一种简单、稳定、可靠的屏氧酶1基因多态性分析法

目的：建立一种简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。方法：取外周静脉血100μl，用ROSE法提取基因组DNA，用两对引物：P192F 5′-TAT TGT TGC TGT GGG ACC TGA G-3′,P192R 5′-CAC GCT AAA CCC AAA TAC ATC TC-3′；P55F 5′-GAA GAG TGA TGT ATA GCC CCA G-3′,P55R 5′-TTT AAT CCA GAG CTA ATG AAA GCC-3分别进行PCR扩增，用限制性内切酶AlwI,NlaⅢ对两种PCR产物分别进行酶切，3％琼脂糖凝胶电泳。结果：扩增的两个PCR产物在192、55多态性位点大小分别为99bp、170bp。Alw I酶切后，凝胶电脉得到完全酶切（66bp,33bp)，部分酶切（99bp、66bp、33bp)，未被酶切（99bp)三种类型DNA片段（RR，QR，QQ基因型）；NlaⅢ酶切后，凝胶电脉得到部分酶切（170bp,126bp,44bp)，未被酶切（170bp)两种类型DNA片段（LM，LL基因型）。经双盲重复检测，结果一致。应用此方法对胃癌患者血样标本检测，发现其PON1基因多态性在192位点频率较高。结论：采用一步PCR－RFLP技术可以建立简单、稳定、可靠的PON1基因多态性分析法。     

二乙基亚硝胺诱导大鼠肝细胞癌过程中明胶酶的动态变化

目的：观察肝癌形成过程中明胶酶表达（蛋白及mRNA水平）的动态变化，探索明胶酶在肝癌生长浸润中的作用。方法：应用免疫组化法、明胶酶谱法和RT-PCR法对大鼠肝癌形成过程中各期明胶酶表达情况进行观察，并与正常对照组进行比较分析。结果：正常肝组织及肝硬化组织内明胶酶有表达，肝癌形成后主要在癌细胞内表达；明胶酶原在正常肝组织中有低表达，诱癌过程中呈持续增高趋势；明胶酶-2mRNA与其酶蛋白表达趋向一致。结论：在肝癌形成过程中明胶酶转录和翻译水平均呈持续增高趋势。     

ELISA法检测可溶性人类白细胞抗原—I及广东人参考值的测定

OBJECTIVE: To explore a method for quantitative detection of soluble human leukocyte antigen class I(HLA-I) antigens, with the assistance of which we attempt to define the reference value of the antigen in the population of Guangdong Province. METHODS: Sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was employed with W6/32 monoclonal antibody serving as the solid phase antibody and beta2 microglobulin antibody as the first antibody. HRP-labeled second antibody and the substrate were added for enzyme-catalyzed coloring. On the basis of the standard curve obtained by sHLA-I standard reagent in serial dilution, the concentration of sHLA-I antigens in the samples of 60 normal subjects from the population of Guangdong province was detected. RESULTS: The sensitivity of this assay was 2.84 ng/ml with variation coefficients of 5.80% within the same batch and 9.00% between batches. The recovery rate ranged from 98.57% to 100.15%. The level of sHLA-I antigens in normal individuals was 699.54+/-360.10 ng/ml. CONCLUSION: Sandwich ELISA is sensitive, specific and stable in the detection of sHLA-I.     

二十四员大环双核铜(Ⅱ)配合物的合成及其对超氧化物歧化酶的模拟--Ⅱ配合物的歧化超氧离子的活性

用核黄素光照法测定自合成的2，6-二乙酰基吡啶缩3-氧杂戊烷1，5-二胺大环，H20、im^-、N3^-及SCN^-为桥基的双核铜（Ⅱ）配合物的超氧化物歧化酶活性，它们均在10^-5-10^-7mol/L的浓度范围内具有50%以上抑制率。     

磷酸二酯酶同工酶——哮喘治疗的新靶点

茶碱 ,尽管用于临床治疗支气管哮喘已有半个多世纪的历史 ,目前对其药理作用的机制仍然存有很大争议。它在体外实验中非选择性地抑制磷酸二酯酶 (ＰＤＥ)的所有同工酶 ,故传统认为茶碱是通过抑制ＰＤＥ ,减少ｃＡＭＰ的水解而起作用。然而近几年研究结果显示 ,体外实验的茶碱浓度远远高于其有效的血浆浓度 ,治疗浓度的茶碱对ＰＤＥ的抑制率仅为5 %～ 2 0 % ,而且它在小剂量下也具有抗炎和免疫调节的作用。此外 ,它还能拮抗腺苷引起的支气管痉挛 ,刺激肾上腺髓质和肾上腺以外的嗜铬细胞释放儿茶酚胺 ,干扰呼吸道平滑肌细胞内钙离子移动 ,兴奋…     

金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛的效益分析

目的 探讨金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛的社会效益和经济效益。方法 对24497例首次无偿献血者用金标法和ELISA法进行HBsAg检测，结果 金标法用于首次无偿献血者献血前HBsAg初筛后，避免了2118人共42.36万毫升不合格血液的无效采集，加工、检验、贮存、报废和运输，因HBsAg阳性而报废的血液由9.90%降低至1.37%，从每1万名报名参与献血的首次无偿献血者中节省了采集和检测的费用约6万元。从每年的初筛工作中可节省1个多月的时间和人力，结论 可避免血液资源的浪费，有效地预防交叉感染。     

凝固酶阴性葡萄球菌致医院内感染的危险因素分析

凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)院内感染日益增多。该类菌为条件致病菌,它可产生溶血素、杀白细胞素、肠毒素,并且有吞噬作用。近年来,其耐药性逐渐增加。北京军区总后医院CNS检出率从1999年的34%上升到2000年的52%,且出现多重耐药现象。血培养菌株分离率CNS在成人及儿童组均占首位。上     

遗传性中性粒细胞髓过氧化物酶缺乏

人的中性粒细胞（PMN），用罗氏染色（Romanowsky stain）在光学显微镜下观察，可见胞浆中含有两种颗粒：嗜天青颗粒（又称初级颗粒）和特异性颗粒（又称次级颗粒）。嗜天青颗粒为粗大的紫红色，在原始粒细胞阶段很少或见不到，至早幼阶段含量最丰富。随着细胞的成熟，酸性粘蛋白合成增加，并与嗜天青的碱性颗粒形成复合物，从而失去嗜天青的特性。故自中幼阶段以下，嗜天青颗粒已变得不明显，甚至已见不到，而让位于细小、不规则的特异性颗粒。然而，在电子显微镜下，即使成熟的PMN，嗜天青颗粒仍可见到。[第一段]