新色原底物的合成及α—L岩藻糖苷酶速率检测法

目的 合成α－Ｌ岩藻糖苷酶新色原底物２－氯－４－硝基苯－α－Ｌ－岩藻糖苷,并以此底物为基础建立α－Ｌ－岩藻糖苷酶的速率检测法,方法 以Ｌ－岩藻糖为原料,采用Ｗｅｓｔｐｈａｌ－Ｆｅｉｅｒ合成法制备底物２－氧－４－硝基苯－α－Ｌ岩藻糖苷,研究α－Ｌ－岩藻糖苷酶的新底物２－氯－４－硝基苯－α－Ｌ－岩藻糖苷,首次建立了α－Ｌ岩藻糖苷酶速率检测法。血清α－Ｌ岩藻糖苷酶作用于此底物的最适ｐＨ为４．８,米氏常数     

巨齿蛇毒发色底物法检测血浆凝血酶原活性在肝病诊断中的应用

评估血浆凝血酶原活性（ＦⅡ：ＣＡ）在肝病诊断中的应用价值。方法采用巨齿蛇毒发色底物法（ＥＣＶＣＳＡ）检测了１００例献血员和４００例各型肝炎的ＦⅡ：ＣＡ。结果ＦⅡ：ＣＡ正常参考范围为（８５．０～１３１．０）％;急性肝炎、慢性肝炎轻度和肝硬化Ａ级为（８４．０～７２．５）％,轻度下降;慢性肝炎中、重度和肝硬化Ｂ级为（７２．４～５４．６）％,中度下降;重症肝炎和肝硬化Ｃ级为（５４．５～２５．９）％,重度下降。当ＦⅡ：ＣＡ低于３０％,肝病患者存活率为４．０％,而高于５０％存活率为９２．９％。结论在肝病中对ＦⅡ：ＣＡ的测定可估计病情、评价疗效和判断预后。     

胰岛素受体底物—2和2型糖尿病

胰岛素受体底物－2（IRS－2）作为接头蛋白,主要连接胰岛素受体和含SH2区蛋白,介导胰岛素、胰岛素样生长因子－1等信号通道,而调节细胞新陈代谢、生长和分化。剔除IRS－2基因的纯合子动物（IRS－2^-/-)具有2型糖尿病的全部特征,因此IRS－2基因被确定为2型糖尿病的候选基因。人类IRS－2基因有两个内含子,孕酮可以增强IRS－2的转录。     

OLETF大鼠肝脏、肌肉、脂肪组织中胰岛素受体底物1的蛋白表达

各种靶组织的胰岛素抵抗和胰腺 β细胞分泌功能受损是导致 2型糖尿病的主要原因〔1〕,但机制不明 ;为探讨 2型糖尿病胰岛素抵抗的分子机制 ,以一种自发发病的 2型糖尿病模型—ＯＬＥＴＦ大鼠为对象 ,研究其肝脏、骨胳肌、脂肪组织内胰岛素信号传导分子胰岛素受体底物 1(ＩＲＳ 1)蛋白表达水平。一、材料和方法1.实验动物 :ＯＬＥＴＦ大鼠 (由日本大冢制药公司研究所提供 4周龄雄性大鼠 ,在北京医科大学实验动物中心普通饲料喂养至 16周 )为研究对象 ;Ｗｉｓｔａｒ大鼠为对照组。2 .口服葡萄糖耐量试验〔2〕:试验前禁食 14小时 ,先取空腹眼眶…     

胰岛素抵抗的分子机制——胰岛素受体底物-1丝氨酸磷酸化和p85α表达增加

尽管胰岛素抵抗（IR）与糖尿病（DM），肥胖，高血压和心血管疾病关系密切，但其分子机制并不完全清楚。在细胞水平，IR是指胰岛素信号传导能力的减低，这种信号传导从胰岛素受体向下到达胰岛素作用的终未底物，涉及到细胞功能的多种代谢和促有丝分裂方面。     

胰岛素受体底物2基因多态性与2型糖尿病及相关代谢的关联分析

目的 了解中国西南地区汉族人群胰岛素受体底物2(IRS-2)基因1057G/A多态性的分布;探讨该基因多态性与2型糖尿病的相关性;探讨2型糖尿病患者及糖耐量受损(IGT)患者的IRS-2基因型与糖脂代谢、胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性,对929例重庆及周边地区汉族人(包括462例2型糖尿病患者、164例IGT患者和303名正常对照者)的IRS-2基因1057G/A多态性进行测定,同时进行人体测量学、血脂、血糖、胰岛素、超敏C反应蛋白及非酯化游离脂肪酸的检测.分别用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和处置指数(DI)评估胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能.结果 糖尿病组A等位基因频率低于对照组(0.326 vs 0.388,χ2=6.19,P=0.01);AA基因型频率低于对照组,而GG基因型频率高于对照组(分别为0.104 vs 0.135,0.452 vs 0.360,χ2=6.80,P＜0.05).Logistic回归分析表明GG基因型为2型糖尿病的危险因素,OR值为1.461(95%CI:1.082～1.973,P＜0.05).糖尿病组GG型的空腹血糖(FPG)和HOMA-IR值明显高于AA型(P＜0.05).IGT组GG型甘油三酯、FPG、空腹胰岛素、超敏C反应蛋白和HOMA-IR高于AA型(P＜0.05);而DI指数低于AA型(P＜0.05).结论 IRS-2基因1057G/A多态性可能与中国西南地区汉族人群2型糖尿病的发生有关.     

胰岛素受体底物1基因Gly972Arg多态性与海南黎族2型糖尿病的关系

目的 研究胰岛素受体底物1(IRS-1)基因Gly972Arg突变与海南黎族2型糖尿病(T2DM)的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,对78例海南黎族T2DM患者(T2DM组)和78例糖耐量正常人群(对照组)进行IRS-1基因Gly972Arg突变位点基因型检测.结果 对照组IRS-1基因Gly972Arg突变频率5%,T2DM组未发现该基因突变.结论 IRS-1基因Cly972Arg突变可能不是海南黎族T2DM的重要遗传因素.     

高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对NIT-1细胞增殖、胰岛素分泌水平及IRS-2表达的影响

目的探讨高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对胰岛B细胞增殖、胰岛素分泌功能的影响及机制。方法取对数生长期NOD鼠胰岛β细胞株NIT-1,以胰酶消化离心、收集细胞,按5×10^4个细胞／孔移至24孔培养板,继续培养48h后分别用葡萄糖浓度为5．6—27．6mmol／L的RPMI1640培养基处理,24h后随机分为对照组、罗格列酮1～3组,分别加入浓度为0～10^-5mol／L的罗格列酮培养;分别于干预24h和48h时收集细胞培养上清液,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,放射免疫法检测胰岛素水平;Western blot技术检测胰岛素受体底物（IRS）-2蛋白表达水平。结果①四组细胞增殖活性及胰岛素分泌水平均随葡萄糖浓度升高而降低,其中罗格列酮1-3组细胞增殖活性和胰岛素分泌量均显著高于对照组（P〈0．05、0．01）。②罗格列酮3组在葡萄糖浓度为22．5、27．6mmol／L培养24h及葡萄糖浓度为11．1mmol/L培养48h时胰岛素分泌水平均显著高于对照组（P〈0．05、0．01）;不同浓度葡萄糖培养下罗格列酮3组细胞中IRS-2蛋白水平均显著高于对照组（P〈0．05、0．01）,且变化趋势同上。结论在高浓度葡萄糖条件下罗格列酮可促进NIT-1细胞增殖、胰岛素分泌,机制可能与其上调IRS2表达有关。     

高糖对大鼠脂肪细胞胰岛素信号蛋白磷酸化的影响

目的 探讨高浓度葡萄糖（高糖）对原代培养大鼠脂肪细胞的葡萄糖转运活动、胰岛素信号蛋白磷酸化及表达的影响。方法 分离的大鼠脂肪细胞在5，10，15和25mmol/L葡萄糖中孵育24h，然后测定：糖转运活动；胰岛素受体（IR）、胰岛素受体底物（IRS）1、2及蛋白激酶B（PKB）的磷酸化；IRS1，IRS2，肌醇磷脂－3－激酶85亚单位（p85)和PKB的蛋白表达。结果 高糖抑制了这些细胞的葡萄糖转运活动，削弱了IR、IRS1的酪氨酸磷酸化及PKB的丝氨酸磷酸化；下调IRS1而上调IRS2蛋白表达。结论 高糖能抑制脂肪细胞的糖转运活动，诱导胰岛素抵抗。其作用机制与影响胰岛素信号蛋白多部位的磷酸化及蛋白表达有关。     

胰岛素受体底物1基因Gly972Arg多态性与2型糖尿病不相关

目的：探讨中国汉族人群胰岛素受体底物1（IRS－1）基因Gly972Arg多态性与2型糖尿病的关系。方法：选取102例2型糖尿病患者及102例糖耐量正常的患者配偶进行对照研究，应用聚合酶链反应－－限制性片断长度多态性的方法进行胰岛素受体底物1基因Gly972Arg多态性位点基因型检测。结果：IRS－1基因Gly972Arg突变频率在病例组和对照组均为2％，明显低于白人。结论：在中国汉族人群中，IRS－1基因Gly972Arg突变不是2型糖尿病的主要致病因素。