土鳖虫醇提蛋白的分离纯化及其体外抗肝癌与抑制肝纤维化活性研究

目的 采用体外细胞实验评价土鳖虫醇提物中大分子蛋白各分离产物的抗肝癌与抑制肝纤维化活性,明确土鳖虫的有效部位与成分。方法 采用盐析法从土鳖虫醇提物中回收蛋白类成分,将土鳖虫粗蛋白产物按分子量差异进行超滤,将其分为EEPA、EEPB及EEPC三个不同的蛋白部位,以抑制肝异常细胞增殖活性为导向,筛选最佳活性蛋白部位;接着经过DEAE阴离子层析及Sephadex G-100凝胶层析对活性粗蛋白部位进一步的纯化,从EEPC中分离出一种纯化蛋白PC3-Ⅲ,并对其进行LC-MS/MS分析;最后利用细胞实验评价EEPC及PC3-Ⅲ体外抗肝癌及抑制肝纤维化的活性。结果 在EEPA、EEPB及EEPC中,分子量最大的蛋白部位EEPC表现出最高的抑制肝异常细胞增殖活性;纯化蛋白PC3-Ⅲ分子量为10 kDa左右,经LC-MS/MS鉴定表明,PC3-Ⅲ对同源蛋白A0A0M3STY1的覆盖率达到35%,查库得到的肽段序列为QYSINFISAR、CNGDSCVCTFR和SNNFR;体外细胞实验证明PC3-Ⅲ不仅通过抑制肿瘤细胞生长、诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞迁移来共同发挥抗肝癌药效,还能抑制活化的肝星状细胞...     

土鳖虫的醇提条件研究

土鳖虫为节肢动物门昆虫纲鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphaga sinensis Walker或冀地鳖Steleophaga plancyi（Boleny）的雌虫干燥体。全国均有,湖南、湖北、江苏、河南、江苏的产品最佳。《神农本草经》云：“主心腹寒热,血积瘕瘕,破坚,下血闭。”《本草纲目》云：“行产后血积,折伤瘀血,重舌,木舌,小儿腹痛夜啼。”土鳖虫具有破瘀血、续筋骨之功效,用于筋骨折伤,瘀血经闭,瘕瘕痞块。     

土鳖虫口服液镇痛、活血化瘀与红细胞免疫研究

土鳖虫是传统的活血化瘀药 ,具有较广泛的中医临床治疗作用 ,其含有 17种氨基酸约占 2 7.18% ,虽有小毒 ,但不伤人体正气 ,既有补益作用 ,又有破而不峻、能行能和的特长 ,年老体弱之人均可用[1] ,现对其活血化瘀作用进行了实验研究。1　材料1.1　药品与试剂补体致敏及未致敏酵母多糖 ,冻存肿瘤细胞 ,由上海长海医院免疫室提供 ;土鳖虫口服液由本院药剂科提供 ;异丙肾上腺素由上海禾丰制药有限公司出品 ,批号 0 0 10 40 1;肾上腺素由上海禾丰制药有限公司出品 ,批号 0 0 0 70 2 7。1.2　动物SD大鼠沪动合证字 15 2号 ;ICR小鼠 ,体重 ( 2 0…     

土鳖虫最佳提取部位及有效分子量确定

土鳖虫为鳖蠊科昆虫地鳖Eupolyphaga sinensisWalker或冀地鳖Steleophaga plancyi(Boleny)的雌虫干燥体。性寒味咸,用于筋骨折伤、瘀血经闭、症瘕痞块等,是临床常用的破血类药物。本文采用PBS平皿法,通过对比不同处理方法所得溶圈面积的大小,优选了土鳖虫的最佳提取工艺。     

鸡血藤、鬼箭羽和土鳖虫调脂作用的比较

破血药土鳖虫升高血浆HDL-C/TC值和增加LCAT活性;和血药鸡血藤升高HDL₃-C/HDL₃-C比值,活血药鬼箭羽的这些作用居中。结果表明三种中药活血化瘀程度与其调脂作用大小有一定的顺序关系。     

基于ICP-MS法对4种动物源性药材中16种无机元素的测定及量变规律研究

目的 测定地龙、土鳖虫、九香虫、蜂房4种动物源性药材中无机元素,并探索其元素量变规律。方法 采用微波消解法对样品进行前处理,电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法对地龙、土鳖虫、九香虫、蜂房中铍（Be）、钒（V）、钴（Co）、镍（Ni）、镓（Ga）、硒（Se）、铷（Rb）、锶（Sr）、银（Ag）、铯（Cs）、铀（U）、铜（Cu）、砷（As）、镉（Cd）、汞（Hg）和铅（Pb）16种无机元素进行测定,并采用元素指纹图谱直观分析、元素主成分分析、偏最小二乘判别分析、聚类分析对元素含量差异性进行统计分析。结果 16种无机元素的线性关系良好（R>0.996）,回收率为87.4～113.0%。4种动物药中检测了16种无机元素含量,并绘制无机元素指纹图谱,发现其谱图具有一定的特征性,4种动物药中As、Cd和Pb残留量较高,有害无机元素的量超标应引起关注。通过主成分分析、偏最小二乘法判别分析、聚类分析,发现不同样品元素之间含量变异均能呈现出明显特征,并以此可区分不同种类的动物药。结论 通过无机元素在4种动物药中的组成分布及其量的变化规律研究,为动物药的质量控制及安全性评价提供依据,同时为动物药重金属形态价态研究提供基础参考。     

土鳖虫抗血栓活性部位及其性质研究

目的研究土鳖虫抗血栓活性部位,并对其性质进行研究。方法将土鳖虫分为壳、头、胸、腹4部分,采用反复冻融法提取成分并进行进一步实验。结果壳、胸两部分提取物无活性,头部、腹部提取物具有活性,但头部活性较小,腹部活性较大,其有效成分是糖蛋白,活性高于全虫提取物。结论腹部提取物(Tf)活性较高,具有很高的研究价值。     

土鳖虫多肽的分离纯化及溶栓活性研究

目的 对土鳖虫多肽进行分离纯化,并对其溶栓活性进行研究.方法 采用仿生酶解工艺制备土鳖虫复合多肽,以溶栓活性为指标,采用Sephadex G-25、SP Sephadex C-25凝胶柱和RP-HPLC C18半制备色谱柱对复合多肽进行分离纯化,并测定目标多肽组分(Peak b)的溶栓活性、肽含量和分子量.结果 目标多肽组分的溶栓活性为814 430 U·mg-1,肽含量为95.7％,分子量分布在3 211 ～3 547.结论 利用仿生酶解制备的土鳖虫多肽,经分离纯化后,得到一具有较强溶栓活性的多肽组分.     

中药青葙子,土鳖虫的等电聚焦电泳研究

应用等电聚焦电泳（isoelectricfocusingelectrophoresis简称IFE）技术，对果实种子类中药育葙子CelosiaargenteaL．和动物类中药土鳖虫EupolyphagasinensisWalk进行IFE研究。结果表明，清晰的电泳港带既可作为鉴别药物纯度及真伪的依据，也可用于确定药物样品所含主要蛋白质成分的等电PH，从而为中药材及其制剂的生产、贮藏提供定量参考数据。     

土鳖虫水提物对大鼠抗凝血的实验研究

土鳖虫水提物能明显地延长大鼠出血时间和复钙时间;能显著地抑制血小板聚集率和缩短红细胞电泳时间;对全血粘度、血浆粘度、纤维蛋白原含量均无影响。