小分子肽对成骨前体细胞MC3T3-E1骨保护素和核转录因子κB受体活化因子配体表达的影响

背景：体内实验显示，小分子肽能明显增加去卵巢大鼠的骨钙含量，使其骨密度增加，能很好地预防骨质疏松。同时体外实验显示，小分子肽能促进小鼠成骨细胞和成骨前体细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化，并且可能是通过抑制核转录因子 p50和p65的表达来起作用。而小分子肽对骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体的影响尚不明确。 目的：观察小分子肽对MC3T3-E1在增殖、分化、矿化过程中骨保护素和RANKL表达的影响。 方法：以体积分数10%胎牛血清的DMEM培养液为空白对照组，50，100 mg/L质量浓度小分子肽作用小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1，分别于作用3，6，12，18，24，30 d后，收集细胞提取蛋白，Western Blot检测骨保护素和核转录因子κB受体活化因子配体蛋白的表达。 结果与结论：50，100 mg/L小分子肽作用MC3T3-E1后能明显促进作用骨保护素的表达(P < 0.01)，而对核转录因子κB受体活化因子配体无明显影响。小分子肽作用后MC3T3-E1中骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体的比值要明显高于空白对照组(P < 0.01)。因此，认为小分子肽可以通过增加骨保护素的表达来影响骨保护素/核转录因子κB受体活化因子配体系统，间接地抑制破骨细胞的数量和功能。     

NIDDM患者单个核细胞胰岛素受体放射分析及其临床意义

采用乳过氧化物酶法制备A_(14)-~(125)I胰岛素,泛影葡胺-聚蔗糖分层液密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,优选受体结合试验条件,建立了单个核细胞胰岛素受体放射分析法。测定了54例NIDDM患者、29例单纯肥胖症患者和27例正常人的单个核细胞胰岛素受体结合率(MIB)。结果表明NIDDM组的MIB显著低于正常组,空腹血浆胰岛素(FPI)高于正常组;NIDDM肥胖型组中MIB与FPI呈负相关。证实胰岛素受体缺陷是NIDDM产生胰岛素抵抗性的重要原因之一。     

肝细胞核因子-1β基因与MODY5

肝细胞核因子 - 1β(HNF- 1β)又名变异型肝细胞核因子 - 1(VHNF- 1)或肝细胞因子 - B3(L FB3) ,是一种核蛋白。作为转录因子 ,HNF- 1β能识别启动子、启动子近侧元件和增强子等顺式元件中的特异靶序列并与之结合 ,对靶基因的转录起到激活或阻遏的作用 ;也可与其它转录因子相互作用 ,协同调节靶基因的最终活性状态。近来发现 HNF- 1β基因(TCF2 )突变与青少年起病的成年型糖尿病 (maturity- onsetdiabetes of the young,MODY)伴肾脏畸形有关 ,现就此作一介绍。一、HNF- 1β及 HNF- 1β基因HNF- 1β属组织特异性的包含同源结构…     

类风湿关节炎中白三烯B4间接分化破骨细胞的实验研究

目的探讨在类风湿关节炎（RA）中,白三烯B4（LTB4）能否通过促进核因子Kappa B受体激活剂配体（RANKL）的表达,起到间接分化破骨细胞的作用.方法利用RA滑膜成纤维细胞（RAFLs）和人外周血单核细胞的共培养体系,对照组2.5 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）刺激、实验a组2.5 ng/ml M-CSF＋10-8mol/L LTB4刺激、实验b组2.5 ng/ml M-CSF＋10-8 mol/L LTB4＋100 ng/ml骨保护素（OPG）刺激,培养3周后行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）细胞化学染色,通过计数多核性TRAP酶染色阳性的破骨细胞样细胞,比较各组的分化破骨细胞作用.结果对照组几乎没有破骨细胞样细胞,而实验a组则出现较多的破骨细胞样细胞,实验b组则与对照组相似,几乎没有破骨细胞样细胞.结论在RA中,LTB4能够通过促进RAFLs细胞RANKL的表达来间接分化破骨细胞.     

脾胃湿热证胃炎患者舌苔脱落细胞中微核细胞及P53表达

[目的]探讨脾胃湿热证和脾气虚证慢性浅表性胃炎患者舌苔脱落细胞微核细胞和P53表达的意义.[方法]用Feulgen法和免疫细胞化学法显示正常对照者及脾胃湿热和脾气虚患者舌苔脱落细胞中微核细胞、P53表达.[结果]脾胃湿热组和脾气虚组微核细胞的反应强度及出现频率均高于正常对照组(均P＜0.05);脾气虚组的P53阳性反应高于正常对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).[结论]微核细胞在两患者组的舌苔脱落细胞内反应强度及出现频率较高,提示有较多的分裂畸变细胞;而P53的表达与微核细胞的出现有关,两者可能代表了证候发展不同的过程.     

汉坦病毒L99株G2糖蛋白基因的克隆及在真核细胞中的瞬时表达

从感染病毒的Vero-E6细胞中提取总RNA,采用RT-PCR和分子克隆技术将扩增到的C2糖蛋白基因插入含有CMV启动子的真核表达质粒pVAX1.通过脂质体介导转染cos-7细胞,用间接免疫荧光法检测瞬时表达的蛋白.结果获得含有编码汉坦病毒L99株包膜糖蛋白G2基因的重组质粒pVAX/C2.在转染cos-7细胞内.用IFA可检测到细胞内有特异性荧光.证实成功构建了汉坦病毒L99株包膜糖蛋白C2基因真核表达载体,并可在cos-7细胞中瞬时表达;为出血热综合征疫苗制备奠定了基础.     

晚期糖化终产物对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡作用机制的实验研究

目的 研究AGEs对Aβ诱导的PC12细胞的作用机制是否与氧化应激有关，阻断RAGE活性能否作为有效的作用靶点。方法 Aβ诱导PC12细胞后加入低、中、高浓度AGEs孵育12h；胰蛋白酶处理PC12细胞后加入Aβ，MTT法检测细胞活力，流式细胞仪测定细胞凋亡，RT-PER法测定RAGE，NF-κB表达。结果 MTT法显示随AGEs浓度升高，细胞活力下降，胰蛋白酶处理组细胞活力升高，流式细胞仪检测显示随AGEs浓度增加，细胞凋亡率增加，RT-PCR法半定量分析RAGE、NF-κB达随AGEs浓度升高而增高。结论 AGEs对Aβ诱导的PC12细胞神经毒性损害由RAGE介导．并与RAGE引起NF-κB达有关，阻断RAGE可减低其神经毒性，阻断RAGE活性可作为有效的药物作用靶点。     

外周血单个核细胞IFN-γmRNA的测定及应用

目的 研究鸭IFN—γ(DuIFN-γ)在感染及控制病毒过程中的作用和机制。方法 基于β—actin的高度保守序列设计引物，通过RT—PCR方法获得了β—actin的部分cDNA为看家基因，然后构建DuIFN-γ靶片段的竞争性内参照，建立检测DuIFN—γ基因转录的半定量竞争性RT—PCR方法。结果 建立了检测DuIFN-γ基因转录的半定量竞争性RT—PCR方法，并检测了在PHA刺激下鸭外周血单核细胞IFN-γmRNA动态变化，结果表明PHA刺激24～36h，DuIFN-γmRNA转录量最高。以此方法对用DHBVpreSDNA或与IFN-γ7DNA共免疫DHBV感染鸭进行了测定，结果表明IFN-γ表达质粒作为DNA免疫佐剂，可以增强宿主IFN-γ的应答。结论IFN-γ表达质粒为DNA疫苗的有效佐剂。DuIFN-γ基因转录的半定量竞争性RT—PCR方法为研究鸭IFN-γ在DHBV感染及清除中的作用和机制奠定了基础。     

肝豆状核变性29例分析

目前肝豆状核变性（Ｗｉｌｓｏｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＷＤ）的诊断和治疗均有一定困难。１９９５年以来我院收治本病２９例，现报告如下。１ 材料和方法２９例患者中男性１９例，女性１０例，年龄１０个月至５３岁，入院前病程一周至８年，入院诊断５例为肝炎肝硬化，２例为急性黄疸性肝炎，１８例为肝豆状核变性，４例为病毒性脑炎。入院后查血清铜蓝蛋白、血清铜降低、２４小时尿铜增多，除２例外，余病例角膜Ｋ－Ｆ环均阳性，确诊为肝豆状核变性。首发症状中１７例有精神异常而被精神内科收治，７例被儿科收治，１例因骨关节痛收入骨科…