偏最小二乘-紫外分光光度法测定布渣叶中浸出物含量

目的:提出一种快速测定布渣叶浸出物含量的新方法。方法:运用偏最小二乘法(PLS)建立紫外光谱(UV)与浸出物含量测定值之间的多元校正模型,对未知样品进行含量预测。结果:校正模型相关系数(R2)为0.964 1。验证集预测平均相对偏差为1.73%。结论:PLS-UV法具有分析速度快、预测结果准确等优点,适合对组成复杂的中药浸出物进行快速分析,可用于布渣叶药材浸出物的快速测定。     

布渣叶黄烷酮-2-羟化酶基因cDNA克隆及其生物信息学和表达分析

目的从布渣叶中克隆黄酮碳苷合成途径关键酶黄烷酮-2-羟化酶(flavanone 2-hydroxylase,F2H)基因,构建原核表达载体,对其进行生物信息学和表达模式分析。方法根据布渣叶转录组数据中注释为F2H的Unigene设计特异性引物,利用PCR法扩增Mp F2H基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),基于在线工具对c DNA序列进行生物信息学分析。同时,依据F2H序列,设计特异引物,采用RT-q PCR方法对其在芽、叶、枝、花、果等组织中的表达进行测定。结果 Mp F2H基因ORF全长为1 557 bp(Genbank登录号KY652921),编码518个氨基酸;相对分子质量54 500,理论等电点5.49,含有信号肽,不含跨膜域,可能定位于叶绿体。同时,Mp F2H基因在不同组织中均有表达,其中在叶中表达量最高,在枝和花中表达量最低。结论 Mp F2H基因在不同组织中表达量差异较大。克隆了Mp F2H基因c DNA,构建了其原核表达载体p ET30a-Mp F2H,为Mp F2H基因的原核表达和功能验证奠定了基础。     

布渣叶水提物解热退黄作用的实验研究

目的:研究布渣叶水提物的解热、退黄作用。方法:采用干酵母复制大鼠发热模型,α-萘异硫氰酸萘脂中毒诱导小鼠黄疸模型,观察布渣叶水提物的解热、退黄作用。结果:高、中剂量的布渣叶水提物对发热模型大鼠有显著降温作用;高、中、低剂量的布渣叶水提物能显著降低黄疸模型小鼠血清中总胆红素(T-Bil)与直接胆红素(D-Bil)的含量,并能显著抑制丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)活性。结论:布渣叶水提物具有一定的解热作用,并有良好的退黄与改善肝功能的作用。     

不同产地布渣叶药材UPLC指纹图谱及多成分含量测定研究

目的采用超高效液相色谱法建立布渣叶药材指纹图谱, 并对3种黄酮类成分含量进行测定, 评价不同产地布渣叶药材质量的差异。方法采用Agilent ZORBAX SB C18柱(2.1 mm×150 mm, 1.8 μm), 流动相为乙腈-0.1%乙酸溶液, 梯度洗脱, 流速为0.30 ml/min, 柱温为30 ℃;检测波长为315 nm, 建立布渣叶药材指纹图谱;采用超高效液相色谱-质谱联用技术对共有峰进行指认, 采用对照品比对, 对指认结果进行确证。采用Waters Cortecs T3 C18柱(2.1 mm×100 mm, 1.6 μm), 流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液, 梯度洗脱, 流速0.35 ml/min, 柱温30 ℃, 检测波长339 nm, 测定15批不同产地布渣叶药材中牡荆苷、异牡荆苷和水仙苷含量。结果布渣叶指纹图谱共有11个共有峰, 经质谱指认和对照品确证, 指认出其中10个化学成分, 分别为咖啡酸、对羟基肉桂酸、阿魏酸、牡荆苷、异牡荆苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷、水仙苷、异鼠李素-3-O-葡萄糖苷和椴树苷。15批布渣叶样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度...     

布渣叶的化学成分、药理作用与临床研究进展

目的:全面了解布渣叶的化学成分、药理作用及临床应用情况。方法:通过文献检索及手工查阅相结合的方法查找近20年来国内外报道的有关布渣叶研究文献,并对其进行综述分析。结果与结论:布渣叶在临床上应用较为广泛,对其化学成分的研究报道也较多,但大多只停留在化学成分鉴定上,而对其药理研究方面则比较少,还应进一步加强布渣叶化学成分与药理、毒理研究,为布渣叶的新产品开发和临床应用提供更全面参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS结合多元统计分析不同产地布渣叶化学成分的差异

目的:应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术,结合多元统计分析技术考察不同产地布渣叶的差异性化学成分.方法:色谱条件为Waters CORTECS UPLC C18色谱柱(2.1 mmx150 mm,1.6 μm),以甲醇(A)-0.1％甲酸水溶液(B)流动相进行梯度洗脱,流速0.25 ml/min,进样量1μl.采用电喷雾电离(ESI)技术,在负离子模式进行采集检测.应用主成分分析(PCA)与正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计技术对代谢轮廓及化学成分进行差异性聚类,并筛选布渣叶的差异化学成分.结果:安徽产地与其他产地布渣叶在化学成分上差异有统计学意义.鉴定出13个黄酮类差异成分(3个原花青素类、5个黄酮碳苷类、5个黄酮醇氧苷类).结论:通过该研究建立的UPLC-Q-TOF-MS/MS 多元统计分析方法,明确了不同产地布渣叶的差异化学成分,为布渣叶的质量控制提供了依据,为揭示生态环境对布渣叶代谢物合成积累的影响规律提供了基础资料.     

布渣叶水提物抗炎作用的实验研究

目的 探讨布渣叶水提物的抗炎作用.方法 通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验及腹腔注射醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验,观察布渣叶水提物对炎症反应的影响.结果 布渣叶水提物高、中剂量组对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀有明显抑制作用(F=3.620,P＜0.05);而布渣叶水提物高、中、低剂量组均能抑制由醋酸引起的组织毛细血管通透性增加,与空白对照组比较差异有统计学意义(F=2.232,P＜0.05).结论 布渣叶水捉液具有抗急性炎症作用.     

布渣叶化学成分定性鉴别的实验研究

目的对布渣叶的化学成分进行定性鉴别。方法采用试管法,对布渣叶的水、95%乙醇、石油醚提取物进行研究,通过多种指示剂和显色剂的沉淀反应或颜色反应,初步推断布渣叶中可能含有的化学成分。结果经过化学预试实验,提示布渣叶全草中可能含有黄酮类、生物碱、三萜类、甾体、有机酸、氨基酸、蒽醌、强心苷等成分。结论布渣叶中含有多种植物活性成分,值得进一步深入研究。     

布渣叶HPLC指纹图谱研究

目的 建立布渣叶的HPLC指纹图谱.方法 采用Kromasil C18柱,以甲醇-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长为278 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为30℃.采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2009版)软件对其进行了相似度计算.结果 方法学考察结果良好,确立了14个共有峰,14批布渣叶样品指纹图谱的相似度为0.820～0.966.结论 该方法稳定性、重复性好,建立的指纹图谱可为布渣叶的质量评价提供依据.     

不同产地布渣叶总黄酮含量及其清除自由基活性研究

目的测定13个不同产地布渣叶样品中总黄酮含量及其清除自由基活性。方法采用Al（NO3）3-NaNO2-NaOH体系比色法测定总黄酮含量,采用1,1-二苯基-2-苦基肼自由基（DPPH.）、羟自由基（.OH）和超氧自由基（O2.-）等模型测定布渣叶总黄酮清除自由基活性。结果各产地总黄酮含量差异较大,其中以广西来宾样品含量最高,达到了55.22 mg.g-1,平均为27.06 mg.g-1。各产地总黄酮样品均具有清除DPPH.活性,其自由基清除率随供试品总黄酮浓度的增大而提高,呈现一定的量效关系;但其清除.OH和O2.-活性与总黄酮浓度关系不明显。结论不同产地布渣叶总黄酮含量差异较大;各产地布渣叶总黄酮均具有较好的自由基清除活性。