应用显微荧光测钙技术研究乙酰胆碱对豚鼠耳蜗对外毛细胞内 …

介绍了应用最显微荧光测钙技术研究豚鼠耳蜗外毛细胞（ＯＨＣ）内游离钙浓度的变化的方法。该技术以钙敏感染料Ｆｕｒａ－２作为胞内Ｃａ＾２＋的指示剂，装协进入细胞后，与胞内游离Ｃａ＾２＋结合，在特定波长光的激发下可发出荧光，由此可推算「Ｃａ＾２＋」ｉ的变化。结果发现乙酰胆碱在含钙的细胞上液中可引起「Ｃａ＾２＋」ｉ升高。对显微荧光测钙技术在研究耳蜗毛细胞中的应用以及ＡＣｈ引起「Ｃａ＾２＋」ｉ升高的机制进行讨     

应用PCR方法快速检测金葡菌败血症18例分析

我科从1994年5月开始至今对18例临床高度怀疑为金葡菌败血症的患儿(其中新生儿11例,3个月～6岁7例),采血进行血培养(包括普通培养和L型培养),并应用PCR技术以金葡菌序列合成的引物进行检测。选择同期上呼吸道感染患儿为对照。     

应用PCR检测副溶血弧菌的耐热溶血毒素基因tdh

副溶血弧菌可引起食物中毒或急性胃肠炎，尤其在夏季，常可从食用不洁海产品而导致食物中毒的病人肛拭标本中分离到。目前一般认为该菌的热稳定性溶血毒素(TDH)是重要的毒力因子。TDH可在莪萋氏血平板上产生一种特殊的溶血现象，称作神奈川现象(Kanagawa phenomenon，KP)^[1]。临床上分离出的副溶血弧菌株几乎都是KP阳性，因此通常认为KP阳性为产毒株，KP阴性为非产毒株。     

微流芯片检测流感病毒多重逆转录聚合酶链反应产物的实验研究

[目的 ]　建立应用微流芯片检测甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒多重逆转录聚合酶链反应 (mRT -PCR)产物的方法 ,在mRT -PCR扩增核酸的基础上自动化灵敏的定量检测扩增产物 ,快速检测甲亚型、乙型流感病毒 ,帮助临床快速诊断和鉴别诊断其他呼吸道病毒感染 ,以及明确流感病毒在人群中感染、流行情况。　 [方法 ]　采用经MDCK细胞分离培养的甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒毒株病毒液 ,使用 3组特异引物经mRT -PCR扩增核酸 ,扩增产物分别采用毛细管电泳技术经Caliper10 0 0微流芯片分析仪自动化检测和经 2 %琼脂糖凝胶电泳法检测。　[结果 ]　设计三组引物对相应甲 1型、甲 3型、乙型流感病毒靶基因的mRT -PCR扩增产物片段分别为 43 0bp、2 10bp、3 91bp ,本实验mRT -PCR扩增产物经 2 %琼脂糖凝胶电泳 ,与Marker比照 ,DNA条带基本在此位点附近 ;产物采用毛细管电泳法经Caliper10 0 0微流芯片分析仪后 ,分别于 413bp、2 0 3bp、3 79bp处出现陡峭的峰 ,如图所示。　[结论 ]　应用微流芯片采用毛细管电泳法可对流感病毒mRT -PCR产物进行定位及相对定量 ,有助于快速诊断流感病毒感染 ,有助于对流感的监测。     

间接荧光抗体试验在主要寄生虫病监测中的应用进展

间接荧光抗体试验(IFAT)是通过将荧光素与抗人免疫球蛋白或其他第二抗体在不影响抗体免疫特性的情况下，用化学方法结合起来，制备成荧光抗体。当作为检测用的未标记的抗原(或抗体)与待测标本中相应的抗体(或抗原)结合成抗原一抗体复合物时，加入荧光抗体与之结合形成免疫荧光复合物，即可在荧光显微镜下显示亮绿色荧光，从而间接地显示出待测标本中存在着相应抗体(或抗原)。IFAT最早用于寄生虫病的血清     

耳炎差异球菌与成人分泌性中耳炎的相关性研究

目的探讨耳炎差异球菌与成人分泌性中耳炎的关系。方法采用多重PCR的方法，检测39例(42耳)成年分泌性中耳炎患者的中耳积液中耳炎差异球菌以及三种常见细菌[肺炎链球菌(S．pneumoniae)、流感嗜血杆菌(H．influenzae)和卡他莫拉杆菌(M．catarrhalis)]的DNA，就细菌DNA存在与成人分泌性中耳炎患者上呼吸道感染(简称上感)史、病程、积液性质和抗生素服用史之间的关系进行分析。结果收集到的42份中耳积液标本中有5份(11．9％)检测到有耳炎差异球菌DNA存在。急性分泌性中耳炎者有1例(3．6％)测得耳炎差异球菌DNA存在，慢性者则有4例(28．6％)，两者差异有显著性意义。浆液性中耳积液有3例(13．0％)测得耳炎差异球菌DNA存在，粘液性中耳积液则有2例(10．5％)为阳性，两者差异有显著性意义。抗生素使用史对耳炎差异球菌DNA检出率的影响无统计学意义。结论细菌参与部分成人分泌性中耳炎的发病，耳炎差异球菌可能是其致病菌之一；且慢性分泌性中耳炎中耳积液的持续存在可能与耳炎差异球菌感染有关。     

视网膜动脉阻塞晚期的眼底荧光血管造影分析

共6例，男4例，女2例。平均年龄49岁(27～60岁)。随访时间4～6年，常规作眼底荧光血管造影。每个眼底的4条主要动脉分支分成2支，故算作8支。     

双眼先天性视网膜皱襞二例

我院于2001～2002年发现2例先天性视网膜皱襞的患者，现报告如下。     

人疱疹病毒6型和7型感染与风湿性关节炎相关性的研究

[目的]探讨人疱疹病毒6型(Human herpes virus 6，HHV6)和7型(HHV7)感染与风湿性关节炎病因有无相关性。[方法]2003年采用巢式PCR技术检测40例风湿性关节炎病人和138名健康献血员外周血单个核细胞和血浆中HHV6 DNA与HHV7 DNA。[结果]风湿性关节炎病人外周血单个核细胞的HHV6 DNA和HHV7 DNA阳性率与对照组的差异均无统计学意义(P＞0．05)；部分风湿性关节炎病人血浆中可检出HHV6 DNA与HHV7 DNA，对照组则为阴性。[结论]风湿性关节炎病人中可能存在HHV6或HHV7的活动性感染，HHV6、HHV7与风湿性关节炎的发生发展有一定关系。     

脂蛋白脂肪酶基因突变的研究

目的：筛查国人脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的突变，并探讨其与高甘油三酯血症的关系。方法：对高甘油三酯血症组(48例)和正常甘油三酯对照组(121例)的各扩增片段进行分析，电泳图谱异常者进行PCR产物测序。对于频率较高的多态性位点，引入限制性核酸内切酶位点利用PCR-RFLP进行鉴定。结果：在高甘油三酯血症人群中，检出2例内含子3受位剪接点上游6bp的C→T转换的突变杂合子，1例外显子5Pm^207→Leu突变杂合子，在全部样品中检出1例Ser^447→stop突变纯合子，50例Ser^447→stop杂合子。结论：天津地区人群中存在着LPL基因突变，除Ser^447→stop外，内含子3和外显子5的突变多与高甘油三酯血症相关，可能是高甘油三酯血症的遗传易感因子。