细菌质粒DNA纯化方法的研究

以HBV DNA的克隆菌E.coli.JM83为出发菌株,对比研究了三种纯化细菌质粒DNA的方法。实验结果表明,CsCl密度梯度超速离心法的得率和产品纯度均佳,但操作繁琐,花费昂贵;Sepharose 4B柱层析纯化法简便快速又勿需专门仪器,缺点是产品纯度不够高;电泳洗脱法的得率虽不及超速离心法,但产品纯度与之相同,由于操作简便,花费大大降低,因而适合普遍采用。     

淫羊藿提取物对大鼠胸主动脉Ca^2＋内流量的影响

[目的]研究淫羊霍提取物对大鼠胸主动脉Ca^2 内流量的影响。[方法]采用^45Ca放射性元素跨膜测量技术与柱层析相结合，研究了几种中草药提取物对大鼠胸主动脉Ca^2 内流量的影响。[结果]发现淫羊霍提取物质拮抗作用最好。[结论]用淫羊霍乙醇提取物作柱层析，发现一个组分有钙拮抗作用。     

盐酸左氧氟沙星脂质体滴眼液的研制

目的：研究盐酸左氧氟沙星(LOFLX)脂质体滴眼剂的处方和制备工艺，探讨脂质体作为LOFLX载体的可行性。方法：采用逆相蒸发法制备脂质体，用葡聚糖凝胶柱层析测定药物包封率，以包封率为指标，通过正交设计筛选最优处方。结果：最佳处方制得的脂质体粒径均匀、形态规整、90％以上的粒径小于1pm，药物的包封率达28．41％。结论：通过逆相蒸发法制得的LOFLX脂质体可作为滴眼剂。     

维生素A缺乏大鼠红系祖细胞表面N连接型糖链结构改变的机理研究

目的：阐明维生素Ａ缺乏（ＶＡＤ）引起大鼠红系祖细胞（ＥＰＣ）表面Ｎ连接型糖链结构改变从而导致ＥＰＣ增殖分化障碍的机理。方法：经３Ｈ－甘露糖掺入和结合外切糖苷酶的系列凝集素柱层析和凝胶过滤，研究ＶＡＤ大鼠骨髓基质细胞和脾细胞条件培养液（ＢＭＳＣＭ和ＳＣＭ）对正常大鼠ＥＰＣ表面Ｎ糖链结构的影响。结果：ＶＡＤ大鼠的ＢＭＳＣＭ和ＳＣＭ可致：３Ｈ－苷露糖掺入ＥＰＣ表面Ｎ糖肽的总量减少；高甘露糖型和杂合型糖链结构比例增大，复杂型的糖链结构比例下降；而在复杂型糖链中，二天线糖链的比例和不含分叉型Ｎ－乙酰基葡萄糖（Ｂ－Ｇｎ）和核心岩藻糖（Ｃ－Ｆｕｃ）的组分降低，含Ｂ－Ｇｎ或Ｃ－Ｆｕｃ或同时含Ｂ－Ｇｎ和Ｃ－Ｆｕｃ的组分增大。结论：ＶＡＤ可能影响造血生长因子（ＩＬ－３和ＧＭ－ＣＳＦ等）的表达／活性，因而导致ＥＰＣ表面糖链的异常以及ＥＰＣ增殖分化障碍。     

中国南海软珊瑚Spongodes sp.化学成分的研究

目的：对采自中国南海的软珊瑚Spongodes sp．的化学成分进行研究，从中寻找有生物活性的次生代谢产物。方法：用硅胶柱层析和Sephadex LH-20柱层析对软珊瑚Spongodes sp．的乙醚提取物进行分离纯化，并利用现代波谱技术对其进行结构鉴定.结果与结论：分离得到4个孕甾烷类化合物和3个新松烷二萜，其结构分别为1，20二烯-3-酮孕甾烷(1)、1．4．20-三烯-3-酮孕甾烷(2)、4，20二烯-3-酮孕甾烷(3)、1-烯-3-酮-20β-羟基孕甾烷乙酸酯(4)、(1R，2E，4R，7E，11E)-cerebra-2，7，11-triene-4-ol(5)，(1R，3S，4S，7E，11E)-3，4-epoxyeembra-7，11，15-triene(6)，epoxynephthenol acetate(7)，在活性筛选中，化合物4对BEL-704，HELA和Ⅷ，60显示抑制活性，IC50分别为3．1，6．3，0．26／anol／L，化合物6对COX-2有抑制活性，IC50为0．455μmol／L。     

淫羊藿提取物对大鼠胸主动脉Ca2+内流量的影响

[目的]研究淫羊藿提取物对大鼠胸主动脉Ca2+内流量的影响.[方法]采用45Ca放射性元素跨膜测量技术与柱层析相结合,研究了几种中草药提取物对大鼠胸主动脉Ca2+内流量的影响.[结果]发现淫羊藿提取物质拮抗作用最好.[结论]用淫羊藿乙醇提取物作柱层析,发现一个组分有钙拮抗作用.     

羊栖菜抗水产动物致病性海洋弧菌活性成分研究

目的：对大型海藻羊栖菜体内抗水产动物病原菌活性成分进行分离分析。方法：采用平板扩散法研究羊栖菜不同有机溶剂粗提物及其乙醇提取物乙酸乙酯部位的分离纯化组分对来源于不同水产养殖动物的致病性海洋弧菌的抑制作用。结果：羊栖菜提取物对多种致病性海洋弧菌具有较好的抗性,其中羊栖菜乙醇提取物的乙酸乙酯部位对源自锯缘青蟹（Scylla serrata）的溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）的抑制作用最明显,抑菌圈直径Φ可达21.6 mm;经色谱柱层析分离和GC-MS分析结果表明,羊栖菜乙醇提取物乙酸乙酯部位的活性物质第二次分离中的抗菌活性较强组分主要为5,5,8a-三甲基萘烷-1-酮、山菊醇,4-羟基苯甲酸、1,10-癸二醇。结论：羊栖菜体内有多种活性成分对致病性海洋弧菌具有抗性。     

蛇六谷石油醚萃取物柱层析部位抗肿瘤活性组分再筛选

[目的]对中药蛇六谷石油醚萃取物采用硅胶柱层析后的所得组分进行体外抗肿瘤活性筛选。[方法]采用硅胶吸附层析分离技术,对蛇六谷石油醚萃取物的化学成分进行分离,应用MTT法检测各组分对HepG-2、SGC-7901及C6细胞增殖的影响。[结果]蛇六谷石油醚萃取物经硅胶柱层析分离后,得到7个组分;MTT法实验结果显示石A和石B组分对HepG-2、SGC-7901及C6细胞均有较明显的抑瘤作用,其中以石B组分抑瘤作用最强。[结论]蛇六谷石油醚萃取物经硅胶柱层析分离得7个组分中石B组分抑瘤作用最强。     

雷公藤柱层析中段和末段组分的急性毒性实验

目的:比较雷公藤柱层析中段和末段组分对小鼠急性毒性和大鼠急性肝损伤的影响,评价中段和末段组分的毒性强弱和毒性物质基础,初步探讨中段和末段组分中成分与毒性的关系。方法:HPLC法测定中段和末段组分中6个有效成分(毒性成分)的含量。采用经典的急性毒性实验方法,Bliss法计算半数致死量(LD_(50))。SD大鼠单次灌胃中段和末段组分,观察急性肝损伤情况。给药后48 h眼眶采血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活力,肝脏HE染色,光镜下观察肝组织形态学改变,原位末端转移酶标记技术(TUNEL染色法)检测中段和末段组分对肝细胞凋亡的影响。结果:中段和末段组分中所测成分的含量差异较大,LD_(50)分别为297.551、558.578 mg·kg~(-1)。大鼠灌胃后造成不同程度的急性肝损伤,与正常对照组比较,中段组分的高、低剂量组和末段组分的高剂量组均能明显升高大鼠血清中AST和ALT活性(P0.01),明显诱导大鼠肝细胞凋亡(P0.01)。结论:雷公藤柱层析中段组分毒性强于末段组分,毒性物质基础以二萜、生物碱类为主,毒性主要表现为急性肝损伤,毒性成分与毒性存在量效关系。     

江浙蝮蛇蛇毒中神经生长因子的分离新方法探讨

为从江浙蝮蛇蛇毒中分离出神经生长因子,采用 CM-Sepharose FF 及 Sephacryl S-200柱层析方法进行了分离纯化,从中分离出一种组分。该组分经鸡胚背根神经体外培养证明具有促进神经节神经纤维生长的活性,证实为神经生长因子。经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为一条区带,其分子量约为27000,该试验结果表明用此种方法从江浙蝮蛇中提取神经生长因子是简便可行的。