反向点杂交法在β-地中海贫血基因诊断中的应用

目的初步评价反向点杂交法对β-地中海贫血基因的诊断效能。方法使用反向点杂交法对1 004例疑似β-地中海贫血病例进行基因诊断。结果1 004例外周血样品中有283例β-地中海贫血。共发现11种突变,其中CD41-42(40．89％),IVS-2-654(22．68％),CD17(12．71％),TATAbox-28(14．43％),CD43 (3．78％)和CD26(1．72％),占突变的95％以上。结论反向点杂交法具有快速、准确的优点,适用于普通人群的β-地中海贫血分子检测和产前诊断。     

改进型反向基因操作系统的构建和流感病毒变异株的选育

目的构建一个新型的反向基因操作系统,并利用该技术获得流感病毒变异株。方法用分子生物学方法把表达蛋白载体(pQBI50_BFP_fA1)和转录基因载体(pHH21)两个载体有机地整合,构建出既能表达病毒蛋白又能转录基因的单一载体(pPol_Ⅱ/Ⅰ);同时通过RT_PCR提取A/Ann Arbor/6/60病毒的cDNA,然后把8个病毒基因分别克隆到pPol_Ⅱ/Ⅰ载体;通过点变异和基因删除方法对M和NS基因进行改进;用细胞培养和细胞免疫染色法测定重组病毒的生物特征。结果成功构建了由8个小质粒组成的转染细胞能力较强的一个新型反向基因操作系统。同时在M和NS基因上加以分子生物学的改进,并获得2个对温度敏感和增殖力低的新毒株。结论一个改进型反向基因操作系统被成功建立,且利用这个系统拯救出2个流感变异株。这个系统不仅在流感病毒的分子基础研究而且将在减毒性活疫苗的研发上发挥重要作用。这2个流感变异株作为减毒性活疫苗的候选株具有较好的开发前景。     

RNA干扰技术及其在神经科学研究中的应用

RNA干扰(RNAi)是指生物体内由双链RNA介导同源序列mRNA的特异性降解,从而导致基因沉默的现象.近年来,随着对RNAi研究的不断深入,其作用机制正在逐步被阐明;同时作为阻断基因表达的新手段,RNAi技术也日趋完善和成熟.以其高效性和特异性,RNAi为反向遗传学在神经科学研究中的应用提供了有力的工具.本文仅就RNAi技术的有关研究进展及其在神经科学研究中的应用作一概述.     

GnRH-α反向添加疗法对子宫内膜异位症术患者性激素水平的影响研究

目的:分析GnRH-α反向添加疗法对性子宫内膜异位症手术患者的性激素水平及性欲的影响,为子宫内膜异位症手术患者术后临床症状改善及性激素分泌平衡维持治疗选择方案提供治疗参考。方法:选择2013年2月至2016年2月我院收治的56例行子宫内膜异位症手术患者作为研究对象,将其采用数字随机表法分为对照组和试验组,每组28例。对照组术后予以常规治疗,试验组患者在常规治疗的基础上再予以GnRH-α反向添加疗法。两组患者均连续治疗6个月。分别比较两组患者术前、术后1周、术后4周、2个月、6个月的雌二醇、黄体酮及睾酮水平;比较两组患者术后4周和8周更年期症状评分(改良Kupperman评分)、潮热、情绪波动、腹痛发生率;比较两组患者术后6个月性欲减退发生率。结果:试验组与对照组治疗前、术后1周雌二醇、睾酮明显高于正常值,卵泡期黄体酮明显高于正常值,组间比较差异均无统计学意义(P0.05);术后经药物治疗4周、6个月后,两组患者的雌二醇、卵泡期黄体酮及睾酮水平均有明显降低(P0.05),但试验组上述指标明显低于对照组,组间差异有统计学意义(P0.05)。试验组治疗4周、8周后潮热、情绪波动、腹痛发生率明显低于对照组患者(P0.05),Kupperman评分均明显低于对照组(P0.05)。两组治疗6个月后,试验组性欲减退发生率14.29%(4/28),明显低于对照组32.14%(9/28),(χ~2=11.214,P=0.000)。结论:GnRH-α反向添加疗法对改善子宫内膜异位症手术患者术后性激素水平疗效确切,对患者术后6个月性欲影响较小,具有较高的临床价值。     

克隆外显子探针反向斑点杂交检测DMD基因缺失

目的 :制备检测 DMD基因常见易缺失外显子的核苷酸探针 ,通过反向斑点杂交试验验证其特异性 ,为初步研制 DMD基因诊断芯片作准备。方法 :从健康人外周静脉血白细胞提取基因组 DNA,应用经典 18对引物对 DMD基因常见易缺失外显子进行 PCR扩增。将扩增产物与 p GEM@- T Easy载体连接 ,转化 E.coli JM10 9感受态细胞。克隆目的片段 ,并作测序鉴定。以此为探针进行反向斑点杂交试验。结果 :序列分析表明 ,克隆片段代表 DMD基因 18个常见易缺失外显子 ;以这些片段为探针进行反向斑点杂交 ,其结果与 PCR相符。结论 :克隆的基因片段用作探针在反向斑点杂交试验中显示出较好的特异性 ,可用于 DMD基因常见缺失的检测     

基于髋关节功能评价抗旋髓内钉治疗老年股骨近端骨折☆

背景:股骨近端骨折的患者有78.9%都是年龄在65岁以上的老年人,常伴有心血管系统疾病、糖尿病或肺部疾病等,外科治疗风险大,而且存在骨质疏松现象,骨折后愈合较慢,因此在治疗上要求创伤性小,出血少,内固定牢固. 目的:对抗旋髓内钉置入内固定治疗股骨近端骨折研究的文献资料趋势进行多层次探讨分析. 方法:以电子检索方式对CNKI数据库学术期刊2008-01/2011-12收录有关抗旋髓内钉置入内固定治疗股骨近端骨折研究的文献进行分析,采用检索词为“抗旋髓内钉;股骨近端;骨折;置入内固定”,运用数据库的分析功能和Excel软件图表的功能分析数据特征. 结果与结论:在CNKI数据库学术期刊2008/2011收录的文献中,共检索到35篇与抗旋髓内钉置入内固定治疗股骨近端骨折研究相关的文献.2011年收录的文献最多为23篇,文献数量处于上升的发展趋势.以外科学分类的文献数量最多.发表文献量较多的期刊为《临床骨科杂志》.文献关键词分析显示抗旋髓内钉主要用于治疗老年人股骨转子间骨折.抗旋髓内钉治疗老年股骨转子间骨折的关节功能评分优良率在80%以上,手术需要时间短,术后骨折愈合良好,恢复时间快,并发症少.抗旋髓内钉置入内固定是治疗老年股骨近端骨折较理想的方法.     

海南地区β-地中海贫血基因突变类型的研究

目的　了解海南省 β -地中海贫血基因突变类型特点。方法　用反向点杂交法分析 30例临床诊断为 β -地中海贫血患儿及 3对曾生育过重型地贫患儿的夫妇的基因突变类型。结果　 30例患儿中 7例为纯合子 ;1 5例为双重杂合子 ;8例为杂合子。 58条 β -地贫阳性染色体中确定 8种突变类型 ,其中CD41 - 4 2 (-TTCT) (占 51 7%) ;- 2 8(AG) (占1 3 8%) ;CD71 - 72 ( A) (占 1 0 3 %) ;IVS-II- 654(CT) (占 1 0 3 %) ;- 2 9(AG) (占 1 72 %) ;CD1 7(AT) (占 1 72 %)CD2 6(GA) (占 1 72 %) ;起始codon(ATGACG) (占 1 72 %)还有不明 (占 6 9%)。结论　海南省 β -地中海贫血的基因突变类型与国内广东、广西、湖北相似 ,以CD41 - 4 2 ,- 2 8,CD71 - 72 ,IVS -II 654 ,4种类型为常见。明显不同于海南黎族     

促性腺激素释放激素激动剂治疗子宫内膜异位症反向添加药物疗效比较研究北大核心CSCD

目的探讨子宫内膜异位症(内异症)腹腔镜术后采用促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)治疗时不同反向添加药物的疗效。方法选择2013年5月至2014年12月于四川大学华西第二医院经腹腔镜确诊并进行手术治疗的Ⅱ~Ⅳ期内异症或子宫腺肌病患者135例为研究对象,随机分为安今益组、替勃龙组及坤泰胶囊组,每组各45例。3组患者均于术后恢复月经第1天肌注曲普瑞林3.75mg(记为第0周),4周1次,共3次。于第2次肌注曲普瑞林时反向添加治疗,分别服用安今益、替勃龙及坤泰胶囊3种药物共8周。观察比较3组改良Kupperman评分(KMI)、血清雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)水平及超声下子宫内膜厚度。结果安今益组、替勃龙组及坤泰胶囊组第12周时的KMI(分别为8.00±2.94,9.05±3.35,9.19±4.11)均明显低于第4周(分别为15.56±5.47,15.49±4.94,15.86±4.57),差异均有统计学意义(P=0.000);第4、12周时3组间KMI差异均无统计学意义(P>0.05);3组间E2、FSH及子宫内膜厚度差异无统计学意义(P>0.05)。结论安今益、替勃龙和坤泰胶囊均可有效地缓解Gn RH-a引起的低雌激素状况。