GSK-3β对子宫内膜样腺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的：研究糖原合成酶激酶-3β（glycogensynthasekinase，GSK-3β）对子宫内膜样腺癌已分化细胞株Ishikawa、HEC-1-A及未分化细胞株KLE增殖和侵袭能力的影响。方法：用GSK-3β小分子干扰RNA（GSK-3β siRNA）转染上述3种细胞株，采用Western印迹法检测GSK-38蛋白及凋亡相关蛋白caspase-3的表达；Brdu掺入实验检测细胞增殖率；FCM法检测细胞周期及凋亡率；Transwell侵袭试验检测对细胞侵袭、运动能力的影响；明胶酶谱法检测细胞分泌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的情况。结果：转染GSK-3β siRNA后，3种细胞株中GSK-3β蛋白的表达均低于对照组（P〈0．05）；Ishikawa、HEC-1-A细胞Brdu掺入率降低，S期细胞数比例减少，凋亡率增加，caspase-3表达上调；细胞侵袭能力降低，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。但是KLE细胞株与对照组相比，增殖和侵袭能力均无明显差异（均为P〉0．05）。结论：GSK-3β能促进已分化的子宫内膜样腺癌细胞株Ishikawa、HEC-1-A的增殖和侵袭；但是对未分化的KLE细胞株的增殖和侵袭能力无明显影响。     

半夏的野生类型及其增殖率研究

本文将安徽境内野生半夏分为二珠芽型、单珠芽型、茎珠芽型、无珠芽型等4个类型,并分析了4个类型间演化关系。实验表明,二珠芽型和单珠芽型增殖率较高,在生产中宜多选用。     

中药对小鼠前列腺细胞增殖及凋亡的影响

目的　探讨中药方剂 (生牡蛎 30g,地龙 30g ,生黄芪 30g ,皂刺 9g,丹参 30g,川牛膝 9g,海藻 15g ,虎杖 2 0g,王不留行 15g ,当归尾 15g ,蒲公英 15g ,穿山甲 2 0g)对小鼠前列腺细胞增殖及凋亡的影响。　方法　体重 30～ 4 0g雄性昆明种小鼠 12 0只 ,随机分为 5组 :①正常对照组 ,②增生组 ,③阴性对照组 ,④中药方剂组 ,⑤非那雄胺 (保列治 )阳性对照组 ;每组 2 4只。正常对照组小鼠直接处死取前列腺观察湿重 ,对其余小鼠采用尿生殖窦植入方法建立小鼠良性前列腺增生 (BPH)模型 ,增生组小鼠于第 6 1天处死取前列腺观察湿重 ;其他组小鼠分别于第 6 1天开始喂生理盐水、中药方剂及保列治 ,于第 91天处死取前列腺观察湿重 ,应用流式细胞术 (FCM)检测 3组前列腺细胞增殖率及凋亡率的变化。　结果　增生组前列腺重量为 (14 9.30± 8.6 4 )mg ,中药方剂组为 (85 .6 0± 17.97)mg,两组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。增生组前列腺细胞凋亡率为 (3.6 6± 0 .73) % ,增殖率为 (2 6 .0 5± 3.0 2 ) % ;中药方剂组凋亡率为 (6 .6 7± 1.91) % ,增殖率为 (2 6 .2 8± 2 .84 ) % ;保列治组凋亡率为 (6 .2 6± 2 .4 2 ) % ,增殖率为 (2 6 .2 9± 4 .0 7) %。中药方剂组前列腺细胞凋亡率较增生组明显升高 (P <0 .0     

选择性环氧合酶抑制剂ｃｅｌｅｃｏｘｉｂ对血管平滑肌细胞的增殖抑制、凋亡诱导作用和分子机制

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞莱昔布(celecoxib)对血管平滑肌细胞的增殖抑制作用及分子机制.方法:给予原代培养的大鼠平滑肌细胞不同浓度的celecoxib处理,WST-1细胞增殖实验观察细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测凋亡;Western blot方法检测血管平滑肌细胞COX-2的表达、caspase-3蛋白的裂解激活、磷酸化Akt的表达.结果:WST-1实验结果显示.经0、6.25、12.50、25.00、50.00 μmol/Lcelecoxib作用24 h后,细胞的增殖率分别为100%、81.15%、66.72%、54.93%和11.41%:50 μmol/L celecoxib作用24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率为30.72%;Western blot实验显示,血管平滑肌细胞中COX-2有表达,celecoxib作用于细胞后caspase-3蛋白裂解片段激活,磷酸化Akt的表达减弱或消失.结论:celecoxib对血管平滑肌细胞有增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能部分涉及到Akt/caspase途径.     

补肾方对PC12细胞增殖能力及突起形成的影响

目的:根据肾精化生脑髓理论,寻证"肾通于脑"的生理学机制.方法:采用中药血清药理法和体外神经细胞PC12的培养,测定细胞存活和生长能力以及突起数目,分析补肾益智方对不同年龄段大鼠脑髓作用的影响.结果:补肾益智方对于PC12细胞的作用老年组在不同浓度均较青年组增殖率高;而且细胞突起均较对照组有显著差异.提示补肾中药复方在体外对正常的神经元的生长可能具有促进作用.结论:补肾方老年血清组对神经元生长有促进作用,提示"肾通于脑"的生理学机制之一在于促神经元生长.     

U937巨噬细胞对SW872脂肪细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨U937巨噬细胞与SW872脂肪细胞混合培养状态下对脂肪细胞增殖及凋亡的影响,及巨噬细胞在脂肪细胞胰岛素抵抗形成中的意义.方法 以SW872前脂肪细胞,0.6、1.2 mmol/L油酸诱导分化成熟SW872脂肪细胞为研究对象,分别与U937巨噬细胞混合培养,采用酶联免疫吸附法测定各组混合培养前后TNF-α、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)分泌水平的变化,应用四甲基偶氮唑盐比色法检测对前脂肪细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测各组脂肪细胞在不同炎性反应状态下对细胞凋亡的影响.采用配对t检验对数据进行分析处理.结果 随着油酸诱导水平的增加及SW872前脂肪细胞分化成熟,TNF-α、MCP-1分泌水平均明显升高,脂肪细胞凋亡率亦逐渐增加(Pa<0.05);在与U937巨噬细胞混合培养后,TNF-α、MCP-1分泌水平进一步升高,但炎性反应状态改变对各脂肪细胞组混合培养前后的凋亡率无明显影响(Pa>0.05);U937巨噬细胞的混合培养对SW872前脂肪细胞的增殖率有明显抑制作用(P<0.05).结论 油酸诱导SW872前脂肪细胞成熟分化,在高脂负荷下,炎性反应因子分泌水平急剧升高,同时脂肪细胞凋亡率增加.炎性反应负荷改变对脂肪细胞凋亡率无明显影响.巨噬细胞的趋化加重了其炎性反应状态,并抑制了前脂肪细胞的增殖.     

CD3AK与LAK细胞体外培养增殖及细胞毒活性的比较

我院 1993～ 1998年应用 CD3AK细胞、L AK细胞治疗癌症过程中 ,在细胞培养期间进行了两种细胞增殖力及杀伤力的比较。近年来对于 L AK细胞的抗肿瘤作用及临床已有广泛深入的研究。对 CD3AK也有了初步探讨。但对两种效应细胞的体外增殖及抗肿瘤作用同时进行比较则未见报道。本文对 CD3AK、L AK细胞的体外扩增、杀伤作用进行了比较 ,以期为选择合适的抗癌效应细胞用于临床治疗提供依据。1　资料与方法1.1　资料　均为住院癌症患者 ,不能应用常规手术及放、化疗 ,输用 CD3AK及 L AK细胞各 78例。1.2　主要试剂及细胞株　 Anip- 937…     

羊脱细胞真皮基质的体内外毒性实验

目的：利用溶血反应、热原反应和细胞毒性反应实验了解羊脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)在动物体内外的毒性反应强度。方法：溶血反应: 分别制作交联型和非交联型羊ADM的浸提液,为交联组和非交联组; 并设置阳性对照组10 mL灭菌注射用水,阴性对照组10 mL 0.9%氯化钠溶液。 将新鲜抗凝稀释兔血加入实验组和对照组试管中,离心后取上清液测量吸光度值,计算溶血度。热原实验：按照条件入选16只新西兰兔,分为初试A,B两组各3只和复试C,D两组各5只。分别将交联与未交联的两种ADM浸提液注射入两组新西兰兔体内,注射后每隔0.5 h测量一次体温,共测量6次,以6次中最高一次减去正常体温即为该兔的体温升高度数。据此判断是否符合生物制品热原实验的评价标准。MTT实验：收集对数期的小鼠成纤维细胞细胞,种植于含有不同浓度羊ADM浸提液的培养基,测量吸光度值进行细胞活力测定。结果：实验A,B组溶血度均小于5%,热原反应测得新西兰兔体温升高之和低于1.8 ℃。MTT实验显示10%~90%羊ADM浸提液培养基对体外细胞的毒性为1级,100%的羊浸提液对体外细胞的毒性为2级,交联型与非交联型组的浸提液对体外细胞的毒性的无显著性差异(P>0.05)。均对体外细胞的增殖影响轻微。结论：羊ADM植入新西兰兔体内引起的溶血反应和热原反应在评价标准之内,在体外对细胞的增殖和活力影响不明显。