狼疮肾炎患者anti-GBM与anti-dsDNA和anti-NuA相关性研究

目的探讨狼疮肾炎患者抗肾小球基底膜抗体(anti-GBM)与抗双链DNA抗体(anti-ds DNA)和抗核小体抗体(anti-NuA)的关系。方法反馈分析28例anti-GBM阳性的狼疮肾炎患者致肾炎抗体间的关系。结果28例anti-GBM阳性的狼疮性肾炎患者有13例anti-ds DNA阳性和17例anti-NuA阳性。并且,血清anti-GBM的水平与anti-ds DNA和/或anti-NuA水平一致。结论anti-GBM与anti-ds DNA和anti-NuA呈正相关;联合检测这些肾炎抗体对疾病的治疗和预后判断有指导意义。     

表达结核特异性 Vγ9 Vδ2 TCR 双链单体的果蝇 S2恒定细胞系的构建和鉴定

目的：转染及筛选鉴定能够稳定表达和分泌V γ9Vδ2 T细胞受体（ TCR）双链单体的果蝇S2恒定细胞系。方法利用氯化钙转染法将TCR γ9-FB-pMT／V5-His B质粒、TCR δ2-JB-pMT／V5-His A质粒、pMT／Bip-BirA质粒和pCoHygro潮霉素质粒转染进S2细胞中,用潮霉素B筛选恒定细胞系后表达生物素化的结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体,并加以鉴定。结果斑点印迹试验、SDS-PAGE和Western blot表明细胞培养上清中有V γ9Vδ2 TCR单体,且已被成功生物素化。结论成功筛选出能稳定分泌表达Vγ9 V δ2 TCR的果蝇S2恒定细胞系,为研究γδ T细胞的免疫识别提供实验资料。     

抗SmD1、抗核小体抗体、抗双链DNA抗体在系统性红斑狼疮诊断中的意义

目的评价血清抗SmD1、抗核小体抗体(AnuA)、抗双链DNA(dsDNA)联合检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的价值。方法40例SLE患者、14例其他结缔组织病患者及20名健康人血清抗dsDNA采用放射免疫法检测,抗SmD1、AnuA用德国IMTEC公司抗核抗体谱线性印迹法检测。结果SLE患者单项检测抗dsDNA、抗SmD1、AnuA的阳性率分别为42．5％、80．0％、72．5％,三者联合检测后的阳性率为87．5％,诊断效率为85．2％。结论抗SmD1、AnuA、抗dsDNA联合检测提高了诊断SLE的敏感性和诊断效率,可避免因单项检测出现的漏诊情况,对SLE的诊断和治疗有重要意义。     

精子DNA单双链损伤与精子浓度的关系研究

目的:研究男性不育患者精子浓度与精子DNA单双链损伤的关系,探讨少精症的发生机制。方法:研究对象为120例男性不育患者,年龄25~40岁之间,根据世界卫生标准进行精液常规检测分析精子的浓度、活力等,利用双尾彗星试验分析精子DNA单双链损伤指数。结果:120例男性不育患者根据精子浓度分为三个研究组,即组1(精子浓度10×10~6m L~(-1))、组2(精子浓度20×10~6m L~(-1))和组3(精子浓度20×10~6m L~(-1)),每组40例。三组之间年龄、精子活力及精子畸形率没有统计学差异;组1精子DNA损伤指数(DFI)为(59.48±15.21)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(25.86±11.86)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(43.31±13.72)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(31.93±10.21)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(53.85±10.27)%;组2精子DNA损伤指数(DFI)为(34.02±1.77)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(26.71±3.45)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(78.59±9.78)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(8.37±3.04)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(21.40±9.79)%;组3精子DNA损伤指数(DFI)为(20.77±2.43)%,单链损伤指数(SSB-DFI)为(20.44±2.39)%,SSB占所有损伤精子的比率(SSB-DFI/DFI)为(98.44±2.87)%,双链损伤指数(DSB-DFI)为(1.32±0.61)%,DSB占所有损伤精子的比率(DSB-DFI/DFI)为(1.55±2.87)%。三组间SSB-DFI无显著差异(P0.05),SSB-DFI/DFI在组1、组2和组3间随精子浓度升高而逐渐升高(P0.05),DSB-DFI随精子浓度升高而逐渐下降(P0.05),DSB-DFI/DFI随精子浓度升高而逐渐下降(P0.05)。精子SSB-DFI及SSB-DFI/DFI与其他精液常规参数均无相关关系(P0.05),精子DSB-DFI及DSB-DFI/DFI与精子浓度呈负相关(P0.05)。结论:精子DSB-DFI和DSB-DFI/DFI水平越高,精子浓度就越低,精子DNA双链损伤可能是精子浓度低的真正原因。     

联合检测C1q抗体、双链DNA抗体对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的探讨联合检测C1q抗体、双链DNA（dsDNA）抗体对狼疮活动和狼疮性肾炎的价值。方法58例系统性红斑狼疮分为疾病活动和疾病稳定组、狼疮性肾炎和非狼疮性肾炎组，酶联免疫吸附法检测血清C1q抗体和dsDNA抗体水平，比较两抗体单个和联合检测对疾病活动和狼疮性肾炎的价值。结果C1q抗体和dsDNA抗体阳性对疾病活动的敏感性分别为63．88％和69．44％，特异性分别为81．82％和86．36％；两抗体联合对疾病活动的敏感性为83．33％，特异性为72．73％，两抗体的一致率为70．68％。疾病活动组两抗体阳性率和抗体水平显著高于疾病稳定组；两抗体与系统性红斑狼疮疾病活动指数、血沉、IgG、球蛋白水平显著正相关，与C3、C4及白蛋白水平显著负相关。狼疮性肾炎组dsDNA水平显著高于非狼疮性肾炎组，尿蛋白≥（＋＋）患者C1q抗体水平显著增高。结论C1q抗体和dsDNA抗体都是狼疮疾病活动的指标，两抗体都与狼疮性肾炎有关，联合检测可以提高疾病活动检出率。     

慢性粒细胞白血病PKR基因的表达及临床意义

目的检测双链RNA依赖性蛋白激酶(double-stranded RNA-dependent protein kinase,PKR)基因在慢性粒细胞白血病(CML)病人及CML细胞株K562细胞中的表达情况。方法分离CML患者慢性期(CP)15例,加速期(AP)11例,急变期(BC)9例及11例正常供者骨髓或外周血单个核细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测其PKR基因表达情况,并同时检测PKR基因在K562细胞中的表达。结果正常对照组PKR表达阳性率为90.9%,高于加速期的81.8%(P0.05)及急变期的77.8%(P0.05);正常对照组PKR/GAPDH比值为(0.92±0.40)%,高于慢性期的(0.85±0.32)%(P0.05)及加速期的(0.72±0.54)%(P0.05),明显高于急变期的(0.46±0.31)%(P0.01)。K562细胞PKR/GAPDH比值为(0.55±0.13)%。结论 CML细胞及K562细胞株都有一定丰度的蛋白激酶PKR基因表达,为通过激活PKR而靶向诱导CML细胞凋亡奠定理论基础。     

高分辨率熔解曲线及其在分子诊断中的应用

通过加热使双链DNA解离为单链是DNA基本特性之一,高分辨率熔解曲线（high resolutionmelting,HRM）正是基于这一特性,采用荧光饱和染料监测熔链过程,从而获得DNA上的相关信息,例如突变、单核苷酸多态性（single nucleotidepolymorphism,SNP）等。由于其快速、高通量、低成本,已越来越多应用于临床疾病的分子诊断与分型。     

抗核抗体、抗双链DNA抗体和抗可溶性抗原抗体检测项目的方法学性能验证

目的建立抗核抗体(ANA)、抗双链DNA抗体(ds-DNA)和抗可溶性抗原抗体(ENA)检测项目方法学性能验证的方案,确保检测方法的性能满足实验室及临床诊疗的质量要求。方法按照ISO15189相关文件的要求,对其符合率、检出限、重复性、人员比对、设备与环境等5个方面进行验证。结果 5个方面的性能验证符合相应的标准要求。结论抗核抗体、抗双链DNA抗体和抗可溶性抗原抗体检测项目方法学性能验证的方案能够满足ISO15189的要求,同时满足临床实验室的要求,能够为临床实验室更合理的评价和应用检测方法提供参考。     

一种双链复合季铵盐手消毒液消毒效果现场试验研究

目的评价一种双链复合季铵盐手消毒液现场消毒效果,为临床消毒实际应用提供依据。方法采用现场消毒试验方法,对医院自愿受试者手进行现场消毒效果观察。结果用该复合季铵盐消毒液在手和前臂皮肤上喷洒湿润作用2 min,再用该消毒液擦拭1 min,对皮肤上自然菌平均清除率为96.63%。结论该双链复合季铵盐手消毒液对医务人员手上自然菌具有良好的消毒效果,对皮肤无刺激性。