荷叶碱对非酒精性脂肪肝模型小鼠肝组织中SREBP信号通路的影响

[目的]研究中药荷叶有效成分对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型小鼠的治疗作用及相关机制。[方法]通过蛋氨酸和胱氨酸联合缺乏饲料建立NAFLD模型小鼠,同时灌胃不同剂量荷叶碱,通过考察造模给药后各组小鼠体质量及血清生化指标,同时对肝组织分别进行苏木精-伊红(HE)染色和油红O染色,研究荷叶碱对NAFLD模型小鼠的治疗作用。此外提取造模给药后各组小鼠肝组织总核糖核酸(RNA),荧光定量核酸扩增检测(qPCR)法检测各组小鼠肝组织中胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)通路相关基因表达,初步探究荷叶碱缓解NAFLD的作用机制。[结果]荷叶碱能显著降低NAFLD模型小鼠体质量、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)水平,同时荷叶碱可缓解NAFLD模型小鼠肝组织中脂肪变性,减少肝组织中脂质含量;此外,荷叶碱可下调NAFLD模型小鼠肝组织中SREBP通路相关基因SREBP-1、乙酰CoA羧化酶(ACC)、ATP-柠檬酸裂解酶(ACLY)及脂肪酸合酶(FASN)表达。[结论]荷叶碱对NAFLD具有明显的疗效,其作用机制可能与抑制肝细胞SREBP通路激活相关。     

结合新型冠状病毒肺炎疫情议“三山医院”的建设要领

新型冠状病毒肺炎疫情引起全球关注,病毒的高度传染性致使疫情迅速蔓延和大规模暴发。在应对突发的迅速蔓延的疫情过程中,快速建设一个安全性能高的应急传染病专科医院,对于患者治疗、医护人员防护和疫情的控制十分重要。笔者结合“三山医院”建设的经验和温州医科大学附属第一医院应急传染病治疗中心改造的实际经验,系统地对医院选址、医院规划和设计、暖通系统、给排水系统、医用气体要求及医疗废物处置进行阐述,并对关键环节进行探讨。     

山萘酚通过抑制伽马辐射诱导的氧化应激和凋亡发生来发挥辐射防护作用

目的在从动物水平和细胞水平研究一种黄酮醇类化合物山萘酚的体内外辐射防护作用,并对其作用可能机制进行探索。方法将C57小鼠分为正常对照组、8.5 Gy辐射模型组、8.5 Gy辐射+山萘酚15 mg·kg~(-1)组、7 Gy辐射模型组、7 Gy辐射+山萘酚15 mg·kg~(-1)组,小鼠在辐射前连续灌胃给药五天,之后一次性分别接受8.5 Gy或7 Gy剂量全身γ射线辐射,观察并记录8.5 Gy辐射后各组动物在辐射后30 d的生存情况以及十天体重变化。在辐射后的第7天,记录各组动物体重,全部处死7 Gy辐射的各组动物,取小鼠脾组织和胸腺组织测定脏器指数并分别检测组织中SOD和MDA水平变化,取小鼠外周血利用抗体标记和流式细胞仪检测外周血中EPCs水平变化,取小鼠小肠组织利用HE染色和TUNEL染色观察小肠组织病理形态变化和凋亡情况,利用Western印迹检测小肠组织蛋白表达变化。使用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)株,实验分为正常对照组、辐射模型组、山萘酚给药组,辐射前24 h给予药物孵育,之后一次性接受24 Gy剂量γ射线辐射,辐射后24 h,利用MTT法检测各组细胞的存活率,流式细胞术和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡、试剂盒检测细胞ROS,NO,SOD和MDA水平、实时PCR和Western印迹检测细胞prx5,Cyt-c,Bax,胱天蛋白酶,活化胱天蛋白酶9,胱天蛋白酶3和活化胱天蛋白酶3在m RNA和蛋白水平表达变化。结果山萘酚可以明显的增加辐射后动物生存率,减少辐射引起的体重降低,提高辐射后脏器指数,增加辐射后组织中SOD水平,降低组织中MDA水平,显著保护辐射后肠结构完整性,增加辐射后小肠平均绒毛高度,增加隐窝数,减少辐射诱导的绒毛细胞和隐窝细胞凋亡,并且提高外周血中内皮祖细胞水平;山萘酚可以增加辐射后细胞生存率,减少细胞凋亡,清除辐射产生的过剩ROS和NO,降低MDA水平,增加SOD水平,恢复辐射后prx-5,Cyt-c,胱天蛋白酶9,活化胱天蛋白酶9和胱天蛋白3,活化胱天蛋白3在m RNA和蛋白水平的异常高表达。结论山萘酚通过减少辐射诱导的氧化应激和细胞凋亡发挥辐射防护作用。     

荷叶生物碱对THP-1单核细胞源性巨噬细胞泡沫化及B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响

目的观察荷叶生物碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)所致人THP-1巨噬细胞泡沫化及B类Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响,探讨荷叶生物碱抗动脉粥样硬化的可能机制。方法建立THP-1源性泡沫细胞模型后,采用不同剂量荷叶生物碱(0、25、50、100 mg/L)分组共孵育24 h。油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况;分别用荧光定量PCR、Wesetern Blot检测细胞中SR-BⅠmRNA水平和蛋白水平。结果与空白对照组比较,ox-LDL对细胞内脂滴积聚呈浓度依赖性;且细胞SR-BⅠ的mRNA水平(分别为1.00±0.00、0.53±0.04、0.30±0.04和0.18±0.03)及蛋白表达(分别为1.00±0.00、0.62±0.10、0.39±0.08和0.22±0.05)呈浓度依赖性降低(P<0.01);加入荷叶生物碱干预后,细胞内脂滴随荷叶生物碱浓度的增加而减少,细胞SR-BⅠmRNA水平(分别为0.32±0.02、1.07±0.02、1.28±0.03和1.49±0.03)及蛋白表达(分别为0.28±0.03、1.06±0.02、1.32±0.03和1.41±0.02)浓度依赖性增加(P<0.01)。结论荷叶生物碱上调人THP-1单核细胞源性泡沫细胞SR-BⅠ的表达,促进细胞内胆固醇流出,可能是荷叶生物碱抗动脉粥样硬化的机制之一。     

黄芪山甲方对UUO模型中肾间质纤维化TGF-β1及FN的影响

目的：探讨黄芪山甲方（HQSJ）对单侧输尿管结扎（UUO）致肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis,RIF）大鼠转化生长因子-β1 （TGF-β1）、纤维黏连蛋白（FN）表达的影响.方法：实验采用UUO大鼠模型,将雄性SD大鼠30只随机分成5组：假手术组（Sham）、模型组（UUO）、中药组（UUOA）、西药组（UUOE）、中西药组（UUOAE）.治疗第14天检测血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）,光镜观察肾组织病理改变,免疫组织化学法检测肾组织TGF-β1、FN的表达.结果：经过2周的处理,各组BUN及Scr与Sham组分别比较,明显上升,差异有统计学意义（P＆lt;0.05）.肾组织免疫组化观察：Sham组肾小球、肾小管、肾间质及肾血管内几乎无TGF-β1、FN表达.其他各组14天时大鼠TGF-β1、FN在肾小管、肾间质均有不同程度表达,肾小球分布相对较少,表现为黄褐色颗粒状沉积,尤其在UUO组.UUOAE组、UUOA组、UUOE组表达均较模型组轻.UUOAE组最轻、UUOA组其次、UUOE组最差,与Sham组比较,UUO组及各治疗组大鼠Scr、BUN、TGF-β1、FN表达及肾小管间质损伤评分表达差异均有统计学意义（P＆lt;0.05）.各治疗组与UUO组比较,差异均有统计学意义（P＆lt;0.05）.UUOAE组与UUOE组比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）,UUOA组与UUOE组比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）,UUOAE组与UUOA组比较差异有统计学意义（P＆lt;0.05）.结论：HQSJ可能通过下调肾组织TGF-β1、FN的表达水平,从而抑制RIF的发展,起到一定的肾脏保护作用.     

大叶山楝萜类化学成分及其生物活性研究进展

大叶山楝Aphanamixis grandifolia为楝科山楝属植物,具有舒筋活络、通痹及祛风除湿等功效。大叶山楝中含有柠檬苦素类衍生物、甘遂烷型三萜、达玛烷型三萜、环阿尔廷烷型三萜、二萜及倍半萜等萜类化合物,具有杀虫、抗肿瘤、抗炎、抗疟疾和抑菌等生物活性。对大叶山楝萜类化学成分及其生物活性研究进展进行综述,以期为该植物的研究和开发利用提供参考。     

野茉莉叶化学成分研究

目的对野茉莉Styraxjaponicus的叶进行化学成分研究。方法通过硅胶、SephadexLH-20凝胶柱色谱及重结晶等方法进行分离和纯化,根据理化性质、波谱数据进行结构鉴定。结果从野茉莉叶70%乙醇提取物三氯甲烷萃取部位分离得到16个化合物,包括9个苯丙素和7个其他类化合物,分别鉴定为nectandrinB(1)、豆甾醇(2)、荚果蕨素(3)、eupomatenoid-7(4)、β-谷甾醇(5)、去氢二异丁香酚(6)、4-oxo-4[(3β,22E)-stigmasta-5,22-dien-3-yloxy]butanoic acid(7)、4-(3-methory-4-hydroxy)pheny-3-methyl-3-buten-2-one(8)、熊果酸(9)、香草酸(10)、(+)-(7S,8R,8′R)-4,8′-dihydroxy-3-methoxy-1′,2′,3′,4′,5′,6′-hexanorligna-7,7′-lactone (11)、(+)-(7S,8R)-4-hydroxy-3-methoxy-1′,2′,3′,4′,5′,6′,7′-heptanorlign-8′-one(12)、(2S,3R′)-2,3-dihydro-2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-7-methoxy-5-(2-propen-1-yl)-3-benzofuranmethanol(13)、香草醛(14)、对香豆酸(15)和二氢山柰酚(16)。结论化合物1、3～16均为首次从该植物中分离得到。     

山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1的作用机制

目的 探讨山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)的作用.方法 以小鼠胰岛微血管内皮MS-1细胞为研究对象,将细胞分为正常对照组、溶剂(DMSO)对照组、脂肪酸组(0.25 mmol/L软脂酸+0.5mmol/L油酸)、山萘酚组(50 μmol/L)、脂肪酸+山萘酚组、PARP-1抑制剂(8μmol/LBYK204165)+脂肪酸组和PARP-1抑制剂+脂肪酸+山萘酚组,分别检测各组细胞活力、凋亡水平、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及氧化应激相关指标的改变.结果 脂肪酸处理后,MS-1细胞存活率下降,细胞凋亡率升高(P＜0.05);同时,脂肪酸也增加了细胞内NO的含量,升高了总NOS(tNOS)、诱导型NOS(iNOS)和结构型NOS(cNOS)的活性(P＜0.05);促使脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量增加,抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平下降(P＜0.05);并增强了PARD-1、iNOS和cNOS的mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05).而山萘酚干预后,各项指标的水平均得以改善(P＜0.05);而且,利用PARPP-1抑制剂BYK204165预处理1h,山萘酚对脂肪酸的拮抗效应更为显著,各项检测指标与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脂肪酸可直接引起胰岛微血管内皮功能损伤,而山萘酚具有拮抗脂肪酸毒性的作用,且抑制PARP-1的表达水平能增强山萘酚的保护效应.     

远志质量问题及中药材产地加工探讨

目的：总结2017年远志监督检验工作中发现的影响质量的主要问题,完善远志的质量标准,对其产地加工及贮藏提供建议。方法：基于远志（口山）酮Ⅲ的含量测定、制远志的甘草鉴别,分析检验过程中遇到的问题,探讨现行标准对质量控制的可行性。模拟产地加工及贮藏条件,研究远志易感染黄曲霉及黄曲霉毒素超标的原因。结果与结论：现行质量标准中远志（口山）酮Ⅲ含量测定不能准确定量,现有标准的含量限度偏高;制远志质量标准不能控制其是否依法炮制,中药饮片厂炮制过程中可能存在偷工减料;远志产地加工及贮藏过程中易感染黄曲霉,造成黄曲霉毒素超标。建议修订远志质量标准中远志（口山）酮Ⅲ含量测定项,增订蜜远志质量标准,完善制远志质量标准,发布远志产地加工及贮藏指导意见,以便更全面地控制远志药材质量。     

茵山莲颗粒联合生长抑素治疗急性胰腺炎的临床研究

目的研究茵山莲颗粒联合注射用生长抑素治疗急性胰腺炎的临床疗效。方法选取2015年6月—2017年6月开滦总医院收治的急性胰腺炎患者120例为研究对象,随机将所有研究对象分为对照组和治疗组,每组各60例。对照组微量泵静脉注射注射用生长抑素,首次100μg,而后以50μg/h匀速泵入。治疗组在对照组治疗基础上口服茵山莲颗粒,2袋/次,2次/d。两组患者均连续治疗14 d。观察两组的临床疗效,比较两组的临床症状消失时间和生化指标。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为80.00%、95.00%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组呕吐、腹胀、高热、无便、上腹压痛消失时间短于对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组脂肪酶、血淀粉酶、白细胞数、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平显著下降,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组生化指标明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论茵山莲颗粒联合注射用生长抑素治疗急性胰腺炎具有较好的临床疗效,能改善临床症状,调节生化指标,安全性较高,具有一定的临床推广应用价值。