淫羊藿甙对小鼠腹腔巨噬细胞体外增殖、吞噬和产生NO的影响

无菌分离小鼠腹腔巨噬细胞,制备单细胞悬液,加入不同终浓度的淫羊藿甙孵育4 h后,加入细菌脂多糖LPS(终浓度20 mg/L)48 h后以MTT法检测其增殖;加药孵育4 h后,分别加入直径1μm和2μm的微球(终浓度1×1010/L),5 h后利用流式细胞术(FCM)检测吞噬情况;加入LPS(终浓度20 mg/L)24 h后Griess试剂盒检测巨噬细胞NO的量。结果显示ICA在终浓度1.5、3.0μmol/L时能明显抑制LPS刺激的巨噬细胞增殖(P<0.01)和NO的产生,并促进其吞噬微球的功能。提示ICA可能抑制LPS信号转导从而抑制巨噬细胞增殖,并且通过抑制其活化,下调iNOS有关的炎症因子,使NO减少;对于未活化的巨噬细胞,ICA可能通过上调其吞噬功能,增强固有免疫系统来抵御病原体侵入。     

胎牛骨髓多肽对小鼠和人巨噬细胞及NK活性的影响

以特定工艺从胎牛骨髓中提取分离到一种多肽类物质，用吞饮中性红试验表明，该物质能明显提高小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）吞噬功能。进而用人全血化学发光仪测定，发现正常人外周血细胞与该物质共温后，血中吞噬细胞吞噬细菌后的化学发光峰高明显高于对照组，峰时明显缩短。此外用１２５Ｉ－ＵｄＲ释放法也表明该物质对ＮＫ细胞具有活化作用。从而提示胎牛骨髓多肽物质对机体免疫功能具有促进作用。     

血管紧张素转换酶2基因转染对人内皮细胞MIF表达的影响

目的：探讨重组血管紧张素转换酶2（ACE2）基因转染对体外培养的人血管内皮细胞中由血管紧张素（Ang）II诱导的巨噬细胞移动抑制因子（MIF）表达的影响。方法:克隆和构建含人ACE2基因全长的重组质粒（pACE2），并将之转染入人血管内皮细胞中。分别采用实时定量PCR和Western印迹技术检测转染细胞中的MIF mRNA与蛋白表达情况。结果: Ang Ⅱ（100 nmol/L）和Ang IV（100 nmol/L）刺激后均可诱导人血管内皮细胞中MIF mRNA及蛋白表达增加（P<0.01）。pACE2基因转染可明显抑制内皮细胞中由Ang II和Ang IV诱导的MIF mRNA和蛋白表达（P<0.05）。结论: ACE2基因过表达可明显抑制人内皮细胞中炎症介质MIF的表达，提示ACE2基因具有一定的抗炎症效应。通过调节ACE2基因的活性和表达，很可能为炎症相关疾病如动脉粥样硬化治疗提供新的策略。     

二氧化硫吸入对小鼠脾细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨二氧化硫大剂量吸入对小鼠脾细胞凋亡和脾脏组织学结构的影响.方法:以不同浓度的二氧化硫分别对小鼠连续染毒7d,用透射电镜法、DNA琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞技术观察小鼠脾脏组织学结构和细胞凋亡改变.结果:在二氧化硫染毒组小鼠脾脏的红髓区和白髓区均有典型的脾细胞凋亡发生,在边缘区可见大量核变形淋巴细胞,此外还可见巨噬细胞出现明显的凋亡改变和网状内皮细胞受损.168mg/m3二氧化硫染毒可引起小鼠脾细胞凋亡率增加.结论:大剂量二氧化硫吸入可引起小鼠脾脏超微结构改变,在一定剂量和时间范围内可引起脾细胞凋亡加速,从而对机体的免疫功能造成一定损伤.     

有骨髓间充质干细胞附着的聚乳酸-羟基乙酸共聚物-Ⅰ型胶原蛋白支架补片在大鼠腹股沟疝模型中的应用

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)覆膜聚乳酸-羟基乙酸共聚物-Ⅰ型胶原蛋白支架(PLGA-collagenⅠ)补片对腹股沟疝的修补效果。方法首先,制备PLGA-collagenⅠ补片;然后提取大鼠骨髓间充质干细胞,并制作腹壁缺损大鼠模型。将覆膜有骨髓间充质干细胞的组织工程补片(实验组)和无细胞组织工程补片(对照组)分别植入腹股沟。ELISA检测IL-6和IL-10。免疫组化检测巨噬细胞表面抗原,分析炎性反应。HE染色观察补片中自身组织的再生情况和材料降解状态。用扫描电子显微镜观察腹膜的完整性。免疫组化检测新生血管状态。Masson三色染色检测胶原蛋白纤维的形成。结果 1周后,实验组和对照组的巨噬细胞在补片上的浸润均显著增加(P0.05)。1个月后,炎性反应逐渐消退,巨噬细胞数量减少(P0.05)。长期实验表明,BMSCs补片能促进胶原纤维的合成,促进血管再生,修补腹壁损伤。实验组和对照组的大鼠腹壁无肿胀,大鼠健康。术后1、2和6个月进行组织形态学观察和SEM电子显微镜检查。带有BMSCs的PLGA-collagenⅠ补片可促进细胞浸润,血管生成和组织再生,且降解速度更快。6个月后,种植有BMSCs的补片几乎完全降解,没有种植细胞的PLGA-collagenⅠ补片被降解成碎片,并作为异物留在体内。结论植入BMSCs的PLGA-collagenⅠ组织工程材料能更快速可靠的修补疝缺损,达到治疗腹股沟疝的目的。     

肿瘤相关巨噬细胞在胃癌发展与治疗中的研究进展

胃癌是全球发病率和病死率较高的恶性肿瘤,随着治疗手段的进步与发展,患者的生存期得到了明显的改善。肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)是肿瘤微环境的重要组成部分,参与调控胃癌细胞增殖、侵袭、免疫逃逸和化疗耐药等各个方面,在胃癌预后评估和靶向治疗中也已显现出极大的潜力。     

正常皮肤中单核巨噬细胞和树枝状细胞的分布规律

目的：观察正常真皮内的单核-巨噬细胞和树枝状细胞的分布、排列规律，探讨单核-巨噬细胞在皮肤免疫防御中的作用。方法：正常皮肤8例，取面部、躯干、四肢近端、四肢远端、手掌和足跖6个部位皮肤，进行纵行与水平切片。CD1a和CD68单克隆抗体染色，观察朗格汉斯细胞（LC）和单核．巨噬细胞的分布形态和密度。结果：真皮浅层CD68阳性细胞呈网状分布，其密度为361-562个／mm^2。真皮内血管周围及附属器周围亦见CD68阳性细胞。真皮深层CD68阳性细胞多为树枝状，散在分布于粗大的胶原纤维之间。不同解剖部位真皮浅层CD68阳性细胞密度分别为：四肢远端562个／mm^2，腹部517个／mm^2，面部509个／mm^2，手掌507个／mm^2，四肢近端472个／mm^2，足跖361个／mm^2。真皮浅层CD68阳性细胞在手掌和足跖部位高于相应部位的表皮内CD1a和CD68细胞。结论：在真皮浅层形成数层单核．巨噬细胞网，此网在接近真表皮交界处较致密。真皮内单核-巨噬细胞的这种分布形式说明这些细胞在真皮内有明确的方向性，其防御的方向是穿透表皮进入真皮的入侵物。     

腺病毒介导M—CSF和IFN—γ基因联合转染对巨噬细胞抗原提呈功？…

研究观察了Ｍ－ＣＳＦ和ＩＦＮ－γ基因转染的巨噬细胞（Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，Ｍφ）的体外抗原提呈能力，并对其机制进行了初步探讨，结果表明，ＩＦＮ－γ基因转染及Ｍ－ＣＳＦ／ＩＦＮ－γ联合基因转染的Ｍφ抗原是呈功能显著增强，联合基因转染组优于单基因转染组（Ｐ〈０．０５），Ｍφ表面Ｉａ、Ｂ７－１、ＩＣＡＭ－１的表达水平有不同程度的提高，这些细胞表面相关发子的高表达可能与基抗原提呈能力增加有关。混合淋巴细胞     

鹭鸶咯口服液对小鼠巨噬细胞活化作用的研究

我们采用噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验观察了鹭鸶咯口服液对小鼠巨噬细胞的活化作用和吞噬功能的影响。结果表明，在８％（ｇ／１００ｍｌ）和１６％两个药物浓度，该药物对小鼠巨噬细胞均无毒性，且刺激其大量增生。对于巨噬细胞活性的影响，在体内外作用均显著。在８％、１６％、３２％三个药物浓度上，该药物对提高巨噬细胞吞噬功能均有显著作用。     

巨噬细胞肿瘤疫苗抗瘤作用的实验研究

目的：探究巨噬细胞肿瘤疫苗的细胞形态与表型特征,并观察其CTL反应的诱导效果。方法：分别采用透射与扫描电子显微镜、免疫荧光染色及流式细胞术等技术对巨噬细胞肿瘤疫苗的超微结构及CD14、CD68、CD80、CD86、MHCⅡ等分子进行测定。采用生长状态良好的H22肿瘤细胞移植于接种不同肿瘤疫苗的实验小鼠,分别采用直接测量法、MTT法及比色法测定瘤重量、瘤体积、肿瘤细胞杀伤率和培养上清液LDH活性。结果：巨噬细胞肿瘤疫苗细胞表面有许多的伪足皱褶、囊泡,胞浆内有大量大小不一、形态不规则的吞噬体；CD14、CD68、CD80、CD86及MHCⅡ的阳性细胞率分别为53.90%、98.60%、26.50%、90.20%和25.40%。小鼠体内实验结果显示,巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的肿瘤形成率、瘤体积与瘤重量明显低于对照组和石蜡诱生的巨噬细胞接种组（P均〈0.05）；巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的成瘤率与灭活肿瘤细胞接种组无明显差异（P〉0.05）,但瘤体积与瘤重量明显低于灭活肿瘤细胞接种组（P均〈0.05）。另外,巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的淋巴细胞自体肿瘤细胞杀伤率和培养上清液LDH活性分别高于对照组、灭活肿瘤细胞接种组和石蜡诱生的巨噬细胞接种组。结论：巨噬细胞肿瘤疫苗具备巨噬细胞的典型特征,该种细胞接种后可诱导机体产生特异性抗肿瘤免疫反应。