应用差别PCR方法检测乳腺癌c-erb B_2癌基因的扩增

在一个多聚酶链反应（ＰＣＲ）管中同时扩增两条靶序列，一条是ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因中的一个长９８ｂｐ的片段，另一条是单拷贝的内对照序列。通过定量分析ＰＣＲ的产物来判断ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因是否扩增。此方法快速、简便、敏感，无核素污染。我们检测了１９例原发性乳腺癌手术标本，发现４例有ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因的扩增。这４例患者肿瘤发展较快，短时间内呈进行性肿大，提示肿瘤细胞分裂旺盛及预后不良     

应用低严格度—单引物聚合酶链反应对问号钩体中国参考株的…

Ｇ１、Ｇ２引物是对问号钩体具有特异性引物。分别用Ｇ１或Ｇ２单引物对问号钩体中国参考株进行前４个低严格度循环的ＰＣＲ扩增，扩增带谱显示赖型、犬型、致热型、秋季型、澳洲型、临海型、乌尔夫型、溶血型为一类，而爪哇型、拜伦型、波摩那型、七日热型、巴叶赞型塔拉索夫型、曼耗Ⅱ型是不与以上赖型等血清型本为一类，双曲钩体ａｔｏｃ型及伊利尼细丝体伊利尼型的扩增带谱与问号钩体截然不同。应用苯酚法提取的高纯度钩体ＤＮＡ     

恶性淋巴瘤的分子生物学研究和诊断

80年代后期以来，随着分子生物学的发展，人们对于淋巴造血系统肿瘤的认识进入了一个新的阶段。从传统的临床、形态学及免疫组化（蛋白质表达水平）进入到分子遗传学（DNA，RNA）水平。外科病理学家在日常工作中遇到的难以从形态学和免疫组比表型确诊的淋巴增生性疾病（LPD），可以在分子生物学方法的帮助下得到确诊。目前用于常规淋巴造血系统疾病的分子生物学方法主要是Southern印迹杂交技术和PCR技术。为了使大家对此有所了解，下面将简单地介绍有关抗原分子的分子遗传学的基础。一、免疫球蛋白和DT细胞受体免疫球蛋白（1g）和T细…     

急性T淋巴细胞白血病中SIL－TAL－1融合基因的分子生物学研究

ＴＡＬ－１基因位于１号染色体短臂１ｐ３２。在急性Ｔ淋巴细胞白血病（Ｔ－ＡＬＬ）中，２５％的患者该基因５’端发生丢失（约１００ｋｂ），与ＳＩＬ基因５’端相融合，形成ＳｉＬ－ＴＡＬ－１融合基因。我们用筑巢式逆转录／多聚酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＲＴ／ＰＣＲ）方法检测ＳＩＬ－ＴＡＬ－１融合基因转录本。在１７例Ｔ－ＡＬＬ中４例检测到该融合ｍＲＮＡ，并证明该转录本由ＳＩＬ基因第１外显子与ＴＡＬ－１基因第３外显子拼接而成。对该法的敏感度测定显示，可从１０￣６个正常细胞中检测出１个肿瘤细胞，并在２例缓解期标本中检测到微量残留白血病（ＭＲＤ）。此外，对３例有融合转录本患者的ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测发现，其ＴＡＬ－１基因５’端丢失的位点相同，均为Ｔａｌ￣（ｄ１）重组。可见，ＴＡＬ－１基因的改变是Ｔ－ＡＬＬ一个有用的克隆标志，为其诊断和残留白血病检测提供了十分重要的依据。     

LightCycler实时定量PCR与白血病

LightCycler实时定量聚合酶链反应（PCR）是近年来研制的一种新的核酸定量技术，由微体积荧光检测仪和PCR热循环仪组成，PCR热循环时通过热空气对玻璃毛细管加热，能够使温度迅速发生改变（以20℃／s升高或降低），在扩增的同时进行荧光定量检测，具有简便、快速、精确、敏感及可靠等特点。本文对实时定量PCR的技术原理及其在白血病微小残留病检测和基因突变及多态性分析等中的应用进行综述。     

真菌病

系统性尖端赛多孢子菌感染小鼠白细胞介素10表达的研究，检测常见酵母菌耐药的纸片法和微量稀释法比较，二步法聚合酶链反应检测血液恶性肿瘤患曲霉菌感染的研究，酶联免疫吸附试验检测侵袭性曲霉病,临床常见皮肤癣菌的分子生物学鉴定,重症监护病房真菌感染的检出率和耐药性趋势……