RNA干扰及其在胶质瘤基因治疗中的应用

RNA干扰（RNA interference。RNAi）是双链RNA（double—stranded RNA，dsRNA）降解特异性靶基因转录出的mRNA。从而抑制靶蛋白表达的现象。自从二十世纪九十年代发现RNAi这一现象以来，RNAi已被广泛应用于研究基因功能、信号转导通路和基因治疗等方面。随着分子生物学、分子遗传学等学科的发展．发现了许多与肿瘤发生、发展和预后密切相关的基因。经过大量临床前期试验表明，针对特异性靶基因的小干扰RNA（short／small interfering RNA．siRNA）治疗胶质瘤是行之有效的。为基因治疗胶质瘤提供了新的思路。[第一段]     

动态增强MR灌注成像在脑胶质瘤诊断中的价值

目的　探讨动态增强T2 WMR灌注成像在脑胶质瘤术前分级预测及鉴别诊断中的价值。资料与方法　有病理或追踪结果的 4 8例脑病变患者 ,其中胶质瘤 2 5例 (高、低级别胶质瘤分别为 16例和 9例 ) ,非胶质瘤病变 2 3例。全部病例均行常规T1WI、T2 WI和EPI SE序列动态增强MR灌注成像。计算每个病灶的最大相对脑血容量 (rCBV)比值 (病灶最大rCBV/对侧正常脑白质rCBV)。分析胶质瘤的最大rCBV比值与其组织学级别的关系 ,并比较胶质瘤与非胶质瘤的灌注异常及常规MRI强化表现。结果　高级别胶质瘤 ( 16例 )的最大rCBV比值为4 .6 0± 1.98( 2 .5 5～ 9.2 2 ) ,低级别胶质瘤 ( 9例 )的最大rCBV比值为 1.86± 1.5 2 ( 0 .85～ 5 .72 ) ,经t检验 ,两组之间有显著统计学差异 (P <0 .0 1)。脑膜瘤、转移瘤、血管母细胞瘤、淋巴瘤均显示有局部高灌注 ,最大rCBV比值为5 .35± 2 .39( 3.15～ 12 .39) ,而有强化表现的脑梗死、脑炎性灶及放射性脑损伤表现为低、等灌注 ,最大rCBV比值为1.2 7± 0 .36 ( 0 .85～ 1.72 )。结论　MR灌注成像在胶质瘤的术前影像学分级预测上有重要价值 ,在脑胶质瘤的某些鉴别诊断上亦具有一定的参考价值     

星形胶质细胞瘤伽玛刀治疗的疗效与影响因素

目的分析星形胶质细胞瘤伽玛刀(γ-刀)治疗的疗效与影响因素.方法回顾性分析48例星形胶质细胞瘤病人的γ-刀治疗结果.以性别、有无普通放疗经过、有无化疗经过、边缘剂量、病灶的平均直径、病变的病理等级、影像学上有无相对较清楚的边界为治疗结果影响因素,判定标准以病灶缩小为有效,采用logistic回归模型,确定多因素条件下治疗结果的影响因素.结果有效32例(66.7%),logistic回归模型分析表明:病理等级和病灶平均直径为与肿瘤控制有关的影响因素.结论γ-刀对星形胶质细胞瘤的治疗有一定的意义.     

瘤床处应用化疗药物治疗脑胶质瘤

目的 :研究瘤床处直接应用化疗药物治疗脑胶质瘤的临床效果。方法 :1996年 12月到1998年 3月共收治 2 1例脑胶质瘤病人 ,经过手术和术后放疗免疫治疗 ,并给予血管内化疗 ,随访观察疗效 ;与 1998年 4月到 2 0 0 0年 7月后收治的 2 5例脑胶质瘤病人给于同样的综合治疗 ,但化疗方法不同 ,后者是在脑胶质瘤手术中用化疗药冲洗处理瘤灶 ,术后定期用化疗泵直接注入化疗药于瘤床处进行治疗观察、比较。结果 :改变化疗方案后的病人生存年限得以延长 ,生存质量明显改善。结论 :瘤床处直接应用化疗药避开了血脑屏障 ,降低了全身血药浓度和毒副作用 ,提高了化疗在瘤灶处的浓度和作用时间 ,从而提高了脑胶质瘤的治疗效果。     

反义AKT2 RNA抑制U251胶质瘤细胞生长的体内外研究

目的 研究反义AKT2RNA对U251人脑胶质瘤细胞在体内外的生长抑制效用。方法 将逆转录病毒pLXSN为载体的反义AKT2构建体转染U251人脑胶质瘤细胞系，应用蛋白印记确定基因转染前后AKT2的表达水平。流式细胞法与Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转染前后的增殖活性。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导pLXSN、pLXSN-AS-AKT2基因治疗对U251细胞生长抑制作用。在28d的观察期内定期测量皮下肿瘤体积，对肿瘤标本应用免疫组化的方法进行AKT2和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达比较。结果 脂质体介导pLXSN-AS-AKT2可显著抑制U251细胞AKT2表达。与对照组和pLXSN转染组比较，细胞周期分析结果表明AK—AKT2转染组进入S期的细胞数减少了8．5％～8．9％，而进入G0＋G1期细胞则增加了7．9％～8．6％。Matrigel基质生长实验显示对照组和pLXSN转染组细胞呈正常形态贴壁生长，而AS～AKT2转染组细胞不能贴壁生长，呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示pLXSN-AS-AKT2显著抑制皮下肿瘤生长，组织病理学分析显示AS-AKT2转染组AKT2表达下降而GFAP表达上调。结论 体内外实验证明反义AKT2方法在抗胶质瘤增殖方面作用重要，AKT2可作为基因治疗胶质瘤的优选靶标。     

MR灌注成像在评估脑胶质瘤放疗效果中的应用

目的探讨MR灌注成像在评估脑胶质瘤放疗疗效中的应用价值。方法对25例脑胶质瘤术后患者于放疗前及放疗后3、6个月行MR灌注成像及常规MRI检查。由灌注数据获取脑血容量（CBV）图和脑血流量（CBF）图。计算出病灶的最大相对局部脑血容量（rCBV）值和最大相对局部脑血流量（rCBF）值。结果25例脑胶质瘤术后放疗前肿瘤区的rCBV值和rCBF值分别为6．32±2．14和5．49±1．98，与正常脑组织的2．58±1．21和2．17±1．19相比，显著升高（P〈0．01）。其中11例放疗后rCBV值和rCBF值与放疗前相比，显著下降（P〈0．01），其中5例证实为放射性脑坏死；另14例放疗后rCBV值和rCBF值与放疗前相比，有不同程度升高，但无统计学意义（P〉9．05）。其中7例证实为肿瘤伴部分放射性坏死组织，2例死亡，5例再次行放射治疗取得较好疗效。结论MR灌注成像可作为评估脑胶质瘤放疗疗效的一项重要指标。并有助于下一步治疗方案的制定。     

survivin基因与胶质瘤研究进展

细胞凋亡受多个基因的调控，其中抑制凋亡的基因主要包括bcl-2基因家族和凋亡抑制蛋白(IAP)基因家族，survivin基因是IAP家族新成员,在各种胶质瘤中高表达，并能强烈抑制胶质瘤细胞的凋亡。survivin在胶质瘤中的研究表明它是一种有效的判断胶质瘤患者预后的指标，并有望成为胶质瘤基因治疗的新靶点。     

星形细胞瘤瘤周水肿区立体定向活检组织的超微结构研究

目的探讨星形细胞瘤瘤周脑水肿的发生机制。方法对15例星形细胞瘤瘤周脑水肿的宽度进行分级：一级0～20mm、二级21～40mm、三级〉40mm。结合CT平扫及增强扫描的影像，应用立体定向技术，对15例星形细胞瘤瘤体、瘤周水肿区及正常脑组织的活检标本进行电镜观察比较。结果CT增强扫描可强化，瘤周脑水肿明显的病人，其瘤体及瘤周水肿区毛细血管超微结构均有不同程度的改变。毛细血管的分布和结构变化，影响着瘤周水肿区的形态，瘤体毛细血管的明显异常，出现于大范围瘤周水肿区的病例。CT增强扫描无强化，瘤周脑水肿不明显的病人，毛细血管超微结构与正常脑组织相似。结论伴有明显瘤周脑水肿的星形细胞瘤，其瘤体及瘤周水肿区毛细血管超微结构均有不同程度的改变，而瘤周水肿的产生，是瘤体及瘤周水肿区毛细血管超微结构改变共同作用的结果。     

加热及增加细胞内氧自由基水平对恶性胶质瘤细胞生物学特性的影响

本文就加热及同时增加细胞内氧自由基水平对恶性胶质瘤细胞存活、增殖和细胞间隙连结通讯的影响做初步观察。用Ｍ．Ｔ．Ｔ法测定胶质瘤细胞存活率；用Ｋｉ－６７抗增殖细胞核抗原单克隆抗体，通过免疫组织化学ＡＢＣ染色分析胶质瘤细胞的增殖活性；用划痕染料示踪技术观察胶质瘤细胞的细胞间隙连结通讯。结果表明，Ｈ２Ｏ２和３ＡＴ能增强加热对胶质瘤细胞存活与增殖的抑制作用，促进胶质瘤细胞间隙连结通讯的改善，存在着明显的剂量和时间效应。实验结果提示，通过内外源性增加胶质瘤细胞内的氧自由基水平，将有助于强化加热治疗胶质瘤效果，并可以减少加热的剂且，降低副作用。