一种高度敏感的改良的IL—1检测方法

采用CTLL-2检测IL-1诱导小鼠胸腺瘤细胞系EL_4产生IL-2活性,建立了一种间接检测IL-1的方法。通过对多种影响因素进行探讨,选择了较适的诱导血清浓度,细胞浓度,诱导时间和转移诱导上清稀释度,从而使检测IL-1的敏感性达10~(-3)～10~(-4)U/ml(2.5～25×10~(-4)Pg/ml,约为小鼠胸腺细胞检测方法的10~2～10~3倍),整个检测流程可在40小时内完成。若用CTLL-2和EL_4细胞同时培养的一步法检测,敏感性约为10~(-1)U/ml,但30小时内可完成检测。此法不受高浓度rHuTNF-α、rHuTNF-β、rHuIL-6干扰,IL-2、ConA、PHA、LPS和SEB对检测系统只有较弱的影响,但A23187可明显地干扰检测系统。因此,本方法可用于基础和临床研究过程中不同来源的IL-1生物学活性检测。     

当归香豆酸-3-羟化酶基因ASC3H的克隆及表达模式与阿魏酸含量相关性分析

目的：对当归中香豆酸-3-羟化酶基因（C3H）全长进行克隆,进行生物信息学与基因表达模式分析,结合当归根不同组织部位阿魏酸的含量,推测ASC3H基因功能。方法：基于前期转录组测序结果,通过实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）克隆全长cDNA序列,运用生物信息学方法分析该序列特征,并利用Real-time PCR和高效液相色谱法（HPLC）分别测定当归不同组织中ASC3H基因表达量及阿魏酸含量。结果：克隆获得当归ASC3H全长基因（登录号MN2550298）,开放阅读框（ORF）长度为1 530 bp,编码509个氨基酸,理论相对分子质量为57.86 kDa,等电点8.36,为不含信号肽的亲水性不稳定蛋白,定位于叶绿体中,有跨膜区,具有多个磷酸化位点,含有细胞色素P450的保守结构域CGYDWPKGYGPIINVW＿P450(383～399 aa);多重氨基酸序列比对分析结果显示ASC3H与其他植物的C3H基因具有较高相似性,并与同科植物大阿米芹的同源性最高;Real-time PCR结果显示ASC3H基因在当归不同组织的表达量不同;HPLC结果表明阿魏酸成分在当归根...     

ABCB4基因突变合并巨细胞病毒感染致婴儿胆汁淤积症的诊治分析并文献复习

目的探讨ABCB4基因突变合并巨细胞病毒(CMV)感染致婴儿胆汁淤积症(IC)患儿的临床特征、基因检测结果和诊治方案。 方法选择2019年8月3日,于中山大学附属第七医院就诊并确诊为ABCB4基因突变合并CMV感染致IC的1例婴儿(女性,生后9个月)为研究对象。回顾性分析其临床病例资料,包括临床特征、实验室检查结果及基因检测结果。同时,检索国内外数据库中ABCB4基因突变所致IC患儿的相关文献,并进行文献复习。本研究遵循的程序符合2013年新修订的《世界医学协会赫尔辛基宣言》要求。 结果本例IC患儿在本院诊治结果如下。①病史采集：系G₂P₂,足月顺产,外观无异常,否认新生儿黄疸病史,生后2个月龄时出现皮肤及巩膜呈暗绿色,伴反复呕奶,当地医院治疗并诊断为胆汁淤积性肝病、CMV感染和泌尿系统感染,抗病毒治疗2周后好转出院。出院时,其血清总胆汁酸(sTBA)为152.8 μmol/L,CMV-DNA<4×10² copies/mL,口服熊去氧胆酸胶囊10 mg/(kg·d)治疗后,皮肤暗绿色逐渐消退,大、小便正常。出院后定期监测肝功能,sTBA、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)仍然较正常值增高。②实验室检查：血清CMV免疫球蛋白(Ig)G抗体呈阳性、CMV IgM抗体呈阴性,CMV-DNA<55×10² copies/mL。基因检测结果：患儿及其父亲均携带ABCB4基因杂合变异。治疗结果：经口服熊去氧胆酸胶囊10 mg/(kg·d)及谷胱甘肽片0.1 g/次× 3次/d治疗后,对患儿定期复查sTBA、GGT。随访到18个月龄时,其各项指标逐渐恢复正常范围。③文献复习结果：共计检索到8篇国内外报道的因ABCB4基因突变引起IC相关文献,纳入14例IC患儿,均被诊断为进行性家族性肝内胆汁淤积3型(PFIC3),伴肝大,sTBA、GGT水平升高等。14例IC患儿中,共检测到ABCB4基因突变位点20个。其中,9例IC患儿接受熊去氧胆酸治疗,7例随访结果显示临床症状及实验室检查指标有所好转。 结论携带ABCB4基因突变,可引起IC。对于sTBA升高、肝酶异常的病因不明确、治疗效果不佳IC患儿,建议完善基因检测进一步排查ABCB4基因突变所致胆汁淤积症。     

妊娠高血压综合征患者血浆一氧化氮、一氧化氮酶及内皮素含量的测定及意义

目的：探讨妊娠高血压综合征患者血浆一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）与内皮素（ET）水平的变化,与妊高征发病的关系。方法：采用硝酸根还原酶法及酶法、放射免疫法,对40例妊高征患者（妊高征组）、50例正常晚孕者（晚孕组）,在治疗和临产前取血测定NO、NOS、ET的含量。结果：妊高征组NO、NOS水平明显低于对照组,有显著差异（P＜0．01）。不同程度妊高征组患者血浆NO、NOS水平随病情加重而降低,有显著差异（P＜0．05）。妊高征组血浆ET水平明显高于正常晚孕组,病情越重其值越高。不同程度妊高征之间及中、重度妊高征与正常晚孕组间有显著差异（P＜0．05）。结论：ET／NO平衡失调可能是妊高征的发病环节之一,因此,NO－NOS水平及ET／NO比值可作为判断妊高征病情程度和预后的一个新标志物。     

HPLC法测定双扑伪麻片中乙酰氨基酚和盐酸伪麻黄碱的含量

双扑伪麻片是一种抗感冒和抗过敏药 ,其主要成分是对乙酰氨基酚、盐酸伪麻黄碱。部颁标准 (试行 )已收载 ,其含量测定采用的方法分别为多次提取后紫外法 ,操作过程较繁锁 ,容易带入误差 ,为此 ,建立了简单、灵敏、准确的 HPL C测定方法。1.仪器与试药日本岛津 L C- 10 AD型高效液相色谱仪 ,SPD- 10 A型紫外检测器 ,C-R6 A型数据处理机 ;双扑伪麻片由海南三叶制药厂有限公司提供 ;盐酸伪麻黄碱和对乙酰氨基酚对照品由中国生物制品药品检定所提供 ;甲醇为色谱纯 ,其他试剂均为分析纯。2 .实验条件色谱条件及系统适应性试验　色谱柱 :OD…     

男性膀胱癌患者血清性激素水平的检测

目的　探讨性激素在膀胱癌发病中的意义。方法 :采用放射免疫法检测 31例男性膀胱癌患者及 2 7例同年龄正常人对照组血清中的雌二醇 (EstradiolE2 )、孕酮 (ProgesteroneP)及睾酮 (TestosteroneT)水平。结果 :男性膀胱癌患者血清E2 、P、T分别为 44.98± 2 0 .96pg ml( x±s) ,0 .37± 0 .18ng ml( x±s) ,6 .2 5± 2 .37ng ml( x±s) ,而正常对照组E2 、P、T分别为 5 6 .0 1± 13.5 0pg ml( x±s) ,1.14± 0 .37ng ml( x±s) ,5 .15± 1.37ng ml( x±s) ,两者比较膀胱癌组T明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;而E2 、P明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :膀胱癌的发生可能与性激素代谢失衡有一定的关系     

磁性分离酶标技术检测T3、T4、TSH、FT3、FT4

磁性分离酶标免疫技术是80年代中期Serono诊断中心发明的一种非同位素免疫检测的先进技术,称为磁性抗体免疫技术(MAIA)。使双抗体夹心酶联免疫技术在游离型标记抗体和标记抗原——抗体复合物分离中具有分离完全和快速的优点。我们采用Seroeyme酶联免疫双抗体夹心检测系统,分析测定T3、T4、TSH、FT3、FT4,现将检测结果报告如下。     

血清硝酸盐的快速测定

目的建立一种血清硝酸盐的快速测定方法.方法血清经去蛋白后,直接在酸性条件下用麝香草酚显色分光光度法测定.结果方法的检测下限为0.05μg,相对标准差为4.6%～9.6%,回收率为90.0%～95.9%(平均为93.6%).血清硝酸盐氮含量为0.13±0.011μg时,批间变异系数为8.6%.结论本法快速、简便、灵敏、特效性好,适用于血清中NO3-测定.     

肝病患者血清IV型胶原、透明质酸及甘胆酸检测的价值

为探讨肝病患者血清IV型胶原、透明质酸和甘胆酸水平与肝纤维素化及肝损害的关系,采用放射免疫分析法对163例肝病患者及60例正常对照组进行上述3项指标的检测。结果：肝病患者的3项测值均增高,分组统计结果显示增高的程度与肝纤维化的严重程度平行。结论:对肝病患者进行血清IV型胶原、透明质酸、甘胆酸动态联检有重要的临床意义。     

槐花的花及花蕾显微定量与含量测定的比较研究

目的 探讨显微定量在中药及中成药质量控制中的应用。方法 用显微定量法和有效成分的含量两方面对槐花、槐米每毫克特征物和芦丁含量比较。结果 槐花、槐米显微特征物具有显著差异,用紫外分光光度法测定芦丁含量,有显著差异。结论 槐花、槐米的差异是由采收时间、用药部位因素引起的。