盐制山茱萸炮制工艺研究

目的:优选盐制山茱萸的炮制工艺。方法:在预试验基础上选取食盐用量、蒸制压力、蒸制时间3个因素设置3水平,以马钱苷的含量为考察指标,进行正交试验设计,优选条件。结果与结论:最佳炮制工艺为食盐用量2.0%,蒸制压力为0.01 MPa,蒸制时间为1.5 h。     

不同山茱萸炮制品中熊果酸含量的比较

目的：考察不同炮制方法对山茱萸中熊果酸含量的影响。方法：薄层扫描法。结果：酒浸、酒蒸、酒炖等加酒炮制的样品中熊果酸含量均高于生品，并且其升高与样品中水分含量无明显关系。结论：炮制对山茱萸中熊果酸含量有明显影响。     

山茱萸化学成分与气象因子相关性分析

目的:对不同产地山茱萸中化学成分进行含量测定,明确不同产地气象因子对化学成分的影响及其相关性.方法:对河南、陕西及浙江3个主产区14个产地山茱萸药材中熊果酸、马钱苷、总多糖、有机酸、鞣质、水溶性浸出物及醇溶性浸出物进行含量测定,运用数理统计学软件(PASW STATISTICS 18)各化学成分指标与产地气象因子进行相关性分析.结果:山茱萸药材中马钱苷、醇浸物、总有机酸、鞣质的含量与产地气象因子没有显著相关性;熊果酸含量与产地日照呈现负相关,多糖含量与产地年日照时数和年均温度呈正相关;水浸物含量与产地年均温度成正相关.结论:明确了山茱萸化学成分与气象因子之间的相关性,为培育质优、高产的山茱萸提供理论基础,同时为山茱萸的GAP生产提供理论支持.     

超临界CO2萃取山茱萸成分研究

目的 :对山茱萸超临界CO2 流体萃取物进行研究。方法 :萃取条件为 :压力 15MPa,温度 4 0℃ ,时间2h ,液态CO2 流量 2 2 .0kg·h-1,,采用GC MS技术分析山茱萸CO2 超临界萃取物的化学组成。结果 :超临界CO2流体萃取法得率为 2 .4 2 %。鉴定了其中 31种成分 ,并用面积归一化法测定其相对含量。结论 :超临界CO2 流体萃取物主要成分有 1,2 苯二甲酸二 (1 丁基 2 异丁基 )酯 ,异丙基十四 [烷 ]酸酯等。     

秦七风湿方HPLC指纹图谱研究

目的建立秦七风湿方的HPLC指纹图谱,为其质量评价及药效物质基础研究提供依据。方法采用Inert Sustain C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);以0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;检测波长为203 nm;柱温为30℃;体积流量为1 m L/min;测定10批秦七风湿方样品,利用中药色谱相似度评价系统(2004A版)建立秦七风湿方HPLC指纹图谱,并通过对照品对共有峰进行指认。结果建立了秦七风湿方HPLC指纹图谱,10批样品的相似度均在0.99以上,共标定19个共有峰,8个峰来源于珠子参,8个峰来源于秦艽,5个峰来源于山茱萸(其中1号峰为珠子参、秦艽和山茱萸共有),并通过与对照品比较指认了其中8个色谱峰,分别为马钱苷酸(2号峰)、莫诺苷(3号峰)、龙胆苦苷(5号峰)、马钱苷(6号峰)、人参皂苷Ro(12号峰)、人参皂苷F1(13号峰)、竹节参皂苷IVa(14号峰)、人参皂苷F2(17号峰)。结论所建立的方法稳定、准确、重复性好,可为秦七风湿方的质量控制及药效物质基础研究提供依据。     

基于转录组测序的山茱萸次生代谢生物合成相关基因的挖掘

为探讨山茱萸中环烯醚萜等次生代谢产物合成的遗传基础,采用新一代高通量测序技术对其果实进行转录组测序,共获得得96 032条unigenes,平均长度590.53 bp;其中共有35 478条unigene能被NR,Swissprot,COG,GO,KOG,Pfam和KEGG等7个公共数据库注释。通过对注释所得的unigene进行KEGG代谢通路的分析发现,共有84个unigene与环烯醚萜类成分的生物合成有关;487条unigene参与山茱萸其他次生代谢相关物质代谢调控。研究发现,共有153条unigene参与山茱萸次生代谢产物的氧化/羟基化;72条unigene参与次生代谢产物的糖基化。该研究首次对山茱萸转录组进行了分析,并获得了山茱萸环烯醚萜类等次生代谢生物合成相关的候选基因,为山茱萸的分子生物学研究提供了丰富的数据资源,也为后续探讨候选基因的功能奠定了基础。     

《傅青主女科·种子》固涩药应用浅析

纵观历代医家对治疗不孕症的理论阐述,并无明确指出配伍固涩药的必要性,而探究《傅青主女科·种子》可知,固涩药在治疗女子不孕时配伍使用,多有画龙点睛之效,既可敛摄气血精液,又可调补冲任加强固藏,又不孕症多虚多损,在临床中以相应的补益药佐固涩药同用,可标本兼顾,能收到较好的疗效。《傅青主女科·种子》中十方有三方未运用固涩药:嫉妒不孕之开郁种玉汤、肥胖不孕之加味补中益气汤、腰酸腹胀不孕之升带汤,三方皆为治疗不孕实证,这提示固涩法仅适用于虚证、脱证及久病大病后邪不猖盛的情况,如运用不当就会造成"闭门留寇",其害无穷,不可不慎。     

不同产地山茱萸药材质量的检测

目的检测河南不同产地山茱萸药材质量。方法《中国药典》法测定山茱萸药材的水浸出物、醇浸出物、水分测定、灰分测定,高效液相法测定马钱素和莫若苷的含量。结果不同产地山茱萸药材的水分、酸不溶性灰分部分样品高于《中国药典》规定;水浸出物、醇浸出物、灰分和马钱素含量均达到《中国药典》标准。结论不同产地山茱萸药材的质量不同,所购河南市售样品除水分、灰分外,基本符合《中国药典》规定。     

山茱萸、生地有效部位及配伍组合抑制糖基化终末产物致肾小球系膜细胞增殖的研究

目的:通过体外培养大鼠肾小球系膜细胞(GMC),建立糖基化终末产物(AGEs)致肾小球系膜细胞增殖的细胞模型,观察山茱萸有效部位、生地有效部位及其配伍组合对糖基化终末产物致肾小球系膜细胞增殖的抑制作用,以确定最佳配伍组合物。方法:体外培养肾系膜细胞,当细胞贴壁生长至80%~90%时,(1),用浓度为50、100、200、400mg/L的山茱萸各部位(环烯醚萜苷、三萜酸、多糖)、生地各部位(环烯醚萜苷、多糖、寡糖)进行干预,然后加入200mg/L的糖基化终末产物刺激,24 h后检测细胞增殖情况,筛选出活性较强的部位。(2),将活性较强的部位山茱萸环烯醚萜苷和三萜酸(A)、生地环烯醚萜苷(B)按1:0、0:1、1:1、1:2、2:1进行配伍组合(分别为A1、B1、A1B1、A1B2、A2B1),以浓度为25、50、100mg/L生药及含药血清进行干预,加入200mg/L的AGEs刺激,24 h后检测细胞增殖情况以及细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Coll-Ⅳ)水平。结果:(1)山茱萸环烯醚萜苷部位、山茱萸三萜酸部位与生地环烯醚萜苷部位活性较强,具有显著抑制糖基化终末产物致肾小球系膜细胞增殖的作用。(2)配伍组合物(A1、B1、A1B1、A1B2、A2B1)生药及含药血清均能够抑制肾小球系膜细胞增殖及其分泌纤维连接蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的水平,并呈一定量效关系。结论:山茱萸环烯醚萜苷部位、山茱萸三萜酸部位、生地环烯醚萜苷部位及其配伍组合能够明显抑制糖基化终末产物致肾系膜细胞增殖及其分泌的纤维连接蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原水平,减少细胞外基质沉积,其中配伍组合A2B1抑制效应最强,为最佳配伍组合。     

生地黄、山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响

目的:观察生地黄,山茱萸水提液及其含药血清对体外糖基化产物生成的影响.方法:200 mmol·L-1的葡萄糖与牛血清白蛋白组成反应系统,37℃温孵,分别加入生地黄,山茱萸及其配伍水提液,含药血清,测早期糖化蛋白(果糖胺)及晚期糖基化产物(AGEs),计算抑制率(inhibitory rate,IR),及半数抑制率(IC50).结果:山茱萸,生地黄,山茱萸,生地黄配伍分煎及合煎的早期糖化产物(果糖胺)IC50分别为0.104,0.159,0.146,0.077 g·L-1;晚期糖基化产物(AGEs) IC50分别为0.175,0.221,0.143,0.076 g·L-1.提示生地黄,山茱萸水提液对早期和晚期糖化产物均有一定抑制作用.此外生地黄,山茱萸含药血清对早期糖化蛋白IC50分别为:37.9％,49.1％,52.8％,31.6％;对晚期糖基化产物IC50分别为:78.5％,92.3％,82.9％,73.2％.表明生地黄-山茱萸含药血清对果糖胺与AGEs也都具有一定的抑制作用,且生地黄-山茱萸合煎组抑制果糖胺和AGEs的IC50优于其他组.结论:生地黄山茱萸配伍对抑制果糖胺和AGEs具有协同作用.