顺式串联双拷贝DuIFN一γ基因的真核表达

目的:以鸭γ-干扰素(DuIFN-γ)基因为目的基因,研究同一启动子调控下,不同拷贝数的目的基因的表达状况.方法:采用基因重组技术构建含DuIFN-γcDNA单拷贝和双拷贝重组质粒并转入真核细胞COS-7中进行表达.DuIFN-γ活性采用Griess试剂检测.结果:双拷贝重组质粒和单拷贝重组质粒50%最大活性稀释度分别为1:320和1:160.双拷贝重组质粒转染上清稀释10240倍后,仍保留DuIFN-γ活性,而单拷贝重组质粒转染上清经1280倍稀释后,即丧失活性.结论:在同一启动子作用下,顺式插入双拷贝目的基因可明显增强目的基因在真核细胞中的表达量.     

岩下窦血样ACTH测定与经蝶垂体手术治疗柯兴氏病

柯兴氏病是由于垂体 ACTH分泌过多所引起机体高皮质血症及由其产生的一系列病理生理改变。垂体 ACTH分泌过高原因主要是 ACTH腺瘤或 ACTH细胞增生。过去对此病主要是采用双侧肾上腺切除术、垂体放疗及药物治疗。随着内分泌技术的发展和经蝶垂体手术技术的提高和成熟 ,现经蝶垂体手术已成为该病治疗临床上的首选及发展的趋向。由于 CT、MR等影象学对相当一部分微腺瘤难以诊断 ,而普通内分泌技术对柯兴氏病和其他原因引起的柯兴氏综合症有时难以鉴别。这样一方面造成临床上鉴别诊断及手术病例选择的困难 ,另一方面术中探查时难以确定…     

尿5＇-核苷酸磷酸二酯酶的测定方法

目的建立-种测定尿5,-核苷酸磷酸二酯酶(5＇-NPD)的新方法,试图为临床诊断提供一项检测早期肾损害的生化指标.方法以5＇-[5-碘吲哚酚-(3)]胸腺嘧啶核苷酸铵盐作为检测尿5＇-核苷酸磷酸二酯酶的底物,在pH9.0缓冲体系中进行酶促反应后,在波长A580nm下测定尿5＇-NPD的吸光度(OD)值.结果该法重复性cv=1.98%;尿5＇-NPD酶活力与OD值的线性关系Y=4.116X+0.0276,r=0.993.用该法分别检测30例肾病患者和50例正常人的尿5＇-NPD,肾病患者的尿5＇-NPD酶活力明显高于正常人(P＜0.0¨.结论提示尿5＇-NPD可望作为临床诊断早期肾损害的一项有意义的生化指标.     

基质金属蛋白酶-2、CD44V6在胃癌中的表达及与肿瘤侵袭转移关系的研究

目的研究基质金属蛋白酶-2(MMP2)、CD44V6在胃癌中的表达及其与胃癌扩散转移的关系.方法应用免疫组织化学S-P法观察MMP2和CD44V6在71例胃癌组织中的表达.结果(1)MMP2在胃癌中表达明显高于正常胃组织(P<0.01);在肠型组、弥漫型组中的表达无显著差异(P>0.05);在淋巴结转移组表达明显高于无转移组(P<0.01);粘膜及粘膜下组表达与肌层组、浆膜层组相比差异非常显著(P<0.01).(2)CD44V6在胃癌中表达明显高于正常胃组织(P<0.01);肠型组表达明显高于弥漫型组(P<0.01);在淋巴结转移组表达高于未转移组(P<0.05);粘膜及粘膜下组表达与肌层组、浆膜层组相比差异显著(P<0.05).(3)胃癌MMP2和CD44V6两者表达间呈正相关(r＝0.756,P<0.05).结论MMP2、CD44V6在胃癌中均过度表达,MMP2、CD44V6均与胃癌的发生、侵袭和淋巴结转移有关,可作为预后的判断指标.     

99mTc-Q3与201Tl在不同流量冠脉灌注的离体兔心肌中的清除及存留特性研究

目的　探讨不同流量冠脉灌注的离体兔心肌对 99m Tc- Q3和 2 0 1 Tl的清除及存留特性 ,进一步揭示 99m Tc- Q3和 2 0 1 Tl在不同流量冠脉灌注的离体兔心肌中的摄取、清除及存留量之间的关系。方法　选用 2 0只新西兰大白兔 ,于麻醉下开胸 ,摘取心脏 ,建立离体兔心脏灌流模型。采用双核素法进行离体兔心脏灌注。结果　心肌对 2 0 1 Tl的净摄取值大于 99m Tc- Q3,但其改变受血流灌注量影响也比 99m Tc- Q3更明显。高流量灌注组 ,注射示踪剂后4～ 2 5分钟内 ,2 0 1 Tl的清除比 99m Tc- Q3清除更快 ;低流量灌注组 ,注射示踪剂后 40分钟内 2 0 1 Tl清除比 99m Tc- Q3快。高流量灌流组中观察到的 2 0 1 Tl早期快速清除现象在低流量灌注组中未出现 ,而 99m Tc- Q3在两组中均未见早期快速清除。结论　由于 2 0 1 Tl的清除比 99m Tc- Q3清除更快 ,其较高摄取的优势在药物注射后 10分钟时已完全丧失 ,故 99m Tc- Q3仍不失为一种优良的心肌灌注显像剂 ,值得进一步研究。     

体外循环时心肌细胞上ICAM-1的变化及抑肽酶对其表达的影响

为观察心脏瓣膜置换术病人在CPB前后心肌上ICAM-1的表达,并探讨抑肽酶对其表达的影响,选择择期心脏瓣膜替换术病人20例,随机分为抑肽酶组和对照组,各10例。分别于手术开始及结束时取右心房心肌标本,采用免疫组化法检测心肌细胞及心肌血管内皮细胞上ICAM-1的表达,以测得ICAM-1积分光密度值（IOD值）进行分析。结果心脏瓣膜替换术病人CPB后心肌细胞上ICAM-1的表达较术前有明显增加（P<0.05）,而在抑肽酶组则无明显变化。组间比较,差异具有显著意义,P<0.05。在对照组,心肌血管EC上ICAM-1在CPB后表达明显增加（P<0.05）,而抑肽酶组,差异无显著性。组间比较,P<0.05。认为CPB时心肌细胞及心肌血管EC上ICAM-1的表达增高,ICAM-1可能参与CPB时心肌的炎症损伤,抑肽酶可以通过抑制ICAM-1的表达而减轻CPB所致的炎症反应。     

切线时间常数在慢性阻塞性肺疾病及肺心病患者F-V曲线形状转变中的变化及临床意义

目的　探讨切线时间常数 ( τt)在慢性阻塞性肺疾病 ( COPD,慢阻肺 )和肺心病患者 F- V曲线形状转变中的变化及临床意义。方法　测定了 90例缓解期 COPD患者 (慢支 43例 ,肺气肿 47例 )及 31例合并肺心病患者的 F- V曲线。并在 F- V曲线上测量高、中、低肺容积的切线时间常数 τt75 、τt5 0 、τt2 5 ,与正常人和吸烟者的 τt作对比分析。结果　 1正常范围内 F- V曲线形状呈平台型、直线型、凸型和凹型 4种 ,| τt75 | >1s或 <1s,τt2 5 <1s,τt关系呈“青少年式”或“老年式”;2轻、中度异常的 F- V曲线呈凸型 ,| τt75 | <1s,τt2 5 ≈ 1s或 >1s,τt 关系呈“喇叭式”改变 ;3严重异常的 F- V曲线形状呈双曲线型 ,| τt75 | <1s,τt2 5 =4s～ 10 s,τt关系呈“塔式”改变。结论　双曲线型、τt2 5 极度延长和“塔式”改变是判断病情严重性的三大重要标志。该方法简便准确 ,利于在临床推广应用     

云南个旧和宣威地区肺癌p53突变检测研究

目的　云南个旧及宣威地区是云南省肺癌的两大点状高发区 ,个旧以矿工为高发人群 ,宣威以农民为高发 ,该两地区肺癌发生的病因已初步阐明 ,本研究旨在深入探讨其发病的分子生物学基础。方法　对 2 6例个旧矿工肺癌患者 ,15例宣威农民肺癌患者 ,应用聚合酶链反应 -单链构象多态性法研究 p5 3第 5至第 8外显子突变 ,并对有突变的个体进行测序。结果　发现云锡矿工肺癌患者中有 13例、宣威农民肺癌患者中有 4例发生 p5 3突变 ,应用 DNA测序 ,发现云锡矿工肺癌中有 1例于第 135位密码子发生突变 ,由 GCC→ GTC,导致氨基酸改变 ,由丙氨酸→缬氨酸 (Ala→ Val) ,宣威农民肺癌患者中有 1例于 2 47位密码子突变 ,由 AAC→ TTC,导致氨基酸发生改变 ,由天冬酰氨→苯丙氨酸 (Asn→ Phe)。结论　 p5 3突变在云锡矿工肺癌和宣威农民肺癌中较常发生 ,并发现两例新的突变位点。 p5 3突变与病人的年龄、性别、坑龄及组织学分类无明显联系     

654-2在严重胸部创伤中对急性肺损伤的防治作用

严重胸部创伤在创伤中是仅次于头部创伤的致死原因 ,胸外伤中连枷胸、肺挫伤造成呼吸功能不全 ,引起创伤性急性肺损伤 (ＡＬＩ)甚至呼吸窘迫综合征 (ＡＲＤＳ)是主要的死因。近年来动物实验和临床均证明 6 5 4 2对ＡＬＩ有明显的防治作用[1] 。我们自 1998年 9月至 2 0 0 0年 9月应用 6 5 4 2治疗严重胸部创伤 35例 ,取得良好效果 ,现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料　选择符合下列条件之一者进行观察 :①多根多处肋骨骨折 ;②肺挫伤 ;③中度以上血气胸。 35例中男2 9例 ,女 6例 ,年龄 2 3～ 6 1岁 ,平均 34.2岁。致伤原因 :挤压伤 19例…