RNA干扰体外抑制HBeAg的表达

目的：构建乙型肝炎病毒前C／C基因小发夹RNA（shRNA）表达载体，探索shRNA表达载体对HBeAg表达的抑制作用。方法：用基因重组技术构建shRNA表达载体，经酶切、测序鉴定后，与HBeAg表达载体pcDNA3．1-preC／C按7：1的比例，共转染HeLa细胞，采用半定量PCR和微粒子酶免疫试验（MEIA）分析shRNA表达载体对HBeAg表达的抑制情况。结果：经限制性内切酶、测序证实成功构建shRNA表达载体；筛选到psiHBV2载体对HBeAg表达有一定抑制作用，对mRNA的抑制率为75％，对蛋白质的抑制率为53％，其余两序列无明显抑制作用。结论：RNAi技术可以有效抑制载体pcDNA3．1-preC／C表达HBeAg。     

以循证医学的理念观察颈椎综合征的MRI图像

目的鉴于MRI对组织的高分辨性能,利用该图像观察颈椎综合征患者的椎管外组织的病理状况.方法54例患者,其中男30例,女24例,分为2组.观察组44例颈椎综合征患者,对照组10例颈部外伤和三叉神经痛患者.通过常规的MRI矢状位及横轴位颈椎图像,比较两组软组织增生情况.结果与结论在颈椎综合征MRI的颈椎及上段胸椎棘突后侧,均可观察到不同程度的慢性纤维性变化,与对照组比较,有可比性.提示临床上颈椎综合征多与颈肩区筋膜炎、棘突炎相关,属于无菌性炎症,其慢性阶段,局部发生了纤维增生性改变.建议在观察分析此种病症的颈椎骨质及椎间盘改变的同时,宜重视棘突后侧的纤维性变化,有利于病理病因的研究.     

散发性戊型肝炎病毒感染的诊断

用基因工程重组的戊型肝炎病毒基因结构区第二码框架和第二读码框架具有免疫表位的嵌合抗原，建立了间接酶联免疫法，检测散发性急性肝炎病人血清中抗－ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ抗体。在４６例急性肝炎病人中出抗－ＨＥＶＩｇＧ抗体阳性７例，阳性率为１５．２２％，７例ＩｇＧ抗体阳性中，有５例ＩｇＭ抗体也阳性，占７１．４％。     

乙型肝炎病毒S和前S1基因的融合构建及其在P. pastoris酵母中的表达

目的构建含有乙型肝炎病毒(HBV)S和前S1(preS1,10～50AA)表位的ss1融合基因,并在P.pastoris酵母中表达SS1融合蛋白。方法以HBV全基因组质粒为模板,扩增出目的区段:S(1～222AA)、preS1(10～50AA),以酶切-PCR的方法将其连接为ss1融合基因,然后克隆入表达载体pPIC3.5k;电穿孔转化毕赤酵母菌株GS115,筛选后进行诱导表达并对表达产物进行检测。结果表达产物的相对分子质量为30000左右,与抗HBs抗体和抗preS1抗体均有特异反应。结论ss1融合基因能够在P.pastoris酵母中高效表达,而且表达产物具有HBVS蛋白和preS1蛋白的抗原性,为进一步研究其免疫原性打下基础。     

Western blot 检测蛋白表达方法的改进

Western blot为常用的检测蛋白质的方法．其操作步骤较多，在抗体反应这一步骤中．常规方珐首先用靶蛋白特异性的非标记抗体与靶蛋白的抗原决定簇相结合．然后用Ⅰ-蛋白A或与辣根过氧化物酶耦联的抗免疫球蛋白抗体检测已结合上去的抗体，此法虽好，但有如下缺点：（1)信号放大有限．在蛋白质量少的隋况下无法得到满意结果，     

日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原诊断血吸虫病的初步探讨

用日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)作探针，采用ELISA和ELIB检测血吸虫病人血清抗体，对急慢性血吸虫病人的控出率分别为100％和98．2％，未出现假阳性及交叉阳性反应；治疗后3、6和12个月血清抗体的阴转率分别为32．3％、50．9％和64％。其中抗82，73，67，52，42，38，32，31，28，26．21，18kDa分子的血清抗体消失较快。结果表明，SIEA在血吸虫病的诊断中具有较高的敏感性、特异性和潜在的疗效考核价值。     

新生儿乙型肝炎疫苗普种8年效果考核

从１９８６年起，上海市南市区对每年出生的新生儿普遍免疫。１９９４年对该区１９８６年以后出生的１－８人九进行乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染和水平的血清学调查。调查结果表明，１－８岁乙型肝为病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）地阳性率为０．４１％，各年龄分组的阳性率均在１％以下波动，未见明显的随年龄变化趋势；３－８岁组ＨＢＶ感染率为０．９８％。抗－ＨＢdisplay status     

胃癌患者血清CEA、CA19—9及CA72—4联检的临床价值探讨

目的：探讨血清CEA、CA19—9及CA72—4联检在胃癌诊断、病情监测及疗效观察中的价值。方法：采用电化学发光技术检测36例正常对照组、42例良性胃病、55例胃癌患者血清CEA、CA19—9、CA72—4的含量，并对胃癌患者进行治疗前后三种肿瘤标志物的含量变化监测随防。结果：胃癌患者血清CEA、CA19—9、CA72—4的阳性率明显高于正常对照组及良性胃病组，差异有显著性（P〈0．01）。胃癌患者治疗后三种肿瘤标志物含量及阳性率较治疗前有明显下降，差异有显著性（P〈0．01）。三者联检的敏感性、准确性均显著提高（P〈0．01）。结论：血清CEA、CA19-9、CA72—4联检有助于提高胃癌诊断的敏感性、同时对疗效观察及术后监测有重要意义。     

抗SARS病毒N蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的 制备抗SARS病毒N蛋白的单克隆抗体并研究其初步应用。方法 用基因重组N蛋白免疫小鼠，取免疫后的鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选分泌抗SAPS病毒N蛋白单克隆抗体细胞株。将阳性细胞株接种小鼠腹腔制备单克隆抗体腹水并对抗体进行纯化，分析纯化抗体的相对亲和力。选择亲和力较高的抗体制备检测SARS病毒抗原的酶联免疫诊断试剂，并对其敏感性和特异性进行分析。结果 共获得11株单克隆抗体细胞株，其中3株单抗与N蛋白具有较高的亲和力，4株纯化单抗与N蛋白反应很弱，其余4株单抗介于两者之间。用亲和力较高的单抗制备检测SARS病毒抗原的诊断试剂，其敏感性可达31PFU／ml，而且与其他呼吸道病毒无交叉反应。结论 该试剂特异性较好，可用于SARS病毒抗原的检测，其敏感性仍需用临床急性期样品进行评价。     

沈阳汉族人群HLA—DR,DQ,DP的DNA分型研究

使用ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对９４名沈阳汉族健康人群进行了ＨＬＡ第Ⅱ类抗原等位基因的完全分型，共发现６６种等位基因，基中ＤＲＢ１２８种，ＤＲＢ３３种，ＤＲＢ５４种，ＤＱＡ１８种，ＤＱＢ１３种，ＤＰＢ１０种，分析了ＤＲ－ＤＱ连锁的五位点单倍型，共发现３８种，其中２１种是在白人为主的人群已发现过的。本研究提出了中国东北人群ＨＬＡ第Ⅱ类抗原等位基因的遗传基本情况，可用于疾病研究的对照和其他中国群资料的比较。