泊沙康唑注射液无菌检查方法适用性研究

目的:建立泊沙康唑注射液无菌检查的方法.方法:按《中国药典》2015年版,采用薄膜过滤法进行方法适用性试验,选择聚山梨酯80作为中和剂,以及消除泊沙康唑抗菌活性的冲洗方式,建立该品种的无菌检查方法.结果:以0.9％无菌氯化钠溶液每250 mL中加入7.5 mL聚山梨酯80,混匀,作为冲洗液,约每管400 mL的冲洗量,...     

依沙吖啶糊膏微生物限度检查法的验证

目的 建立依沙吖啶糊膏微生物限度检查法.方法 采用平皿法(常规法、培养基稀释法).结果 细菌、霉菌和酵母菌计数验证的5个试验菌株,回收率均达到70%以上;控制菌阳性对照生长良好.结论 用培养基稀释法测定细菌数、霉菌和酵母菌数和控制菌.     

支气管肺泡灌洗液BACTECMGIT960system快速分离结核杆菌的效果评价

结核分枝杆菌培养是结核病细菌学检查的金标准[1],而目前常规使用结核分枝杆菌改良罗氏培养基培养法,存在结核菌生长缓慢,阳性率低,严重影响结核病的诊断治疗的现状,因而寻找一种快速培养结核分枝杆菌的方法对结核病诊断治疗有着重大意义.2007年我院购进的BACTECMGI960system是培养结核分枝杆菌的一种新方法、新技术.为了更好更快更准确为临床治疗提供检验依据,我院应用了作为标本相结合的分离培养结核分枝杆菌的新方法.为了解其分离结核分枝杆菌的效果,以常规的改良罗氏培养基、结核菌快速培养仪和常规痰标本、支气管肺泡灌洗液两两结合对比研究,报告如下.     

BSO对内皮细胞氧化还原状态的影响

目的　探讨人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells, HUVEC)在慢性髓性白血病细胞株K562细胞条件培养基作用下氧化还原状态的变化与其增殖活性间的关系,观察谷胱甘肽合成抑制剂丁胱亚磺酰亚胺(buthioninesulfoxine, BSO)在上述条件下对HUVECs的作用,为探索相应的抗肿瘤血管生成治疗策略提供新思路。方法　用K562细胞条件培养基、谷胱甘肽合成抑制剂共同或单独处理HUVEC,检测HUVEC细胞内氧化还原状态以及细胞活力的改变。结果　K562细胞条件培养基明显促进内皮细胞的增殖,并促进内皮细胞氧化型与还原型谷胱甘肽(GSSG与GSH)、辅酶Ⅱ(NADP+与NADPH)两对氧化和还原性物质同时增高,但GSSG/GSH、NADP+ /NADPH比值未变。BSO显示出对HUVEC生长的明显抑制,引起HUVEC中GSH、NADPH含量明显降低、GSSG/GSH、NADP+ /NADPH比值升高;在K562细胞条件培养基的同时作用下,BSO对HUVEC的生长抑制作用增强, 使细胞内GSSG/GSH、NADP+ /NADPH比值进一步提高。结论　慢性髓性白血病细胞条件培养基使得血管内皮细胞对BSO的生长抑制作用更加敏感,其机制与内皮细胞氧化还原状态的改变密切相关。     

重组人白介素18的发酵、纯化及功能鉴定

目的:利用构建的重组菌株Pichia pastoris X-33/hlL-18,在3.7L发酵罐中表达重组人自介素18(hIL-18),探讨其大规模发酵及纯化工艺.方法:复苏工程菌X-33/hIL-18于BMGY培养基,在其A600鲫达到6左右时转入发酵罐进行高密度发酵.发酵液经过滤浓缩柱、疏水层析和阴离子交换层析分离纯化.结果:工程菌在3.7 L发酵罐采用甲醇诱导补料批式发酵,在pH 6.0,溶氧值(DO)20%～30%,温度28℃,甲醇诱导48 h重组hIL-18的表达产量为202 mg/L,发酵液经纯化后纯度可达97%以上,并初步证明重组hIL-18能协同IL-2诱导PBMCs分泌IFN-γ和协同IL-2增强NK细胞的杀伤活性.结论:利用Pichia pastoris分泌型表达系统和建立的分离纯化方法,能获得大量较高纯度的重组hIL-18,为进一步研究其活性和功能奠定基础.     

无菌预灌装培养平皿的质量控制

目的：通过对比3家不同供应商的无菌预灌装培养平皿实验结果,筛选出质量较好的平皿培养基,同时探讨其供应商筛选、进厂检查和使用方法,为无菌药品生产企业进行无菌预灌装培养平皿的质量控制工作提供参考。方法：分别对3家供应商的无菌预灌装培养平皿进行3个批次的模拟使用,培养基无菌性、内层包装袋无菌性、平皿密闭性和培养基适用性检查,筛选适合用于无菌生产区洁净环境微生物监测的平皿培养基。结果：3家供应商的模拟使用、培养基无菌性和内层包装袋无菌性实验结果没有差异,供应商A的平皿密闭性和培养基适用性实验结果较另外两家更好。结论：本实验方法可用于筛选质量较好的无菌预灌装培养平皿。     

用中药改良血标本双相培养基的实验研究

目的：寻找一种适合各级医院尤其是基层医院使用,能显著提高血标本细菌检出阳性率和缩短检验时间的优质血标本培养基。方法：将90份模拟血标本分别接种于枣豆双相培养基与普通双相培养基,并进行比较。结果：多种细菌在枣豆双相培养基上均较普通双相培养基生长良好。经McNemarχ2检验,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：用枣豆双相培养基进行血标本细菌培养,可大大提高血标本细菌检出的阳性率和缩短检验时间,从而快速做出病原学诊断。     

产纽莫康定B0丝状真菌Filamentous fungus的菌种选育和发酵工艺优化

纽莫康定B0(pneumocandin B0,PB0)是由丝状真菌Filamentous fungus产生的次级代谢产物,可用于合成抗真菌药物卡泊芬净.为提高PB0的产量,对丝状真菌SIPI 2776菌株进行亚硝基胍(NTG)、60Co伽马射线(60Co-y)、紫外(UV)和常压室温等离子体(ARTP)等诱变,获得突变...     

BacT/Alert 3D系统2种细菌培养瓶的临床应用对比评价

目的评价Bact／Alert 3D全自动血培养仪配套标准需氧（SA）瓶和中和抗生素需氧（FA）瓶临床应用情况。方法采用Bact／Alert 3D全自动血培养系统配套标准需氧瓶和中和抗生素需氧瓶平行监测。在SA和FA培养瓶中同时加入一定量抗生素和菌液比较2种培养瓶对抗生素的吸附能力;标本培养周期为5d,不论系统显示阳性或阴性,均进行涂片检查和转种血琼脂、巧克力琼脂平板培养,观察2种瓶检出细菌时间、阳性率、敏感性、特异性、准确性、假阳性率,假阴性率等。结果96例平行接种标准需氧瓶和中和抗生素需氧瓶标本中,2种瓶最快阳性检出时间均为1．5h;SA培养瓶检出20例阳性,阳性率为20．8％,敏感性为95．0％,特异性为98．7％,准确度为97．9％,假阳性率为5．0％,假阴性率为1．3％;接种FA培养瓶检出26例阳性,阳性率为27．1％。敏感性为96．0％,特异性为97．2％,准确度为96．9％,假阳性率为7．7％,假阴性率为1．4％。标准菌株在含4倍最低抑菌浓度抗生素的FA瓶中仍能生长,但在含同样抗生素的标准瓶中不生长。结论在Bact／Alert 3D仪各项技术指标及实验室环境符合要求的条件下,标准需氧瓶和中和抗生素需氧瓶均为较好的配套培养瓶;接受抗生素治疗的患者,使用中和抗生素需氧（FA）瓶比标准需氧（SA）瓶阳性检出率更高。     

铁皮石斛试管苗壮苗培养基的研究

目的:研究铁皮石斛试管苗生产中,壮苗阶段的适宜培养基。方法:对基本培养基、天然提取物、香蕉提取物浓度和激素种类的选择进行了研究。结果:基本培养基以B₅或1/2MS为好;天然提取物应选用香蕉水提物,香蕉水提物浓度为10%;植物激素是2mg/L的NAA较好。结论:以上培养基组成是铁皮石斛试管苗壮苗的适宜培养基。