应用反向线性杂交技术快速检测结核分枝杆菌利福平耐药性研究

探讨反向线性杂交技术(reverse line blot assay,RLB)在结核分枝杆菌利福平(RFP)耐药性快速检测中的应用价值.采用RLB将包含rpoB基因核心区的扩增产物与标记特异性探针的膜进行杂交,共对121株结核分枝杆菌进行RFP耐药性检测,并将结果与常规药敏实验进行比较.结果发现,121株中有71株对RFP耐药,56株为多重耐药株;采用RLB共检测到65株RFP耐药株rpoB基因核心区存在突变,其灵敏度为91.5%(65/71);50株RFP敏感株中均未检测到突变,则特异性为100%(51/51);56株多耐药菌株中,92.9%(52/56)存在rpoB基因核心区突变.因此,用RLB检测结核分枝杆菌RFP耐药株具有快速,高效,特异性和灵敏度高的优点,且可用于多耐药菌株的筛选,具有推广和潜在的临床应用价值.     

神经网络方法在脑诱发电位检测中的应用

人工神经网络是脑电研究中适用的新工具和技术。本文着重介绍了ＢＰ网络的基本原理，并给出了神经网络在诱发电位和事件关联电位检测研究中的应用。     

浙江丽水地区β地中海贫血基因突变类型的研究

目的了解浙西南地区β地中海贫血基因突变的类型.方法对经过初筛的患者用反向点杂交法确定基因突变类型.结果在本地区共检出五种基因突变类型,分别为β珠蛋白基因IVS-2nt654(C→T)突变,占40%;CD41-42(-TCTT)突变,占36%;CD17(A→T)突变,占16%;TATA box nt-28(A→G)突变,占4%;CD27-28(+C)突变,占4%.结论本研究结果对本地区开展β地中海贫血基因分析、婚前指导、遗传咨询和产前诊断具有重要意义.     

GnRH-α反向添加疗法对子宫内膜异位症术患者性激素水平的影响研究

目的:分析GnRH-α反向添加疗法对性子宫内膜异位症手术患者的性激素水平及性欲的影响,为子宫内膜异位症手术患者术后临床症状改善及性激素分泌平衡维持治疗选择方案提供治疗参考。方法:选择2013年2月至2016年2月我院收治的56例行子宫内膜异位症手术患者作为研究对象,将其采用数字随机表法分为对照组和试验组,每组28例。对照组术后予以常规治疗,试验组患者在常规治疗的基础上再予以GnRH-α反向添加疗法。两组患者均连续治疗6个月。分别比较两组患者术前、术后1周、术后4周、2个月、6个月的雌二醇、黄体酮及睾酮水平;比较两组患者术后4周和8周更年期症状评分(改良Kupperman评分)、潮热、情绪波动、腹痛发生率;比较两组患者术后6个月性欲减退发生率。结果:试验组与对照组治疗前、术后1周雌二醇、睾酮明显高于正常值,卵泡期黄体酮明显高于正常值,组间比较差异均无统计学意义(P0.05);术后经药物治疗4周、6个月后,两组患者的雌二醇、卵泡期黄体酮及睾酮水平均有明显降低(P0.05),但试验组上述指标明显低于对照组,组间差异有统计学意义(P0.05)。试验组治疗4周、8周后潮热、情绪波动、腹痛发生率明显低于对照组患者(P0.05),Kupperman评分均明显低于对照组(P0.05)。两组治疗6个月后,试验组性欲减退发生率14.29%(4/28),明显低于对照组32.14%(9/28),(χ~2=11.214,P=0.000)。结论:GnRH-α反向添加疗法对改善子宫内膜异位症手术患者术后性激素水平疗效确切,对患者术后6个月性欲影响较小,具有较高的临床价值。     

结核杆菌耐药性调查与基因突变分析

目的了解结核分支杆菌耐药性与基因突变情况,分析耐药表型与基因突变的相关性。方法从临床标本中分离培养、鉴定结核分支杆菌;应用药敏试验、单链探针反向杂交试验技术(LiPA)和基因测序分析结核分支杆菌耐药性与基因突变情况。结果50株结核分支杆菌中,12株耐异烟肼(INH),7株耐利福平(RFP),15株耐链霉素(SM),2株耐乙胺丁醇(EMB)。LiPA检测耐RFP菌株,4株rpoB基因531位TCG→TTG突变;耐INH菌株中5株KatG基因315位AGC→ACC突变;耐SM菌株中6株、SM敏感株1株rpsl基因43位AAG→AGG突变,1株耐SM菌株rpsl基因88位AAG→AGG突变;rrs基因未检测到突变;1株耐EMB菌株与1株EMB敏感株的embB基因306位发生ATG→GTG突变。结论本市结核分支杆菌的耐药性增加的趋势显著,加强监测与综合干预非常必要。     

Gap-LCR-ELISA法与PCR-反向杂交法对沙眼衣原体的检测的对比研究

沙眼是由沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，CT）感染引起的一种感染性眼病，是全球因感染而致盲的主要病因，集中在非洲和亚洲。本研究对167份标本用质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附测定（Gap—LCR—ELISA）法及PCR-反向杂交法进行检测，并与传统的培养法比较，结果报道如下。     

反向膜杂交技术快速检测质粒介导喹诺酮耐药基因qnr方法的建立

目的 结合PCR与反向膜杂交技术,探讨建立快速筛查细菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因qnr的方法.方法 将qnr各亚型的特异性探针加尾后固定于尼龙膜上,用标记生物素的各亚型引物分别扩增经提取的细菌DNA,与固定在膜上的探针杂交.结果 25株qnr阳性菌株中,有6株qnrA阳性菌株,9株qnrB阳性菌株,10株qnrS阳性菌株.所有阳性菌株均能通过反向膜杂交检测到相应的qnr基因的亚型,且可以在同一张膜上进行检测.结论 该方法能够快速、准确地检测出临床病原微生物中质粒介导的喹诺酮类耐药基因qnr,这对于指导临床及时合理用药,采取措施防止耐药菌的传播均有重要意义.     

基于反向滤波器的倒谱法估计平均骨小梁间距

目的 探讨用改进的倒谱方法估计平均骨小梁间距(mean trabecular bone spacing,MTBS)的可行性.方法 提出了一种基于反向滤波器的改进的倒谱分析方法用于估计MTBS,并将该方法应用于仿真及离体牛胫骨松质骨中的实验信号.结果 改进的倒谱方法能有效减少超声换能器脉冲响应和组织散射特性对倒谱的干扰,而且实现简单,计算量小.结论 相比于传统的倒谱方法,改进的倒谱方法在估计MTBS时, 对弥散散射和噪声有更强的鲁棒性,因此估计MTBS的精度更高.     

多重PCR/反向线点杂交(RLB)检测细菌性脑膜炎病原体的研究

目的建立快速、高通量的多重PCR/反向线点杂交(RLB)的方法检测3种细菌性脑膜炎病原体--肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌。方法针对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和脑膜炎奈瑟菌的特异性基因序列设计引物和相应的特异性探针,优化多重PCR/RLB检测中的引物浓度、dNTP浓度、探针的浓度等的条件。结果多重PCR/RLB检测对肺炎链球菌DNA最低检测极限可达6.2×10-1ng/μl,对流感嗜血杆菌DNA最低检测极限可达8.5×10-8ng/μl,对脑膜炎奈瑟菌DNA最低检测极限可达8.3×10-8ng/μl。结论多重PCR/RLB检测体系能够正确的鉴定3种细菌性脑膜炎病原体,用于临床样本的高通量筛查细菌性脑膜炎病原体,特异性好,灵敏度高。     

关于皮下反向缝合免皮肤缝合的观察

目的探讨皮下反向缝合免皮肤缝合在手术切口缝合中的应用效果。方法选取2012年6月~2013年5月在我院进行外科手术的患者96例,按照切口缝合方法分成观察组和对照组各48例,观察组采用皮下反向缝合免皮肤缝合法,对照组采用传统单纯对合缝合,观察两组切口愈合时间、瘢痕面积和并发症发生情况。结果观察组切口愈合时间明显少于对照组(P<0.05),瘢痕评分明显高于对照组(P<0.05),并发症发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论在手术切口缝合中应用皮下反向缝合免皮肤缝合能够提高切口愈合质量,缩短愈合时间,减少并发症的发生,安全有效,值得临床推广。