HPLC同时测定不同产地密蒙花中4种化合物的含量

目的 采用HPLC同时测定密蒙花中4种化合物（毛蕊花糖苷、蒙花苷、芹菜素、木犀草素）的含量,并对不同产地的密蒙花进行比较。方法 采用Waters Sunfire^TM C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;柱温30℃;检测波长330 nm（毛蕊花糖苷、蒙花苷、芹菜素）和350 nm（木犀草素）。结果 4种化合物在各自的范围内呈现良好的线性关系（r>0.999 0）,平均回收率为97.75%~98.49%,RSD为0.7%~1.5%。测得不同产地毛蕊花糖苷、蒙花苷、芹菜素、木犀草素的含量分别为21.046 3~42.886 3,8.514 4~17.400 8,0.317 3~1.205 3,0.030 4~0.145 6 mg·g^-1。结论 该法稳定可靠,重复性好,可为密蒙花质量评价提供一定依据。     

密蒙花中黄酮类成分的分离与鉴定

目的对密蒙花(Buddleja officinalis Maxim.)中的黄酮类成分进行研究,为其资源开发与利用提供依据。方法综合应用大孔吸附树脂、正相硅胶、反相ODS和Sephadex LH-20等柱色谱以及高效液相色谱法对密蒙花中黄酮类成分进行分离纯化,并结合单体成分的理化性质与核磁共振波谱数据鉴定其结构。结果与结论从密蒙花体积分数70%乙醇溶液的提取物中分离鉴定了11个黄酮类化合物,分别为木樨草素(1)、木樨草素-7-O-葡萄糖苷(2)、木樨草素-7-O-芸香糖苷(3)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(4)、芹菜素-7-O-β-D-芸香糖苷(5)、蒙花苷(6)、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(7)、芹菜素-4'-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(8)、芹菜素-7-(2'-α-L-鼠李糖基)芸香糖苷(9)、密蒙花新苷(10)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(11),其中,化合物7~9、11均为首次从醉鱼草属植物中分离得到。     

全视网膜激光光凝术联合密蒙花方治疗糖尿病视网膜病变临床观察

目的 探究全视网膜激光光凝术联合密蒙花方治疗糖尿病视网膜病变的临床效果.方法 选取2018年1月—2019年7月接受治疗的84例糖尿病视网膜病变患者作为本次研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(42例)和观察组(42例).对照组患者单纯采用全视网膜激光光凝术进行治疗.观察组患者采用全视网膜激光光凝术联合密蒙花方进行...     

密蒙花滴眼液对去势雄兔泪腺细胞炎症因子的影响

目的：观察不同浓度密蒙花滴眼液对去势雄兔泪腺细胞炎症因子TNF-α、IL-1β的影响,探讨不同浓度密蒙花滴眼液对去势雄兔干眼症模型的疗效。

方法：将密蒙花原药材制备成低、中、高3种浓度滴眼液。将42只健康成年新西兰长耳白兔(雄性),随机分为A：空白组; B：模型组; C：低浓度密蒙花滴眼液组; D：中浓度密蒙花滴眼液组; E：高浓度密蒙花滴眼液组; F：安慰剂滴眼液组; G：睾酮组等7组,每组6只。除A组外其余6组实验用兔行双侧睾丸及附睾切除术。从术后第3天开始C、D、E、F组分别予相应滴眼液滴双眼。各组实验用兔,分别于术前和术后第4wk各进行一次Schirmer I试验(SIT)和泪膜破裂时间(BUT)测定。采用免疫组化法对泪腺细胞炎症因子TNF-α和IL-1β的表达进行检测。

结果：1)SIT与BUT值比较：术后C组与D、E、G组比较,有统计学意义(P<0.01); D、E、G组间相比较,无统计学意义(P>0.05); 2)术后各组炎症因子TNF-α、IL-1β比较：C组与D、E、G组比较,有统计学意义(P<0.05); D、E、G组间相比较,无统计学意义(P>0.05)。

结论：1)密蒙花滴眼液具有与雄激素相似的抑制细胞炎症因子表达的作用,但其作用弱于雄激素; 2)中、高浓度密蒙花滴眼液对TNF-α和IL-1β的抑制作用要强于低浓度密蒙花滴眼液,但中、高浓度密蒙花滴眼液的抑制作用差别不明显。     

密蒙花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响

目的：观察密蒙花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型中泪腺上皮细胞Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响。

方法：将培养生长状态良好的泪腺上皮细胞,随机分为无雄激素培养黄酮治疗组(以下简称密蒙花总黄酮组),含雄激素培养对照组(以下简称雄激素组),无雄激素培养空白组(以下简称空白组)。分别加入含密蒙花总黄酮血浆、丙酸睾酮、含空白血浆开始进行干预。建立干眼症细胞模型。用Trizol试剂提取细胞总RNA。RT-PCR法检测泪腺上皮细胞中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA的表达。

结果：密蒙花组、雄激素组能够抑制泪腺上皮细胞中Bax mRNA的表达,与空白组比较差异有显著性(P<0.01); 密蒙花组Bax mRNA的表达低于雄激素组,比较差异有显著性(P<0.01)。密蒙花组、雄激素组Bcl-2 mRNA的表达均高于空白组,比较差异有显著性(P<0.01); 密蒙花组Bcl-2 mRNA的表达高于雄激素组,比较差异有显著性(P<0.01)。

结论：密蒙花总黄酮含药血浆作用于雄激素水平下降所致干眼症的细胞模型可抑制Bax mRNA的表达,使Bax mRNA的表达量降低,同时促进Bcl-2 mRNA的表达,使Bcl-2 mRNA的表达量增加。密蒙花总黄酮含药血浆很可能是通过抑制泪腺上皮细胞中Bax mRNA及促进Bcl-2 mRNA表达的途径而达到抑制细胞凋亡的作用。     

密蒙花正丁醇提取物对糖尿病大鼠血糖和醛糖还原酶的影响

目的 观察密蒙花正丁醇提取物对糖尿病大鼠的血糖和醛糖还原酶(AR)活性的影响.方法 通过ip链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg建立糖尿病大鼠模型,随机分成5组,分别ig给予氨基胍和高、中、低剂量(200、400、800 mg/kg)的密蒙花正丁醇提取物,糖尿病模型组则给予等体积的蒸馏水,实验过程中每3天测1次体重,每周测定血糖,并于实验第30天和第90天测定AR活性.结果 密蒙花正丁醇提取物的高剂量组大鼠的血糖显著低于模型组,其第1个月的AR活性也显著低于模型组.结论 密蒙花正丁醇提取物可降低糖尿病大鼠血糖水平,且短期内具有AR抑制活性.     

密蒙花研究进展

从植物形态及资源分布、化学成分、药理作用、综合开发利用等几个方面对密蒙花的研究现状进行综述,以期为密蒙花的进一步研究提供文献支持.     

密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和FasL的影响

目的观察密蒙花颗粒剂对去势雄兔泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和Fas L的影响,探讨密蒙花颗粒剂对去势雄兔干眼症模型的疗效。方法将密蒙花原药材制备成颗粒剂。将30只健康成年新西兰长耳白兔(雄性),随机分为空白组(A组),模型组(B组),密蒙花颗粒剂组(C组),安慰剂组(D组),睾酮组(E组)5组,每组6只。除A组外其余4组实验用兔行双侧睾丸及附睾切除术。除A、B组外,从术后第3日开始C组予密蒙花颗粒剂,按100 mg/kg灌胃,3次/日;D组予生理盐水20 m L灌胃,3次/日;E组按2 mg/kg在大腿肌肉处注射丙酸睾酮注射液,每3日注射1次。各组实验用兔,分别于术前和术后第4周各进行1次SchirmerⅠ试验(SchirmerⅠtest,SⅠT)和泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)测定。用药观察4周后采用空气栓塞法处死各组兔子,摘取双眼泪腺组织,采用免疫组化法对泪腺细胞凋亡因子Bax、Bcl-2、Fas和Fas L的表达进行检测,并观察泪腺组织结构形态图。结果 (1)SⅠT及BUT结果:与本组术前及术后A组比较,B、D组SⅠT及BUT均明显下降(P0.01);与B、D组术后比较,C、E组SⅠT及BUT升高,且差异均有统计学意义(P0.01)。(2)Bax、Bcl-2、Fas、Fas L表达:与A组比较,B、D组Bax、Fas、Fas L表达均明显增多,Bcl-2表达明显减少(P0.01);与B、D组比较,C、E组Bax、Fas、Fas L表达均明显减少,Bcl-2表达明显增多(P0.01)。(3)Bax、Bcl-2、Fas、Fas L表达观察结果:A组:泪腺结构清晰,未见Bax、Bcl-2、Fas、Fas L表达;B组:泪腺结构模糊,Bax、Fas、Fas L均大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒,Bcl-2仅少量表达;C组:泪腺结构清晰,散见Bax、Fas、Fas L表达,Bcl-2大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒;D组:泪腺结构模糊,Bax、Fas、Fas L均大量表达于细胞膜和细胞浆中,呈棕黄色颗粒,Bcl-2仅少量表达;E组:泪腺结构清晰,散见Bax、Fas、Fas L表达,Bcl-2未见表达。结论密蒙花颗粒剂具有与雄激素相似的抑制泪腺细胞凋亡因子Bax、Fas和Fas L表达,同时上调Bcl-2的作用,能抑制雄激素缺乏所致兔泪腺细胞的凋亡,维持泪腺基础分泌量,但其作用弱于雄激素。     

基于《脏腑标本药式》探讨密蒙花方从肝论治NPDR

糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病常见并发症,属中医“消渴目病”范畴,病因有内外,病位在目,非增殖性糖尿病视网膜病变（NPDR）以气阴两虚、目络瘀滞兼早期阳虚为基本病机,涉及五脏,以肝为关键,肝病则体用皆损,主要表现为肝气、肝血、肝阳、肝阴不足,肝郁以及肝热。治疗分虚实寒热、标本缓急,以调肝为关键。密蒙花方是名中医高健生所创,入选北京市中医药管理局首批“十病十药”,被广泛用于NPDR的临床治疗,可有效延缓疾病进程、改善视功能。《脏腑标本药式》由易水学派张元素所著,是脏腑辨证的代表性著作之一,主要阐述各脏腑虚实、标本寒热治法及用药。故本文基于《脏腑标本药式》深入探讨密蒙花方从肝论治NPDR。     

密蒙花总黄酮对去势导致干眼症雄鼠泪腺Bax mRNA、BcL-2 mRNA表达的影响

目的观察密蒙花总黄酮对雄激素水平下降所致干眼症雄鼠的泪腺上皮细胞中Bax mRNA、Bcl-2mRNA表达的影响。方法将健康1月龄、体质量150～180gWistar雄性大鼠150只随机分为A1、B1、C1、D1、E1、A3、B3、C3、D3、E3、A5、B5、C5、D5、E5共15组,每组10只。采用去势的方法建立雄激素水平下降所致干眼症动物模型,分别观察各组SchimerI试验、泪膜破裂时间及角膜荧光素染色情况,以确定干眼症模型是否建立成功。其中,A代表正常组;B代表假手术组;C代表模型对照组;D代表雄激素对照治疗组(造模成功后,丙酸睾酮1mg.kg-1大腿肌肉注射,每3d1次);E代表密蒙花总黄酮治疗组(造模成功后,密蒙花总黄酮0.045g.kg-1灌胃,每3d1次);1代表饲养1个月;3代表饲养5个月;5代表饲养7个月。用RT-PCR法对各组泪腺组织中Bax mRNA、Bcl-2mRNA的表达进行检测,并比较。结果SchimerI试验、泪膜破裂时间及角膜荧光素染色结果显示,大鼠均在造模3个月后形成干眼症。D3组、D5组泪腺组织中的BaxmRNA相对含量较C3组、C5组降低,差异均有统计学意义(均为P<...