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目的:呼吸道合胞病毒感染呼吸道上皮细胞后,诱导细胞过度表达活性递质.实验拟观察呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞A549后核内活件核因子κB,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白、一氧化氮和丙二醛表达的变化.方法:实验于2006-12/2007-05在安徽医科大学基础医学院病原与免疫学实验中心完成.①实验过程:将冻存的病毒株复苏后经Hep-2细胞增殖.用呼吸道合胞病毒感染体外培养的A549细胞,分别于感染4,8,16,24h后收集细胞和细胞培养上清.以未感染病毒的细胞为正常对照组.②实验评估:反转录聚合酶链反应检测诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的变化:免疫印迹法(Western-Blot)分别检测核内活性核因子κB、诱导型一氧化氮合酶蛋白的变化:用硝酸还原酶法、硫代巴比妥酸法分别检测细胞培养上清一氧化氮和丙二醛的表达.结果:①A549细胞中核内活性核因子κB有基础表达,经由呼吸道合胞病毒感染后,核内活性核因子κB表达升高.且随着感染时间的延长而增加.②呼吸道合胞病毒感染A549细胞后,诱导型一氧化氮合酶mRNA和蛋白的表达均升高且有时间依赖性,24 h的诱导犁一氧化氮合酶mRNA表达量是基础表达量的近12倍,诱导型一氧化氮合酶蛋白的表达亦显著高于正常对照组.核内活性核因子κB与诱导型一氧化氮合酶的mRNA和蛋白升高表达呈正相关.③呼吸道合胞病毒感染能促进A549细胞培养上清中一氧化氮和丙二醛的表达升高,24 h内细胞上清中的一氧化氮呈缓慢升高变化.结论:在呼吸道合胞病毒感染A549细胞的炎性反应中核内活性核因子κB升高,与诱导型一氧化氮合酶基因和蛋白的上升表达呈正相关. 相似文献
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目的为建立抗Sm自身抗体检测方法,自行克隆、表达和鉴定细胞核抗原Sm B′。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HL-60细胞株中克隆Sm B′全长基因,将PCR产物直接进行TA克隆、鉴定及测序,再定向克隆至pGEx-5T载体中,转入大肠杆菌BL-21,阳性克隆鉴定后在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达,产物行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(western blot)鉴定。结果PCR产物约为700 bp,与预期657 bp接近,测序结果与GenBank核酸数据库报道完全一致。pGEX-5T-Sm B′重组阳性克隆酶切鉴定正确,SDS-PAGE和western blot结果显示融合蛋白分子量为51 000,具有与抗Sm B′抗体的反应性。结论成功克隆表达核抗原Sm B′,为建立抗Sm自身抗体检测方法奠定了基础。 相似文献
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应用YL-1型血肿穿刺针治疗高血压壳核出血临床分析 总被引:1,自引:0,他引:1
高血压脑出血的手术指征、术式选择及评价等 ,一直是神经外科领域内一个具有争论的问题。对于出血量在 30 m l以上的幕上血肿 ,多数主张手术清除。近二年 ,我院采用 YL - 1型血肿穿刺粉碎针对 2 6例 30 ml以上高血压壳核出血患者行微创颅内血肿清除术 ,与同期同类 34例开颅血肿清除术者比较 ,结果发现 ,对无脑疝形成者 ,微创组无论从生存率 ,还是术后生存质量 ,均较手术组好。现报道如下。1 临床资料1.1 一般资料 微创组 :男 15例 ,女 11例 ,年龄 38~ 82岁 ,平均 6 1.2 3岁 ,有高血压史或入院时血压升高者 2 4例 ,有糖尿病史者 3例 ;开… 相似文献
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急性白血病患者单个核细胞内一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性的变化与多药耐药的关系 总被引:5,自引:0,他引:5
一氧化氮 (NO)由一氧化氮合酶 (NOS)催化精氨酸生成 ,NO作为一种自由基性质的气体分子 ,广泛参与体内多种生理病理过程 ,如扩张血管、调节神经递质传递、攻击病原微生物等。越来越多证据表明NO与肿瘤的生物学行为有密切关系。NO同样参与白血病细胞的增殖、分化、凋亡过程。我们检测了 6 0例急性白血病患者单个核细胞内NO含量 ,NOS活性与P 170表达 ,旨在探讨NO及NOS变化及其与白血病多药耐药 (MDR)的关系 ,为临床治疗耐药白血病提供新的方向。对象和方法1 研究对象 急性白血病患者 6 0例 ,男 4 0例 ,女 2 0例 ,年… 相似文献
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患者腰部、左下肢间断性疼痛 10年余 ,加重 1个月。现病史 :10年前腰部扭伤后出现腰部疼痛 ,1周后出现左下肢疼痛 ,休息后好转。腰痛、左下肢疼痛症状间断出现 ,手法按摩、封闭、休息后好转。近1个月疼痛症状加重 ,行封闭治疗效不佳。门诊以腰椎间盘突出症收住院。患者患病以来 相似文献
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社区获得性肺炎急性时相蛋白的检测及其意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨社区获得性肺炎(CAP)急性时相反应蛋白(APR)测定的临床意义.方法测定62例社区获得性肺炎APR的水平,将其分为有心肺疾病和/或危险因素组(A组,30例)和无心肺疾病和/或危险因素组(B组,32例);监测其APR含量变化,并与30例正常人进行对照分析.结果CAP患者测定的CRP、AAG及HPT的含量明显高于正常组(p<0.01),而A组患者的CRP、AAG、HPT的含量明显高于B组(p<0.01).结论APR的测定对于CAP病情的评估及预后有着密切联系. 相似文献
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铜是体内重要的微量元素之一,对神经系统有重要意义.脑脊液铜的含量受多种因素的影响.脑脊液铜与脑铜密切相关.在许多疾病尤其是肝豆状核变性中,脑脊液铜的含量会发生异常.因此,提高对脑脊液铜的临床意义的认识非常重要. 相似文献
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