能通过类似的甚至可能是相同的RISC分子影…     

正常及去势大鼠组织内雌激素受体mRNA表达水平的研究

通过切除大鼠卵巢复制实验性骨质疏松动物模型，从小块胫骨组织内提取ＲＮＡ，对正常对照、切除卵巢雌激素治疗组的标本进行逆转录－聚合酶链反应（ＰＴ－ＰＣＲ）检测，直接从生理状态下的成熟骨经检测出雌激素受体（ＥＲ）ｍＲＮＡ的表达，并经测序证实。实验结果还显示切旋卵巢大鼠的ＥＲ表达水平明显降低，而予以雌激素治疗组的ＥＲ表达接近正常。提示ＥＲ的表达依赖于雌激素的存在，而雌激素通过ＥＲ在骨代谢中起作用。     

PIAS3敲低对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究PIAS3敲低对人前列腺癌细胞系DU145细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法构建PIAS3shRNA表达质粒pSilencer4.1/PIAS3,转染DU145细胞。MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期和凋亡。结果测序证实PIAS3shRNA表达质粒构建成功。转染后DU145细胞PIAS3蛋白表达明显下调。MTT分析显示PIAS3敲低促进细胞增殖,并存在剂量-效应关系。流式细胞术分析显示:PIAS3敲低后S期细胞比例增加,G0/G1期细胞比例减少,凋亡细胞比例减少。结论PIAS3敲低促进体外前列腺癌细胞增殖,抑制其凋亡。     

甘肃省围孕期女性环境毒物代谢相关基因位点多态性分析

目的 研究甘肃省围孕期女性环境毒物代谢相关基因位点多态性分布特征,筛选基因突变高危人群,制定个性化干预方案。方法 纳入1 389例于2018年6月-2019年7月行孕前咨询或孕早期初次孕检的女性,对环境毒物代谢酶基因CYP1A1、GSTM1、GSTT1、GSTP1的基因多态性进行检测,并分析甘肃省不同地区、不同民族上述环境毒物代谢相关基因的分布情况。结果 CYP1A1 Ile462Val基因位点杂合突变基因型AG频率为34.0%,纯合突变基因型GG频率为5.2%;GSTP1 A313G基因位点杂合突变基因型AG频率为34.1%,纯合突变GG基因型频率为4.6%;GSTM1和GSTT1缺失基因型的频率分别为56.5%、43.3%;同时携带GSTM1和GSTT1缺失基因型频率为23.7%。汉族和少数民族的GSTM1、GSTT1、GSTP1基因型频率分布相似（P> 0.05）,甘肃省不同地区围孕期女性的GSTM1、GSTT1、GSTP1基因型频率分布相似（P>0.05）。结论 甘肃省围孕期女性细胞色素P450基因和谷胱甘肽硫转移酶系相关基因位点突变型或缺失型略高于其他地域研究报道...     

胰弹力蛋白酶I和核糖核酸酶检测的临床价值

目的　探讨人胰弹力蛋白酶Ⅰ (Humanpancreaticelastase 1 ,HPE1 )放射免疫测定 (Radioimmunoassay ,RIA)和核糖核酸酶(Ribonuclease ,RNase)活性检测的临床价值。方法　参照Satake等建立的改良HPE1RIA和Thomas等的改良酸溶性产物法检测 82例正常成年人和 2 2 2例各类患者血清并分析结果。结果　 82例健康成人HPE1值为 2 3.8( 3.4ng L) ,RNase活性为 5 7.0 3( 1 2 .1 6 μ ml) ;急性胰腺炎和胰腺癌HPE1 值明显高于其他疾病 (P <0 .0 1 )。联合检测HPE1 、RNase活性可提高胰腺癌的检出率 ( 92 .47% )。结论　HPE1 RIA对急性胰腺炎有诊断价值 ,联合检测HPE1 、RNase活性检测对胰腺癌诊断有一定的临床价值     

卵巢恶性肿瘤VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达及其意义

应用原位分子杂交技术研究卵巢恶性肿瘤组织中VEGFmRNA和bFGFmRNA的表达及其意义。结果发现 :浆液性腺癌和内胚窦癌两者表达阳性率高于粘液性腺癌和颗粒细胞瘤 ;临床分期Ⅰ期和未转移病例两者表达阳性率低于临床分期Ⅲ～Ⅳ期和转移病例。结果提示VEGFmRNA和bFGFmRNA表达与卵巢恶性肿瘤病理类型、临床分期和转移发生关系密切 ,阳性表达者可能预后较差。     

几种常用注射液的细菌内毒素检查法探讨

目的 :对细菌内毒素检查法在临床的应用进行探讨。方法 :参照中国药典九五版 (二部 )中的有关细菌内毒素检查法规定 ,采用最大有效稀释倍数法进行干扰实验。结果 :通过对 3 0批大输液进行细菌内毒素检查 ,甘露醇注射液 6批 ,阴性 6批 ;葡萄糖氯化纳注射液 1 8批 ,阴性 1 8批 ;低分子右旋糖酐注射液 6批 ,阳性 1批 ,阴性 5批。结论 :细菌内毒素检查法灵敏、方便、快捷 ,有利于大输液成品的质量控制。     

干扰能治疗流行性腮腺炎脑膜脑炎疗效观察

流行性腮腺炎脑膜脑炎（简称腮脑）,由于尚无有效的抗病毒药物,目前治疗仍主要采用对症和支持综合疗法。近２年我院共收治腮脑３６例,其中１６例应用干扰能（重组干扰素２－２６）［１］进行治疗,获得满意效果,现报道如下。１　临床资料１．１　临床表现　本组共３６例,男１９例,女１７例。年龄１．５～１２．０岁,平均４．２岁。诊断依据：①有明确的流行性腮腺炎接触史;②表现有一侧或双侧非化脓性腮腺肿大（简称腮肿）、疼痛,伴有发热、头痛、呕吐等症状;③血象：白细胞为（４～１０）×１０９／Ｌ,淋巴细胞相对增多;④脑脊…     

乙型肝炎病毒核糖核酸酶H基因表达及鉴定

目的　乙型肝炎病毒核糖核酸酶 H (HBV- RNase H)为该病毒生活周期中负链 DNA合成所必需 ,获取该基因片段及其表达蛋白 ,为进一步的基础研究及应用研究创造条件 .方法　以 HBV全基因片段为模板 ,PCR方法定位扩增 HBV-RNase H特异性片段 ,连接于 p T7Blue克隆载体 ,酶切鉴定并测序后克隆于 p GSTag载体进行原核表达 .PAGE电泳及Western杂交鉴定表达产物 .结果　DNA测序结果显示 PCR扩增产物及载体中插入片段与已知序列相同 ;Western杂交结果表明 ,所表达产物为 GST与 RNase H的融合蛋白 .结论　 HBV- RNase H基因的成功克隆及表达为进一步研究 HBV感染的早期诊断及乙肝患者的治疗奠定了基础     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的表达

目的：探讨增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１基因表达改变的相互关系及临床意义。方法：总ＲＮＡ抽提试剂盒抽提总ＲＮＡ,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平的改变。结果：Ｈ和Ｋ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ（１．１９７±０．２３７,１．２０４±０．２４３）表达均高于正常瘢痕和正常皮肤（０．３２７±０．０８１,０．３３１±０．０７８）,Ｐ＜０．０１;Ｋ选择性地Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,导致ＫⅠ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ比值明显高于Ｈ（８．１６４±０．３００,１．６６６±０．２０１,Ｐ＜０．０１）。结论：Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达类型及强度不同,提示在Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理：ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕疙瘩的发病机理中具有不同的分子机理;ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理中具有一定作用。