手术应激对成年和婴幼鼠吞噬受体表达及其细菌杀灭能力的影响

目的 吞噬作用是宿主固有免疫抵御外来入侵病原微生物的一个关键因素.手术应激可产生机体免疫抑制,增加感染的危险.本研究旨在探讨手术应激对成年鼠和婴幼鼠吞噬受体表达及其细菌杀灭能力的影响,分析吞噬体成熟及杀菌机制,进而为临床干预提供依据.方法 取婴幼(1～2周龄)和成年(8～10周龄)Balb/C小鼠各40只,分为对照组和手术应激组.腹腔灌洗法分别取术后24 h和对照组腹腔巨噬细胞,流式细胞仪测定巨噬细胞表面吞噬受体FcγR和CR3的表达;巨噬细胞与活菌共同孵育不同时间,计数细菌菌落生长数,计算胞内细菌杀灭数.结果 经流式细胞仪测定,对照组婴幼鼠巨噬细胞吞噬受体CR3和FcγR荧光强度分别为261.77±22.75和38.42±4.29,较对照组成年鼠(453.33±23.80、43.07±12.01)表达低(P＜0.05);手术应激后,婴幼鼠表达(49.87±3.04、9.57±0.76)明显下降(P＜0.05),而成年鼠表达(263.00±9.33、45.43±1.98)下降不明显.与细菌共培养30 min和60 min后,细菌吞噬率分别为43.75％±4.70％和61.29％±10.94％,较成年鼠(58.34％±8.87％和76.02％±3.64％)低(P＜0.05),手术应激后,婴幼鼠细菌吞噬率(38.06％±12.90％和56.15％±11.00％)亦有所下降.结论 婴幼鼠较成年鼠吞噬受体表达低,细菌杀灭能力弱.手术应激后,婴幼鼠吞噬受体的表达进一步降低,吞噬功能明显受损,细菌杀灭能力进一步下降,从而增加了术后感染的风险.     

心肌细胞吞噬聚乳酸-乙醇酸纳米粒子的形态学实验

目的　探讨心肌细胞吞噬聚乳酸—乙醇酸 ( polylactic polyglycolicacid ,PLGA)纳米粒子的形态学机理 ,制备组织细胞吞噬纳米粒子的相关模型 ,为纳米粒子作为包载各类药物或基因载体提供实验形态学依据。方法 :将制备的PLGA纳米粒子加入生理盐水中 ,超声振荡成注射用纳米粒子悬浮液后 ,注射至活体家兔心肌组织内 ,4 8小时后取材切片、电镜下观察。结果 :心肌细胞胞质内及胞核内可见大量被吞噬的纳米粒子 ,并且出现了PLGA纳米粒子被吸收、降解的迹象。结论 :心肌细胞完全可以通过吞噬方式大量摄取 ;PLGA纳米粒子 ,将PLGA纳米粒子作为向心肌细胞内转运某种药物或基因的载体是完全可行的。     

选择性siRNA干扰FCGRⅡA影响THP-1吞噬调理红细胞

为探讨能否通过小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)干扰影响巨噬细胞Fcγ受体介导的吞噬作用,采用FCGRⅡA siRNA转染佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化人单核细胞THP-1,并设NO-TARGET、GAPDH、no-siRNA(1640)为对照。培养48～72h后,用FCM分析CD14+细胞的CD32、CD32b分布,用CD14的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)值作为内参,得到CD32、CD32b相对MFI值;用Western blotting观察CD32a、CD32b的蛋白表达水平;进行单核细胞单层实验(monocyte monolayer assay,MMA),结合流式细胞术分析THP-1中能吞噬调理红细胞的吞噬百分比。采用配对t检验分析FCGRⅡA组与各对照组间的分布差异。Western blotting结果证实,FCGRⅡA组CD32a量明显减少(分别为NO-TARGET组、GAPDH组、1640组的22%、42%、31%),而CD32b不降...     

低强度半导体激光照射对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的：观察低强度650nm半导体激光对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。方法：用不同功率和照射时间的650nm半导体激光辐照小鼠腹腔巨噬细胞，采用中性红吞噬实验测定巨噬细胞的吞噬能力。结果：在适当的激光功率和照射时间下巨噬细胞的吞噬能力有显著性增强。结论：低强度650nm半导体激光照射对小鼠腹腔巨噬细胞有激活作用，可增强其免疫活性。     

纤维胶原素

纤维胶原素是一组含纤维蛋白原样区和胶原样区的蛋白质,其结构与甘露聚糖结合凝集素(BML)相似,但其糖结合区不同,前者是纤维蛋白原样区,后者是糖识别域。纤维胶原素识别病原体表面的糖结构后,通过结合MBL相关丝氨酸蛋白酶而激活补体凝集素途径,还能介导调理吞噬作用。     

ELMO1在胃癌细胞侵袭和迁移中的作用

目的:探讨吞噬和细胞运动蛋白1(ELMO1)的表达在胃癌细胞侵袭和迁移中的作用和功能。方法:用Western blot和实时荧光定量PCR实验检测5种胃癌细胞和1种人正常胃黏膜上皮细胞ELMO1的蛋白和mRNA表达水平,并筛选出ELMO1表达量高的胃癌细胞株;用细胞转染实验沉默胃癌细胞株的ELMO1;用细胞划痕实验以及Trenswell小室迁移和侵袭实验检测抑制该基因的表达对胃癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:胃癌细胞中ELMO1的表达量明显高于人正常胃黏膜上皮细胞(P0.01),其中SGC7901细胞的ELMO1表达量最高;在SGC7901细胞中ELMO1-siRNA可显著沉默ELMO1的表达(P0.05);沉默ELMO1可显著降低胃癌细胞侵袭和转移的能力(P0.01)。结论:ELMO1在胃癌细胞中高表达,并可促进胃癌细胞的侵袭和迁移。     

干扰NaV1.9对RAW264.7细胞增殖、吞噬和迁移的影响

目的 应用RNA干扰技术沉默RAW264.7小鼠巨噬细胞中电压门控性钠通道(VGSCs/NaVs)α亚单位NaV1.9基因,建立稳定干扰细胞株,并观察其对细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能的影响.方法 通过LipofectamineTM2000将短发夹RNA(shRNA)干扰质粒转染至RAW264.7细胞,经G418筛选获得稳定细胞株.用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定干扰效率,CCK-8法测定稳定细胞株的增殖活性,流式细胞术检测细胞的细胞周期及吞噬能力,Transwell小室法检测细胞的迁移功能.结果 成功建立稳定干扰NaV1.9的细胞株,RT-PCR法鉴定干扰效率达80％.CCK-8法及流式细胞术结果显示,降低NaV1.9的表达使细胞增殖活性下降(P＜0.05);流式细胞术结果显示,抑制NaV1.9的表达使细胞吞噬能力降低(P＜0.05);Transwell小室法结果显示,干扰NaV1.9的表达使细胞迁移能力减弱(P＜0.05).结论 建立了稳定干扰NaV1.9的RAW264.7细胞株,下调NaV1.9的表达使巨噬细胞增殖活性、吞噬能力和迁移功能显著降低.     

阿霉素诱导心肌细胞死亡机制

阿霉素是目前最为有效的抗肿瘤药物之一,其主要的严重副作用是累积性、剂量依赖性的心肌毒性反应,可进一步发展成不可逆性心肌损伤,最终导致充血性心力衰竭.心肌细胞凋亡和坏死被认为是阿霉素诱导心肌病变发展过程中的主要因素,自我吞噬和细胞老化等其他细胞死亡方式也参与此过程.阿霉素诱导心肌细胞死亡的机制可能包括:氧化应激以及由此发...     

DJ-1在肿瘤中作用的研究进展

DJ-1基因是一种新的线粒体依赖癌基因。当前在帕金森病领域,对DJ-1基因的研究较多,认为其与人类家族性早发型帕金森病相关。近来研究发现DJ-1基因与人类多种恶性肿瘤的发生、进展及预后等密切相关,可作为癌症发生的预警标志物,但也有DJ-1在肿瘤中低表达的报道。