人呼吸道合胞病毒北京地区A亚型ON1基因型地方株感染A549细胞转录组学分析

目的应用转录组测序方法, 分析北京地区人呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RSV)A亚型优势流行基因型ON1地方株感染A549细胞后差异表达基因, 为RSV防治提供潜在靶点。方法选用已经过全基因组测序确定为RSV A亚型ON1基因型的地方株(61397-ON1)感染A549细胞, 提取总mRNA, 通过转录组测序筛选出与未感染的A549细胞为对照的差异表达基因, 对其进行GO分析、KEGG通路分析, 同时随机选择6个差异表达倍数大于2倍的基因进行qRT-PCR验证。结果以未感染的A549细胞为对照, 筛选出1 632个差异表达基因, 其中807个基因表达上调, 825个基因表达下调。差异基因主要参与细胞因子反应以及MAPK级联反应正向调控等免疫应答相关生物过程, 并在MAPK信号通路、NOD样受体信号通路、p53信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路及NF-κB信号通路发生了富集。选择的6个差异表达基因qRT-PCR验证结果与转录组数据趋势一致。结论 RSV A亚型ON1基因型毒株感染A549细胞后的差异表达基因主要参与细胞因子应答及免疫相...     

子宫内膜癌细胞雌激素受体亚型的调控和功能的初步研究

目的初步建立子宫内膜癌雌激素受体（ER）亚型α或β弱表达的细胞模型,研究雌激素及他莫昔芬（TAM）与ER亚型的关系。方法分别设计针对ERα和ERβ的反义寡脱氧核苷酸（ODN）、正义ODN、错义ODN,并转染子宫内膜癌细胞株Ishikawa,将Ishikawa细胞分为4组,即未转染组、反义ODN组、正义ODN组及错义ODN组。蛋白印迹法测定转染后细胞ERα和ERβ蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测转染ODN后,17β雌二醇和TAM对Ishikawa细胞生长的影响。结果（1）分别针对ERα及ERβ的反义ODN可以选择性下调转染的Ishikawa细胞中ERα及ERβ蛋白的表达（分别下调45％和54％）。（2）17β雌二醇及TAM可以促进未转染组Ishikawa细胞的生长。转染ERα反义ODN后,可抑制17β雌二醇及TAM对Ishikawa细胞的促生长作用,以转染后的24、48及72h为著,反义ODN组各时间点分别与未转染、正义ODN、错义ODN组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。（3）转染ERβ反义ODN后,17β雌二醇对Ishikawa细胞的促生长作用的改变不明显。转染ERβ反义ODN可抑制TAM对Ishikawa细胞的促生长作用,以转染后72h为著,反义ODN组分别与未转染、正义ODN、错义ODN组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论（1）反义核酸技术能够特异性地有效下调Ishikawa细胞中ERα和ERβ蛋白的表达,其可作为子宫内膜癌细胞中ER调控的一种有效的实验手段。（2）17β雌二醇促进子宫内膜癌细胞生长的作用主要通过ERβ介导;ERβ和ERβ均参与TAM促进子宫内膜癌细胞生长的作用。     

浙江省耐药结核分枝杆菌katG、rpoB、embB基因突变特点研究

目的 了解浙江省耐异烟肼、利福平、乙胺丁醇结核分枝杆菌katG、rpoB、embB基因突变特点.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv为对照,应用聚合酶链反应--单链构象多态性(PCR-SSCP)技术、聚合酶链反应--直接测序(PCR-DS)技术检测100株耐药结核分枝杆菌临床分离株katG、rpoB、embB基因.结果 经PCR-DS检测katG基因突变率达54.8%,以Ser315Thr突变最常见(40.3%);在耐利福平菌株中,rpoB基因突变率达88.9%,以526、531位氨基酸改变最常见,总突变率达77.8%(63/81);在耐乙胺丁醇菌株中,embB基因突变率达60%,以Met306VaI改变最常见(28.9%).结论 PCR-SSCP技术操作简单、检测快速,可作为临床耐药检测的辅助手段;浙江省结核菌耐药基因突变位点同国内研究基本一致,各位点突变形式所占比例有自身特点.     

细粒棘球蚴中国大陆株谷胱甘肽s-转移酶结构与功能的生物信息学分析

目的 应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株谷胱甘肽s-转移酶(EgGST)氨基酸序列的结构与功能.方法 应用DNAStar、NCBI/BLAST、Bioetm、SWISS-MODEL等生物信息学软件分析EgGsr的基因序列,推算出其编码的氨基酸序列与其他物种的同源序列,进行多序列同源比对,构建分子进化树;预测二级结构、拓扑结构;同源模建预测三级结构;预测主要抗原表位等.结果 经RT-PCR扩增得到的660bpEgGSIDNA片段,经DNAman分析软件同源性比较发现,与GenBank中检索的EgGST基因序列同源性为99%;EgGST与不同生物间的同源性平均达45%;该基因编码的蛋白分子量为25492.53Da,有219个氨基酸,等电点为7.532,有31个酸性氨基酸,32个碱性氨基酸,52个极性氨基酸和7个非极性氨基酸;有8个抗原表位肽段15G-29R,30E-39C,40S-68R,69G-82Q,83I-90M,91D-120A,121P-133Q,134L-144N.结论 EgGST可能是免疫诊断、药物作用及疫苗潜在的靶分子.     

基于因子分析的女性肺一氧化碳弥散量与地理因素的关系

目的为制定成年女性肺一氧化碳弥散量参考值的统一标准提供科学依据。方法收集了中国用单次呼吸测量法测定68个单位的15549例健康成年女性肺一氧化碳弥散量参考值。运用相关分析的方法研究了其与海拔高度（X1）、年日照时数（X2）、年平均气温（X3）、气温年较差（X4）、年平均相对湿度（X5）、年降水量（X6）、年平均风速（X7）、年平均总云量（X8）的关系。结果发现海拔高度是影响成年女性肺弥散功能最主要的因素,随着海拔高度的增加而成年女性肺一氧化碳弥散量参考值也在增加。运用因子分析将8个地理因素综合为3个公共因子F1、F2、F3用其得分值代替推导出的回归模型为：Y-24．284＋0．004687F1-0．009473 F2—0．005065F3±5．86。结论如果知道了中国某地的地理指标,用此模型可以估算出这个地区的成年女性肺一氧化碳弥散量参考值,依据女性肺一氧化碳弥散量参考值与地理因素的依赖关系把中国分为青藏区,西南区,西北区,东南区,华北区,东北区等6个地区。     

勇于创新的科研团队——陕西师范大学旅游与环境学院健康地理课题组

从1989年开始,陕西师范大学联合西安交通大学医学院、中国人民解放军第四军医大学和西安电力中心医院等单位,一直从事医学参考值与地理因素之间的定量关系研究。团队负责人葛淼研究员,现任陕西师范大学旅游与环境学院实验室主任、健康地理研究所所长,地理学和区域环境学博士生导师,中国地理学会医学地理专业委员会委员,陕西省地理学会常务理事、副秘书长     

分子生物学技术在细粒棘球绦虫虫株分类研究中的应用

以往主要利用形态解剖学、生物学及生物化学方法对细粒棘球绦虫虫株进行分类鉴定,近年来分子生物学技术迅速发展,广泛应用于寄生虫分类学研究.本文拟对核酸序列分析以及AFLP、RAPD、微卫星DNA等分子生物学技术在细粒棘球绦虫虫株分类、鉴定及遗传变异中的应用概况及研究进展作一综述.     

定位针穿细胞接种法建立兔脑VX2肿瘤模型

目的:探讨微创定位针穿刺细胞接种法建立兔脑VX2肿瘤模型的方法并观察肿瘤生长特性。方法:经测量计算确定冠状缝的位置及其与正中矢状线的交叉点和接种位点后,采用可调节钻孔深度的金属钻在头颅正中矢状线右侧5mm,冠状缝后5mm处接种位点钻一Φ1.2mm的穿刺孔,取VX2肿瘤细胞悬液0.1ml(1×107细胞/ml)注射接种入12只2.5kg～3kg的成年New Zealand大白兔的大脑皮质表面下2mm深度内。接种后第6天、10天和14天,冠状切面测定肿瘤体积和观察组织病理学改变,以及神经系统体征变化。结果:VX2肿瘤细胞接种入脑皮质后12只成瘤,成瘤率为100%;肿瘤体积与接种后的生长时间呈对数相关(r=0.91,P<0.01),其体积倍增时间为1.34天;接种10天后,脑皮质表面血管较丰富,肿瘤呈卵圆形实质性生长,与正常脑组织边界清楚,肿瘤中央明显坏死;肿瘤细胞明显浸润正常脑组织并形成瘤块,瘤周脑组织形成水肿带。结论:采用定位针穿细胞注射法颅内接种兔VX2肿瘤细胞能较好地模拟颅内肿瘤生长,其生长特性与原发性或转移性脑肿瘤相似,且可缩短等待时间,尤其适合脑肿瘤的影像学诊断、CT灌注参数及放疗靶区勾画的实验研究。     

论肥人多阳虚痰湿、瘦人多阴虚火热——附1,257例体型与体质的调查分析

通过对东南义乌、西北延安和上海的1,257例对象体型与体质的调查分析,作者发现肥胖人群中阴虚和痰湿体质比例偏高,瘦削人群中阴血虚或阴虚火热者为多;地理区域和季节的不同,体型与体质的关系也略有变化。故作者认为可将体型列为判断阴虚阳虚的参佐依据,但必须兼顾地理和季节等因素。     

浙江新分离汉坦病毒ZT71株S基因片段的克隆及序列分析

目的为了获得浙江省汉坦病毒基因组更为详尽的资料,研究汉坦病毒的进化状况及变异程度,为疫苗病毒株的选择使用提供科学依据。方法本实验室利用RT-PCR方法扩增ZT71株S基因片段并克隆入质粒载体,进行核苷酸序列测定及分析。结果ZT71株S基因由1754个核苷酸组成,只有一个开放读码框架,共编码429个氨基酸。与HTN型病毒(76-118)的核苷酸和氨基酸同源性分别为72.0%和82.6%,与SEO型病毒(SR-11、R22、Guo3、8610)核苷酸和氨基酸同源性分别为88.4%—96.5%和98.1%—99.0%,与其它型汉坦病毒的同源都很低。结论表明此分离的病毒为SEO型汉坦病毒,为进一步研究其进化和变异提供了有利条件。