慢性疲劳应激对大鼠伏隔核一氧化氮合酶表达的影响

目的:探讨长时间游泳引起的疲劳应激对大鼠伏隔核(NAc)中神经元型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响.方法:采用成年雄性大鼠连续4周每天强迫游泳至力竭,用免疫组织化学方法结合图像处理测定伏隔核中nNOS的表达.结果:长时间强迫游泳应激可使大鼠伏隔核巾nNOS免疫细胞化学反应阳性神经元的数量(106.7%)、面积(150.2%)和灰度值(11.3%)显著增加.结论:nNOS参与疲劳应激的形成,一氧化氮在伏隔核对应激调节中起重要作用.     

西洋参茎叶总皂苷通过抑制内质网应激相关细胞凋亡减轻大鼠急性心肌梗死后心室重构

 目的： 研究西洋参茎叶总皂苷 (Panax quinquefolium saponin, PQS)对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心室重构的作用及其机制。方法： 健康雄性SD大鼠90只,随机分为假手术 (sham) 组、AMI组、牛磺酸 (300 mg·kg-1·d-1) 组及PQS (50、100和200 mg·kg-1·d-1) 组 (n=15)。结扎大鼠左冠状动脉前降支复制AMI模型。术后第2天开始,各用药组用饮用水10 mL·kg-1·d-1溶解药物灌胃,sham组及AMI组予等量饮用水灌胃。术后4周,超声心动图检测左室结构及功能变化;TTC染色法测定心肌梗死范围;比色法测定非梗死区心肌组织羟脯氨酸含量;TUNEL法检测非梗死区心肌细胞凋亡率,Western blotting检测内质网应激分子葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、钙网蛋白 (CRT)、C/EBP同源蛋白 (CHOP) 及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果： 与AMI组比较,PQS低、中、高剂量组左室收缩末期内径分别降低17.2%、20.3%和38.8%,左室舒张末期内径分别降低8.9%、9.0%和17.2%,左室收缩末期容积分别降低31.4%、38.5%和66.9%左室舒张末期容积分别降低18.2%、18.8%和34.2%,射血分数分别升高44.9%、60.1%和118.0%,左室短轴缩短率分别升高55.4%、71.0%和148.0%,梗死范围分别降低4.6%、39.5%和55.8% (均P<0.05);非梗死区心肌组织羟脯氨酸含量分别降低34.5%、35.9%和48.7% (P<0.01)。与AMI组比较,PQS 200 mg·kg-1·d-1组心肌细胞凋亡率降低27.3% (P<0.05),GRP78和CRT蛋白表达分别降低79.9%和80.8% (P<0.01),CHOP和Bax分别降低42.5%和53.1% (P<0.01),Bcl-2表达升高1.1倍 (P<0.01);上述保护作用的程度与内质网应激抑制剂牛磺酸相近 (P>0.05)。Spearman相关分析发现CHOP蛋白表达与心肌细胞凋亡率显著正相关 (r=0.797, P<0.01)。结论： PQS剂量依赖性减轻大鼠心肌梗死后心室重构,其机制与抑制CHOP介导的内质网应激凋亡通路有关。     

抗衰老Klotho蛋白减轻大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的:观察抗衰老Klotho蛋白对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用并探讨其作用机制。方法:建立大鼠乳鼠心肌细胞H/R模型,并将心肌细胞分为正常对照组、H/R模型组和不同浓度(0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L)Klotho作用H/R组。观察各组心肌细胞H/R前后搏动频率变化,利用MTT方法检测细胞存活率;测定各组心肌细胞H/R后LDH、CK、AST的漏出量及MDA含量、SOD活性;流式细胞术检测各组心肌细胞的凋亡率;real-time PCR检测各组心肌细胞中内质网应激标记及凋亡相关分子GRP78、CRT和CHOP和caspase-12 mRNA的表达情况;Western blot法检测心肌细胞内内质网应激凋亡蛋白CHOP和caspase-12蛋白表达及Akt磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,H/R模型组中心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著下降,细胞凋亡率显著升高(P0.05);LDH、CK、AST和MDA含量升高而SOD活性显著降低(P0.05);GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA表达显著增高(P0.05);CHOP和caspase-12蛋白表达随之增高而Akt的磷酸化水平显著降低(P0.05)。与H/R模型组相比,抗衰老Klotho蛋白作用H/R心肌细胞后,心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著升高,细胞凋亡率逐渐降低(P0.05),LDH、CK、AST和MDA含量下降而SOD活性显著增高(P0.05),GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA的表达逐渐降低(P0.05),CHOP和caspase-12蛋白表达也随之降低,而Akt磷酸化水平显著增加(P0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升H/R损伤后心肌细胞的存活率,抑制细胞凋亡,通过抵抗氧化应激和过度内质网应激反应发挥作用,并与激活Akt磷酸化有关。     

AGEs介导的糖尿病肾损伤机制及二甲双胍的干预作用

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病(diabetes mellitus,DM)的常见的慢性微血管并发症之一。慢性高糖状态下糖基化终末产物(AGEs)形成增加,诱导肾脏氧化应激和内质网应激,参与糖尿病肾病的发生与发展。二甲双胍是目前临床治疗糖尿病的最常用药物之一。越来越多的研究表明,二甲双胍除了最主要的降糖作用外,其尚可抑制AGEs形成和具有抗氧化作用,深入研究AGEs与DN的关系,有助于进一步了解DN的发病机制并对干预其发生和发展具有重要的指导意义。     

心理训练对战斗机飞行员军事应激损伤防护效果

目的：探讨军事应激条件下战斗机飞行员心理健康状况和心理训练对战斗机飞行员军事应激损伤防护的效果,为临床心理工作提供理论依据。方法：将参加重大演习任务的69名战斗机飞行员随机分为训练组和对照组,比较两组飞行员心理训练前后心理健康状况。结果：参演战斗机飞行员症状自评量表躯体化、强迫、焦虑、敌对、恐怖、偏执因子分显著高于军人常模（t＝3．753,2．219,3．141,2．032,2．060,2．772;P＜0．05）,心理训练后训练组躯体化、强迫、焦虑、敌对、偏执因子分显著低于对照组（t＝－2．656,－2．247,－2．244,－2．106,－3．181;P＜0．05）。结论：心理训练能够调节战斗机飞行员军事应激反应,改善其心理健康状况。     

MSK-1和CREB参与低氧预适应降低小鼠缺血性脑损伤

目的 探讨丝裂原和应激激活蛋白激酶1(MSK-1)及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在低氧预适应(HPC)保护小鼠缺血脑组织中的作用.方法 将健康成年雄性BALB/c小鼠随机分为4组:常氧假手术组(NS)、HPC假手术组(HS)、常氧缺血组(NI)和HPC缺血组(HI).利用已建整体HPC和大脑中动脉阻塞(MCAO)小鼠模型,并结合神经行为学评价、氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和蛋白印迹(Western blot)等技术,观察HPC对小鼠脑缺血损伤的影响,检测小鼠脑皮层不同缺血区域内MSK-1和CREB磷酸化水平和蛋白表达量的变化.结果 HPC可明显改善小鼠脑缺血后神经行为学表现,减小MCAO致脑缺血皮层梗死体积和水肿率;MCAO致小鼠脑局部皮层缺血后,其缺血核心区内MSK-1和CREB磷酸化水平明显下降(P<0.05);HPC可明显增加缺血半影区内MSK-1和CREB磷酸化水平(P<0.05),而MSK-1和CREB总蛋白表达量在缺血核心区和半影区内均无明显改变.结论 HPC可能通过提高缺血半影区内MSK-1及其底物CREB的磷酸化水平来降低小鼠缺血性脑损伤.     

地震后26个月灾区高三学生生命质量调查

目的调查汶川地震后26个月灾区高三学生生命质量。方法采取整群抽样的方法,用WHO生命质量量表简化版(WHOQOL-BREF)、创伤后应激障碍检查量表(PCL-C)和自编量表对559例灾区高三学生进行问卷调查。结果①灾区高三学生生命质量得分(12.78±3.13)低于常模(13.38±2.91),差异有统计学意义(t=-4.51,P<0.01);在生理、心理、社会关系领域均低于常模,差异有统计学意义(t=-18.61,-11.40,-3.03,P<0.05);②女性在生理、心理、社会关系领域均低于男性,差异有统计学意义(F=15.83,11.14,4.44,P<0.05);③有心理咨询需求和没有的学生在生理领域、心理领域、社会关系领域、环境领域和总的生存质量与健康状态方面都存在显著性差异(F=33.01,35.18,21.76,16.23,10.58,P<0.01);④PTSD高分组与低分组在生理领域、心理领域、社会关系领域、环境领域和总的生存质量与健康状态方面也存在显著性差异(F=73.89,77.92,17.11,36.94,45.19,P<0.01)。结论震后26个月灾区高三学生生命质量仍旧低,受心理健康水平影响,且女性低于男性。     

内质网应激与心血管疾病

内质网应激是细胞内一种适应性机制,持续或过强的内质网应激则诱导细胞凋亡,造成组织损伤.多项研究显示内质网应激是多种心血管疾病如动脉粥样硬化、缺血性心脏病、心肌肥大、心力衰竭及糖尿痛心肌病等发生、发展的共同通路,干预内质网应激可能成为心血管疾病治疗的新靶点.     

帕罗西汀和西酞普兰对急性应激障碍和创伤后应激障碍的不同预防作用

利用急性强迫游泳(FST)以及单次延长的应激(single-prolonged stress,SPS)模型分别模拟急性应激障碍(ASD)和创伤后应激障碍(PTSD),利用FST中不动时间作为应激障碍指标,评价两种5-HT再摄取抑制剂(SSRIs)帕罗西汀或西酞普兰对ASD和PTSD可能的预防作用。大鼠经过或不经过SPS处理(包括2h束缚,20min FST,休息15min后乙醚麻醉至意识丧失)后,每天通过饮用水给予不同剂量的帕罗西汀(20或40mg/kg)、西酞普兰(20或30mg/kg)或者正常进食水,连续14d后进行20minFST,计算该期限内每5min的不动时间,进行统计学分析,观察帕罗西汀和西酞普兰对动物行为的影响。SPS14d后大鼠的不动时间显著延长(0~5min:P<0.05,vs正常大鼠;5~10min:P<0.01,vs正常大鼠)。连续给予14d20mg/kg帕罗西汀显著缩短动物的不动时间(0~5、5~10和10~15min:P<0.05,vsSPS大鼠)。40mg/kg帕罗西汀以及20/30mg/kg西酞普兰显著缩短0~5min内的不动时间(P<0.05,vsSPS大鼠),但对其余时间点的不动时间没有影响(P>0.05,vsSPS大鼠),相反,40mg/kg帕罗西汀预处理还导致动物在15~20min内的不动时间显著延长。正常大鼠经过14d帕罗西汀或西酞普兰预处理后,0~5和5~10min的不动时间与饮用水对照相比没有显著差异。我们的实验结果提示较低临床剂量帕罗西汀和西酞普兰都可以用于预防ASD,较低剂量帕罗西汀预防PTSD的效果明显好于西酞普兰,同时我们的实验结果还提示对于ASD或PTSD的预防来说,增大抗抑郁药物的剂量,并不一定能取得期望的增加的疗效。     

三氧化二砷经内质网应激反应诱导K562/ADM耐药细胞凋亡

目的　探讨三氧化二砷（As2O3）能否通过内质网应激反应性凋亡途径诱发耐药白血病细胞凋亡。方法　采用细胞形态学和AnnexinV/PI 双染色法检测细胞凋亡,电镜观察凋亡细胞内质网和线粒体形态结构变化;流式细胞术（FCM）测定线粒体跨膜电位（Δψm）、细胞内Ca2+和细胞色素c（Cyt c）含量及caspase-3活性;Western blot法检测GRP78/Bip蛋白表达。结果　2、5 mol/L As2O3诱导K562/ADM细胞发生凋亡过程中,内质网明显扩张和脱颗粒,线粒体内外膜融合,嵴紊乱,肿胀,内膜扩张呈空泡样变。线粒体Δψm降低,细胞质Ca2+和Cyt c水平明显升高, caspase-3活性显著增强,GRP78蛋白表达增高。结论　As2O3可诱导K562/ADM细胞发生内质网应激反应,通过内质网-线粒体途径诱导耐药白血病K562/ADM细胞凋亡。