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21.
目的克隆得到山茱萸Cornusofficinalis萜类合成途径的关键酶CoHMGS基因的cDNA序列,并进行相应的生物信息学分析,为深入研究CoHMGS基因的功能奠定基础。方法以山茱萸转录组筛选出的c102453_g2序列为参考序列设计特异引物,以山茱萸叶片总RNA,通过RT-PCR扩增获得CoHMGS基因序列,序列纯化回收后连接到pTOPO-T载体上,转化至大肠杆菌DH10B,选取阳性克隆测序。利用生物信息学软件预测CoHMGS基因及其编码蛋白质的功能。结果克隆得到长度为1645 bp的CoHMGS序列,包含1413 bp的完整开放阅读框,编码470个氨基酸。蛋白整体带负电荷,为不稳定亲水性蛋白,定位于细胞质内,不含跨膜结构。结论首次克隆得到山茱萸CoHMGS基因,对其编码蛋白质进行了初步的分析和预测,为深入揭示CoHMGS基因在山茱萸萜类物质合成途径中的功能奠定了基础。 相似文献
22.
为探讨山茱萸中环烯醚萜等次生代谢产物合成的遗传基础,采用新一代高通量测序技术对其果实进行转录组测序,共获得得96 032条unigenes,平均长度590.53 bp;其中共有35 478条unigene能被NR,Swissprot,COG,GO,KOG,Pfam和KEGG等7个公共数据库注释。通过对注释所得的unigene进行KEGG代谢通路的分析发现,共有84个unigene与环烯醚萜类成分的生物合成有关;487条unigene参与山茱萸其他次生代谢相关物质代谢调控。研究发现,共有153条unigene参与山茱萸次生代谢产物的氧化/羟基化;72条unigene参与次生代谢产物的糖基化。该研究首次对山茱萸转录组进行了分析,并获得了山茱萸环烯醚萜类等次生代谢生物合成相关的候选基因,为山茱萸的分子生物学研究提供了丰富的数据资源,也为后续探讨候选基因的功能奠定了基础。 相似文献
23.
目的研究温度对山茱萸开花与结果习性的影响。方法对所选定的不同海拔高度的12株20~50年树龄的山茱萸为研究对象,进行定株、定时观察与记载。结果当日均温持续稳定在8℃以上约3~5d,花蕾将开始绽放;当日均温稳定在12℃以上3~5d,小花将开始开放;当日均温稳定在23℃以下时,果实纵、横径生长均较快。结论对制订山茱萸标准操作规程(简称SOP)及指导合理生产具有实际意义。 相似文献
24.
山茱萸及其制剂中熊果酸的含量测定方法研究 总被引:7,自引:0,他引:7
应用3种方法:薄层扫描法、薄层比色法、薄层限量法,分别测定了杞菊地黄丸中熊果酸的含量。其中薄层扫描法为中国药典(1990年版一部)法,即药典中山茱萸和六味地黄刃中熊果酸的含量测定法。实验结果表明,该方法同样适用于杞菊地黄丸中熊果酸的含量测定,但受仪器、展开剂、显色剂等多种因素影响,特别是仪器不普及,基层单位难以实施。薄层比色法操作繁琐、精密度差、结果不稳定;而薄层限量法可准确定量、不用仪器,操作简 相似文献
25.
目的 考察山茱萸与五味子配伍前后两药主要组分的含量变化规律.方法 利用高效液相色谱(HPLC)方法,比较了配伍前后单煎液、合煎液和单煎合并液中两药主要组分马钱苷、没食子酸和五味子醇甲的含量变化.结果 在配伍比例较低(≤44)时,五味子促进了山茱萸中马钱苷的溶出.合煎液中的没食子酸、五味子醇甲组分的百分含量随着五味子配伍比例的增大呈线性减小,且均低于单煎液.单煎合并液中这3种组分的含量均高于同比例合煎液.结论 山茱萸五味子配伍对两药主要组分溶出有较大影响,该影响主要在煎煮过程中发生. 相似文献
26.
27.
目的 采用近红外光谱技术建立山茱萸饮片中5-羟甲基糠醛含量的快速无损检测方法,并用于快速判别山茱萸饮片的炮制程度。方法 以54个样本作为校正集,运用偏最小二乘法建立定量校正模型并进行优化。以9个样本作为验证集,进行含量预测。结果 校正模型决定系数为0.925 6,相对分析误差为5.06,交叉验证均方根误差为0.022 0,外部验证均方差为0.019 3,光谱预测值与真值之间的相关性较好。结论 该法可直接用于中药山茱萸中5-羟甲基糠醛含量的快速预测,为快速判断山茱萸炮制程度提供可能。该方法具有操作简便、快速无损、准确可靠等优点。 相似文献
28.
目的:探讨山茱萸多糖对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响,并通过观察山茱萸多糖对腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1( AMPK/SIRT1)通路的调控作用探索其可能的作用机制。方法:体外培养MCF-7细胞,随机分为对照组(正常培养基培养)和山茱萸多糖低、中、高剂量组(分别予12.5、25.0、50.0 mg/mL山茱萸多糖培养)以及山茱萸多糖高剂量+AMPK激活剂( AICAR)组(予50.0 mg/mL山茱萸多糖+2.0 mmol/L AICAR培养),采用平板克隆形成试验检测MCF-7细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,划痕试验检测细胞迁移情况,Transwell法检测细胞侵袭情况,蛋白免疫印迹法( Western blot法)检测各组细胞AMPK、磷酸化AMPK( p-AMPK)、SIRT1蛋白相对表达量。选择BALB/c裸鼠,建立荷瘤裸鼠模型,随机分为对照组(灌胃生理盐水)与山茱萸多糖组(每日灌胃800 mg/kg山茱萸多糖溶液),每组6只,连续灌胃28 d。每7 d测量2组裸鼠肿瘤体积并做组间比较,灌胃结束后处死各组裸鼠取移植瘤,采用免疫组化法检测各组裸鼠移植瘤组织中AMPK、p-AMPK、SIRT1蛋白表达。结果:体外细胞学实验结果表明,山茱萸多糖低、中、高剂量组MCF-7细胞集落形成数明显低于对照组( P< 0.05),细胞凋亡率明显高于对照组( P< 0.05),细胞划痕愈合率、细胞侵袭数明显低于对照组( P< 0.05),细胞中p-AMPK、SIRT1蛋白表达明显低于对照组( P< 0.05) ;山茱萸多糖高剂量+AICAR组MCF-7细胞集落形成数明显高于山茱萸多糖高剂量组( P< 0.05),细胞凋亡率明显低于山茱萸多糖高剂量组( P< 0.05),细胞划痕愈合率、细胞侵袭数明显高于山茱萸多糖高剂量组( P< 0.05),细胞中p-AMPK、SIRT1蛋白表达明显高于山茱萸多糖高剂量组( P< 0.05) ;山茱萸多糖各剂量对上述指标的影响表现出显著的剂量依赖性( P< 0.05)。荷瘤裸鼠实验结果表明,移植第14、21、28、35 d山茱萸多糖组裸鼠移植瘤体积显著小于对照组( P< 0.05) ;干预结束后,山茱萸多糖组裸鼠移植瘤质量与瘤体组织p-AMPK、SIRT1蛋白阳性表达率均明显低于对照组( P< 0.05),AMPK蛋白阳性表达率与对照组比较差异无统计学意义( P> 0.05)。结论:山茱萸多糖对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭有一定的抑制作用,并可促进MCF-7细胞凋亡,能抑制裸鼠移植瘤生长,其可能的机制为抑制AMPK/SIRT1通路激活。 相似文献
29.
山茱萸为山茱萸科植物的干燥成熟果肉,其主要化学成分为多糖,环烯醚萜苷,萜类等。具有明显的免疫调节,抗氧化,治疗糖尿病,保护神经系统等作用。本文综述了近年来山茱萸的生物活性及其机制,为山茱萸的进一步开发和研究提供相关参考。 相似文献
30.