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991.
目的构建由具有肿瘤特异性启动作用的端粒酶逆转录酶启动子(mTERT-promotor)驱动m4-1BBL(CD137Ligand)基因的腺病毒载体。方法用PCR和RT-PCR的方法,分别从C57BL/6小鼠组织中克隆mTERT启动子和共刺激分子m4-1BBL基因,通过T载体和转移载体将目的基因亚克隆到腺病毒载体上,293A细胞包装成病毒颗粒rAD-mTERT-m4-1BBL,流式细胞仪检测m4-1BBL基因在Hepa1-6及L929细胞上的表达。结果通过PCR检测、直接测序证实目的基因克隆成功并亚克隆到表达载体上,细胞免疫化法证实病毒包装成功,流式细胞仪检测发现重组腺病毒载体rAD-mTERT-m4-1BBL能特异性地在肿瘤细胞Hepa1-6上高表达m4-1BBL。结论由mTERT-promotor驱动m4-1BBL基因的具有肿瘤特异性的腺病毒载体构建成功,为下一步进行体内外抗肿瘤实验打下了基础。 相似文献
992.
目的:初步探讨uPAR反义RNA表达质粒对CIA大鼠滑膜细胞外基质的影响。方法:50只雌性大鼠,其中10只为正常对照组,不做任何处理,其余40只建立Ⅱ型胶原诱导的大鼠类风湿性关节炎模型,分为4组,每组10只,为造模对照组、生理盐水治疗组、空质粒治疗组、重组质粒治疗组,后3组踝关节分别注射生理盐水、空质粒及uPAR反义RNA表达质粒,观察大鼠一般情况、关节炎指数,病理变化及免疫组织化学法检测踝关节滑膜uPAR、MMP-3的表达。结果:随着CIA免疫时间的延长,造模对照组、生理盐水治疗组、空质粒治疗组关节炎指数评分逐渐增加迅速,而重组质粒治疗组关节炎指数评分增加缓慢;与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜,滑膜轻度增厚,滑膜新生血管开始增多,大量炎性细胞浸润、增生,免疫组织化学显示:模型对照组、生理盐水组及空质粒组之间无统计学意义(P〉0.05),模型对照组、生理盐水组、空质粒组与重组质粒治疗组之间差异有统计学意义(P〈0.01),MMP-3的表达正常大鼠与模型对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.05),模型对照组与重组质粒治疗组之间差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:uPAR反义RNA表达质粒能抑制细胞外基质的降解,为类风湿性关节炎的治疗提供理论依据。 相似文献
993.
学术背景:椎间盘源性疼痛是慢性腰背痛的一个主要原因,其炎性机制的作用越来越受到人们的重视。在炎症机制里有许多细胞因子参与,这些细胞因子在疼痛的发生、发展中起着怎样的作用,应如何利用这些细胞因子来治疗疼痛,说法不一。
目的:全面认识椎间盘突出的发病机制,认识各种细胞因子在疾病发生发展中的作用以及利用细胞因子治疗慢性疼痛的进展。
检索策略:应用计算机检索CNKD期刊全文数据库医药卫生类1994-01/2007-06关于椎间盘源性疼痛方面的文献,检索词“生物因子,疼痛”,限定文献语言种类为中文,获得文章153篇。同时计算机检索PubMed数据库2002-01/2007-06关于椎间盘源性疼痛方面的文章,检索词“gene,chronic pain”,限定文献语言种类为English,获得文章36篇。检索应用CAJViewer6.0软件。对资料进行初审,纳入标准:从基础到临床与细胞因子密切相关的文章。排除标准:重复性研究。对所得文献进行提炼,按上述标准纳入中文6篇,英文24篇。
文献评价:30篇文章中10篇侧重于基础研究和动物实验,20篇为临床研究文献。其中RCT文章7篇,循证医学系统综述1篇、汇总分析10篇、个例报道2篇、经验交流10篇。
资料综合:椎间盘源性疼痛除传统的机械压迫外,还包括炎症机制和免疫机制。炎症机制在椎间盘源性慢性疼痛中的作用越来越受到重视,其中有P物质、磷脂酶A2、肿瘤坏死因子、白细胞介素、生长因子、一氧化氮等多种细胞因子参与。免疫机制的作用也不容忽视。了解了慢性疼痛的发生机制,进而将白细胞介素1受体拮抗剂、血管内皮生长因子等应用于临床,疗效显著,应用前景广阔。
结论:疼痛的发生以及对于镇痛药物的不同反应有其一定的基因基础,细胞因子在椎间盘源性疼痛的发生、发展以及治疗中都起着非常重要的作用。 相似文献
994.
背景:近年来基因修饰干细胞与支架材料复合形成组织工程化骨为修复骨缺损提供了骨组织重建的全新思路。
目的:实验拟观察转染人骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞复合珊瑚羟基磷灰石支架材料修复骨质疏松症下颌骨缺损的效果。
设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-06/2006-10在教育部口腔生物医学工程重点实验室完成。
材料:6月龄未孕雌性SD大鼠24只,SPF级,体质量250~300 g,构建绝经后骨质疏松症动物模型。含人骨形态发生蛋白2基因的pcDNA3.1-hBMP-2重组质粒由解放军第三军医大学提供;支架材料珊瑚羟基磷灰石由卫生部口腔生物医学工程重点实验室提供。
方法:24只SD模型大鼠随机数字表法分为实验组和对照组,每组12只。3个月后分别取其骨髓间充质干细胞培养。实验组骨髓间充质干细胞通过脂质体Lipogen介导转染pcDNA3.1-hBMP-2质粒,对照组细胞未作处理。3 d 后将每只大鼠骨髓间充质干细胞与珊瑚羟基磷灰石支架材料复合,再分别对应地植入取材动物的自体下颌骨极限性骨缺损区。
主要观察指标:术后第4,8周组织切片行免疫组织化学染色,观察新骨形成情况。术后8周进行成骨量的半定量检测。
结果:24只SD模型大鼠均进入结果分析。①术后4周实验组在珊瑚羟基磷灰石材料边缘有新生骨质形成,8周时见相互连接的层板状成熟骨基质形成,对照组4周时只在材料边缘有少量骨基质形成,8周时新生骨质数量上明显少于实验组,且材料边缘及中央处有脂肪样结构形成。②对照组术后8周新生骨所占面积百分比为(0.046±0.004)%,实验组为(0.233± 0.015)%,各组成骨量差异具有显著性意义(P < 0.01)。
结论:人骨形态发生蛋白2基因修饰的骨髓间充质干细胞复合珊瑚羟基磷灰石支架形成的组织工程化骨修复骨质疏松症下颌骨的成骨量较无基因修饰明显增加。 相似文献
995.
Li XG Yan JT Xu XZ Wang JN Cheng LM Wang T Zuo P Wang DW 《Acta pharmacologica Sinica》2007,28(11):1737-1745
Aim:The renin-angiotensin system plays a crucial role in the development and establishment of hypertension, and the pharmacological blockade of the system results in a reduction in blood pressure. In the present study, we investigated whether the effects of a novel, double-stranded, recombinant adeno-associated virus vector (rAAV)-mediated antisense angiotensin Ⅱ receptor 1 (AT1R) gene efficiently prevents the development of hypertension induced by a high-salt diet in adult, male Sprague-Dawley (SD) rats. Methods:A rAAV was prepared with a cassette containing a cytomegalovirus promoter and partial cDNA (660 base pairs) for the AT1R inserted in the antisense direction (rAAV-AT1-AS). A single tail vein injection of the rAAV-AT1-AS or rAAV-GFP (green fluorescent protein, a reporter gene) was performed in adult, male SD rats. Two weeks after injection, the animals were fed a diet containing 8% NaCl, and the systolic blood pressure was measured weekly using the tail-cuff method for 12 weeks. Results: The high-salt diet induced a significant rise in systolic blood pressure in the rAAV-GFP-treated animals; however, the rAAV-AT1-AS treatment attenuated the rise in blood pressure (142.7±4.5 mmHg vs 117±3.8 mmHg, P〈0.01), and the hypotensive effect was maintained until the experiments ended at 12 weeks. In the rAAV-GFP-treated animals AT1 was overexpressed in various tissues, especially in the aorta and kidney at mRNA levels; in contrast, rAAV-AT1-AS treatment markedly attenuated AT1 expression. Furthermore, rAAV-AT1-AS treatment prevented target organ damages from hypertension, including cardiac dysfunction and renal injury compared to the rAAV-GFP group. Conclusion:These results suggest that rAAVmediated anti-AT1 delivery attenuates the development of hypertension and protects against renal injury and cardiac remodeling. 相似文献
996.
997.
重组梅毒螺旋体抗原的研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
尹跃平 《国外医学:皮肤性病学分册》1999,25(6):352-355
在梅毒螺旋体人工培养尚未获得成功的情况下,基因克隆技术的出现为该病原体的研究开辟了一条新的途径。应用基因工程技术目前已制备出多种重组梅毒螺旋体抗原,这些抗原的制备对梅毒发病机理的探讨,疫苗的研制,以及血清学诊断试验的建立与应用具有重要意义,为梅毒的预防和控制提供了更加有效的手段。 相似文献
998.
转基因是指将外源性基因导入靶细胞,促使转入基因适度表达。该研究是基因治疗方法的基础。由于皮肤细胞所特有的生物学优势,使以皮肤细胞为靶向进行转基因研究极具应用前景,本文就目前皮肤转基因相关技术、载体、应用的最新进展做一综述。 相似文献
999.
1000.